【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及体外诊断，具体的说，涉及一种尿液唾液同检的人绒毛膜促性腺激素胶体金检测试纸条及试剂盒。
技术介绍
1、尿中人绒毛膜促性腺激素（hcg）的检测在临床上用于早期妊娠诊断已经非常广泛，但唾液的检测在hcg的检测研究还比较少。
2、目前市面上传统的尿中人绒毛膜促性腺激素（hcg）检测试纸条主要是通过尿液测试判断是否怀孕，但是尿液的采集受场合限制，且如果操作不当容易造成污染；另外，也可以通过血液测试判断是否怀孕，作为早期诊断或者otc诊断，但是血液测试存在采血不方便、需要专业人士进行操作的问题，无法做到在任何时间、任何地点快速收集。
3、唾液中含有许多蛋白质及遗传分子，像酶、激素、抗体、生长因子及其他抗微生物成分等。唾液成分的改变常常是由于唾液腺本身功能异常，或者存在影响唾液腺功能的疾病，因而唾液成分可以反映身体的某些侧面。使用唾液作为诊断性媒体，简便、无痛、无损伤的取样是一个很大的优势，可以提高患者的依从性。选择采集唾液的部位为牙龈组织，所收集的多为口腔粘膜漏出液，且多采用如擦拭法收集，病人或体检者自己都可以收集，可以在任何时间、任何地点收集。但是目前并没有可以用唾液来检测尿中人绒毛膜促性腺激素（hcg）的试剂盒，也没有可以尿液唾液同时检测的人绒毛膜促性腺激素胶体金检测试纸条及试剂盒。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种尿液唾液同检的人绒毛膜促性腺激素胶体金检测试纸条及试剂盒，可以兼容两种样本类型，使得生产过程中，节约耗材成本、人工成本及检
2、为实现上述目的，本专利技术采用的技术方案如下：一种尿液唾液同检的人绒毛膜促性腺激素胶体金检测试纸条，包括底板，底板上从左到右依次搭接有样品垫、生物素化垫、靶向多肽金垫、硝酸纤维素膜和吸水纸，靶向多肽金垫上固相有靶向多肽金颗粒标记的人绒毛膜促性腺激素抗体2，浓度为15μg/ml；生物素化垫上固相有生物素化的人绒毛膜促性腺激素抗体1，浓度为15μg/ml。
3、作为上述技术方案的进一步改进：
4、所述靶向多肽金垫的制备方法为：配制金重悬液，金重悬液由0.1mol/l ph8.5的tris-hcl缓冲液 、质量百分数为0.5%的bsa、质量百分数为10%的蔗糖、质量百分数为10%的海藻糖、质量百分数为0.2%的proclin300配制而成，用金重悬液将靶向多肽金颗粒标记的人绒毛膜促性腺激素抗体2进行稀释后，即得靶向多肽金标记抗体工作溶液，喷涂于结合垫上，得到靶向多肽金垫。
5、所述靶向多肽金颗粒标记的人绒毛膜促性腺激素抗体2的制备方法包括如下步骤：
6、（1）制备靶向多肽金溶液，制备的靶向多肽金粒径为200nm，包括以下步骤：
7、a、取1.5ml的1.0×10-4g/ml氯金酸水溶液，用蒸馏水稀释到30ml，搅拌并加热到80℃，5min后加入0.15ml质量百分数1%的柠檬酸三钠，继续加热15min，冷却至室温，即得金溶液；
8、b、取30ml的1.0×10-4g/ml氯金酸水溶液和1ml步骤a制得的金溶液，混合，搅拌并加热至沸腾，加入稳定剂聚乙烯吡咯烷酮0.1g，8min后迅速加入强还原剂硼氢化钾0.6ml，在沸腾下反应2min，自然冷却至室温，即得靶向多肽金溶液；
9、（2）用步骤（1）制得的靶向多肽金溶液标记人绒毛膜促性腺激素抗体2，包括以下步骤：
10、取步骤（1）中所得靶向多肽金溶液100ml，调节ph值至8.0，加入1.5mg人绒毛膜促性腺激素抗体2，再加入1ml 20％牛血清白蛋白溶液，离心，弃去上清液，得沉淀物，加入金重悬液10ml，即得靶向多肽金颗粒标记的人绒毛膜促性腺激素抗体2。
11、 所述生物素化垫的制备方法为：配制金重悬液，金重悬液由0.1mol/l ph8.5的tris-hcl缓冲液 、质量百分数为0.5%的bsa、质量百分数为10%的蔗糖、质量百分数为10%的海藻糖、质量百分数为0.2%的proclin300配制而成，用金重悬液将生物素化的人绒毛膜促性腺激素抗体1进行稀释后，即得生物素化抗体工作溶液，涂布于结合垫上，得到生物素化垫。
12、所述生物素化的人绒毛膜促性腺激素抗体1的制备方法包括如下步骤：
13、（1）用量筒量取超纯水倒入烧杯中；
14、（2）用剪刀剪取适当长度透析袋，放入盛0.1m pb缓冲液的烧杯中，放到电阻炉上加热直至透析袋煮开；
15、（3）取透析袋用超纯水冲洗干净，甩干，恢复室温；
16、（4）用夹子夹住其中一边，将人绒毛膜促性腺激素抗体1稀释至2mg/ml，加入透析袋中，用透析夹夹好，放入2000ml 0.1m pb缓冲液中，2-8℃冰箱透析8小时，每隔2h更换一次0.1m pb缓冲液，每次用量为2000ml，更换4次；
17、（5）透析完成后将人绒毛膜促性腺激素抗体1取出，即得到生物素化的人绒毛膜促性腺激素抗体1。
18、所述靶向多肽金垫和生物素化垫置于37±2℃烘箱中干燥12小时。
19、所述硝酸纤维素膜的制备方法为：将sa偶联抗原用稀释液稀释至1.2mg/ml，作为检测线液体；将羊抗鼠单克隆抗体用稀释液稀释至1.5mg/ml，作为质控线液体，分别用划膜仪喷于硝酸纤维素膜上作为检测线和质控线，置于37℃烘箱中干燥4小时。
20、 所述样品垫的制备方法为：首先，配制处理液，处理液由0.1mol/l ph9.0的tris-hcl缓冲液、质量百分数为1.0%的pvp10、质量百分数为1.0%的s17、质量百分数为0.5%的酪蛋白、质量百分数为1.0%的edta、质量分数为0.05%阻断剂、质量分数为1.5%氯化钠配制而成；其次，将处理液涂布于玻璃纤维上，得到样品垫。
21、所述尿液唾液同检的人绒毛膜促性腺激素胶体金检测试纸条的制备方法为：在底板上从左到右依次搭接样品垫、生物素化垫、靶向多肽金垫、硝酸纤维素膜、吸水纸，即得尿液唾液同检的人绒毛膜促性腺激素胶体金检测试纸条。
22、一种尿液唾液同检的人绒毛膜促性腺激素胶体金检测试剂盒，包括检测笔和尿杯，检测笔包括壳体、笔盖和上述的尿液唾液同检的人绒毛膜促性腺激素胶体金检测试纸条，尿液唾液同检的人绒毛膜促性腺激素胶体金检测试纸条设置在壳体内，壳体上表面设有观察窗，壳体的一端设有吸水垫，吸水垫的一端与样品垫连接，使待测样品能层析到样品垫上，吸水垫设置在笔盖内，笔盖与壳体卡扣连接。
23、本专利技术采取以上技术方案，具有以下优点：
24、1、本专利检测笔中的试纸条将生物素放大系统应用于胶体金颗粒免疫层析体系，并采用靶向多肽金标记抗体，提高检测试剂的灵敏度，有效降低漏检，同时样品垫中添加阻断剂提高特异性，能够同时检测尿液及唾液样本，对于生产而言，节约耗材成本及人工成本；对于检测而言，患者依从性高，不受时间地点限制即可进行检测；
25、2、本专利技术操作简单，无需专业人员，本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种尿液唾液同检的人绒毛膜促性腺激素胶体金检测试纸条，其特征在于：包括底板（9），底板（9）上从左到右依次搭接有样品垫（1）、生物素化垫（8）、靶向多肽金垫（7）、硝酸纤维素膜（6）和吸水纸（5），靶向多肽金垫（7）上固相有靶向多肽金颗粒标记的人绒毛膜促性腺激素抗体2，浓度为15μg/mL；生物素化垫（8）上固相有生物素化的人绒毛膜促性腺激素抗体1，浓度为15μg/mL。
2.根据权利要求1所述的一种尿液唾液同检的人绒毛膜促性腺激素胶体金检测试纸条，其特征在于：所述靶向多肽金垫（7）的制备方法为：配制金重悬液，金重悬液由0.1mol/LpH8.5的Tris-HCL缓冲液 、质量百分数为0.5%的BSA、质量百分数为10%的蔗糖、质量百分数为10%的海藻糖、质量百分数为0.2%的Proclin300配制而成，用金重悬液将靶向多肽金颗粒标记的人绒毛膜促性腺激素抗体2进行稀释后，即得靶向多肽金标记抗体工作溶液，喷涂于结合垫上，得到靶向多肽金垫（7）。
3.根据权利要求2所述的一种尿液唾液同检的人绒毛膜促性腺激素胶体金检测试纸条，其特征在于：所述靶向多肽金颗粒
4.根据权利要求3所述的一种尿液唾液同检的人绒毛膜促性腺激素胶体金检测试纸条，其特征在于：所述生物素化垫（8）的制备方法为：配制金重悬液，金重悬液由0.1mol/LpH8.5的Tris-HCL缓冲液 、质量百分数为0.5%的BSA、质量百分数为10%的蔗糖、质量百分数为10%的海藻糖、质量百分数为0.2%的Proclin300配制而成，用金重悬液将生物素化的人绒毛膜促性腺激素抗体1进行稀释后，即得生物素化抗体工作溶液，涂布于结合垫上，得到生物素化垫（8）。
5.根据权利要求4所述的一种尿液唾液同检的人绒毛膜促性腺激素胶体金检测试纸条，其特征在于：所述生物素化的人绒毛膜促性腺激素抗体1的制备方法包括如下步骤：
6.根据权利要求5所述的一种尿液唾液同检的人绒毛膜促性腺激素胶体金检测试纸条，其特征在于：所述靶向多肽金垫（7）和生物素化垫（8）置于37±2℃烘箱中干燥12小时。
7.根据权利要求6所述的一种尿液唾液同检的人绒毛膜促性腺激素胶体金检测试纸条，其特征在于：所述硝酸纤维素膜（6）的制备方法为：将SA偶联抗原用稀释液稀释至1.2mg/mL，作为检测线液体；将羊抗鼠单克隆抗体用稀释液稀释至1.5mg/mL，作为质控线液体，分别用划膜仪喷于硝酸纤维素膜上作为检测线（3）和质控线（4），置于37℃烘箱中干燥4小时。
8.根据权利要求7所述的一种尿液唾液同检的人绒毛膜促性腺激素胶体金检测试纸条，其特征在于：所述样品垫（1）的制备方法为：首先，配制处理液，处理液由0.1mol/LpH9.0的Tris-HCL缓冲液、质量百分数为1.0%的PVP10、质量百分数为1.0%的S17、质量百分数为0.5%的酪蛋白、质量百分数为1.0%的EDTA、质量分数为0.05%阻断剂、质量分数为1.5%氯化钠配制而成；其次，将处理液涂布于玻璃纤维上，得到样品垫（1）。
9.根据权利要求8所述的一种尿液唾液同检的人绒毛膜促性腺激素胶体金检测试纸条，其特征在于：所述尿液唾液同检的人绒毛膜促性腺激素胶体金检测试纸条的制备方法为：在底板上从左到右依次搭接样品垫（1）、生物素化垫（8）、靶向多肽金垫（7）、硝酸纤维素膜（6）、吸水纸（5），即得尿液唾液同检的人绒毛膜促性腺激素胶体金检测试纸条。
10.一种尿液唾液同检的人绒毛膜促性腺激素胶体金检测试剂盒，其特征在于：包括检测笔和尿杯，检测笔包括壳体（10）、笔盖（13）和权利要求1-9其中之一所述的尿液唾液同检的人绒毛膜促性腺激素胶体金检测试纸条，尿液唾液同检的人绒毛膜促性腺激素胶体金检测试纸条设置在壳体（10）内，壳体（10）上表面设有观察窗（12），壳体（10）的一端设有吸水垫（11），吸水垫（11）的一端与样品垫（1）连接，使待测样品能层析到样品垫（1）上，吸水垫（11）设置在笔盖（13）内，笔盖（13）与壳体（10）卡扣连接。
...【技术特征摘要】
1.一种尿液唾液同检的人绒毛膜促性腺激素胶体金检测试纸条，其特征在于：包括底板（9），底板（9）上从左到右依次搭接有样品垫（1）、生物素化垫（8）、靶向多肽金垫（7）、硝酸纤维素膜（6）和吸水纸（5），靶向多肽金垫（7）上固相有靶向多肽金颗粒标记的人绒毛膜促性腺激素抗体2，浓度为15μg/ml；生物素化垫（8）上固相有生物素化的人绒毛膜促性腺激素抗体1，浓度为15μg/ml。
2.根据权利要求1所述的一种尿液唾液同检的人绒毛膜促性腺激素胶体金检测试纸条，其特征在于：所述靶向多肽金垫（7）的制备方法为：配制金重悬液，金重悬液由0.1mol/lph8.5的tris-hcl缓冲液 、质量百分数为0.5%的bsa、质量百分数为10%的蔗糖、质量百分数为10%的海藻糖、质量百分数为0.2%的proclin300配制而成，用金重悬液将靶向多肽金颗粒标记的人绒毛膜促性腺激素抗体2进行稀释后，即得靶向多肽金标记抗体工作溶液，喷涂于结合垫上，得到靶向多肽金垫（7）。
3.根据权利要求2所述的一种尿液唾液同检的人绒毛膜促性腺激素胶体金检测试纸条，其特征在于：所述靶向多肽金颗粒标记的人绒毛膜促性腺激素抗体2的制备方法包括如下步骤：
4.根据权利要求3所述的一种尿液唾液同检的人绒毛膜促性腺激素胶体金检测试纸条，其特征在于：所述生物素化垫（8）的制备方法为：配制金重悬液，金重悬液由0.1mol/lph8.5的tris-hcl缓冲液 、质量百分数为0.5%的bsa、质量百分数为10%的蔗糖、质量百分数为10%的海藻糖、质量百分数为0.2%的proclin300配制而成，用金重悬液将生物素化的人绒毛膜促性腺激素抗体1进行稀释后，即得生物素化抗体工作溶液，涂布于结合垫上，得到生物素化垫（8）。
5.根据权利要求4所述的一种尿液唾液同检的人绒毛膜促性腺激素胶体金检测试纸条，其特征在于：所述生物素化的人绒毛膜促性腺激素抗体1的制备方法包括如下步骤：
6.根据权利要求5所述的一种尿液唾液同检的人绒毛膜促性腺激...
【专利技术属性】
技术研发人员：高小燕，孟凡杰，杨帆，杨明霞，杨致亭，
申请(专利权)人：山东康华生物医疗科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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