【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于金属有机骨架材料，具体涉及一种低维eu-bdc-no2/dpa纳米材料、合成及其在测定碱性磷酸酶活性中的应用。
技术介绍
1、金属有机骨架材料(metal organic frameworks)，简称mofs，是由有机配体和金属离子或团簇通过配位键自组装形成的具有分子内孔隙的有机-无机杂化材料。mofs的合成方法包括蒸发溶剂法、扩散法(又可细分为气相扩散、液相扩散、凝胶扩散等)、水热或溶剂热法、超声和微波法等。与三维mof相比，二维(2d)mof由于其片状形貌，大量活性中心暴露于mof中，这有利于基底分子与其活性中心之间的接触。这使得它们广泛应用于催化、电化学和光学传感领域。目前，二维mof的合成分为自下而上的合成法和自上而下的剥离法，这两种方法对反应条件和操作要求都比较高。因此，开发一种操作简单，耗时短的低维mof合成方法是急需解决的问题。
2、碱性磷酸酶(alp)作为一种重要的水解酶，广泛存在于哺乳动物的组织和体液中，可以催化多种磷酸化底物的去磷酸化。在人体中，碱性磷酸酶主要存在于肝脏、骨骼、肠和肾脏中。健康成人血清碱性磷酸酶活性的正常范围是40-190u/l。此外，碱性磷酸酶活性还与性别、年龄和疾病类型有关，孕妇和儿童血清碱性磷酸酶活性可高达500u/l。常用的检测碱性磷酸酶活性的方法有：荧光检测，电化学检测，电化学发光，表面增强拉曼光谱等方法。其中，荧光检测由于其灵敏度高，检测限低等优点而备受关注。
3、目前，国内外还未发现采用eu(no3)3·6h2o、2-硝基对苯二甲酸、2，6-
技术实现思路
1、本专利技术提供一种低维eu-bdc-no2/dpa纳米材料、合成及其在测定碱性磷酸酶活性中的应用，通过改变配体和溶剂分别得到了二维片状和一维纳米纤维状的纳米材料，这种低维的mof比表面积大，在实际应用中可以提供更多的活性位点，测定碱性磷酸酶活性具有快速检测、高选择性和高灵敏度的特点。
2、本专利技术的技术方案为：
3、第一方面，公开了低维eu-bdc-no2/dpa纳米材料的合成方法，具体如下：
4、将eu(no3)3·6h2o溶解在水中，2-硝基对苯二甲酸和2，6-吡啶二羧酸溶解在乙醇中，并且在乙醇中加入三乙胺，超声得到澄清溶液；然后将两种溶液混合，加热反应；冷却至室温，离心收集白色固体，洗涤；干燥，即为eu-bdc-no2/dpa材料。
5、优选的，eu(no3)3·6h2o的物质的量与2-硝基对苯二甲酸和2，6-吡啶二羧酸配体的物质的量之和的比值为1:1.5-2，2-硝基对苯二甲酸和2，6-吡啶二羧酸的物质的量比为1:1-3。
6、优选的，eu(no3)3·6h2o和水的质量体积比为20-30mg:1ml，2-硝基对苯二甲酸和2，6-吡啶二羧酸的总质量、乙醇和三乙胺的总体积的质量体积比为5-6mg:1ml，乙醇和三乙胺的体积比为100-150ml:1ml。
7、优选的，反应温度为30-50℃，反应时间为2-4h，干燥温度为40-60℃，洗涤采用乙醇和水。
8、第二方面，公开了所述的低维eu-bdc-no2/dpa纳米材料在测定碱性磷酸酶活性中的应用，具体包括：
9、1)绘制工作曲线：将低维eu-bdc-no2/dpa纳米材料分散于水中，得到eu-bdc-no2/dpa水溶液；移取eu-bdc-no2/dpa水溶液加入到含有还原型辅酶ⅰnadh的离心管中，并加入不同活性的alp溶液，最后加入的hepes溶液定容，振荡使其充分混合均匀，在30-40℃下孵育30-60min后，用荧光光谱仪在270nm的激发下测试其荧光发射光谱，根据620nm和474nm处荧光强度比值与碱性磷酸酶活性之间的关系，绘制工作曲线；
10、2)将待测样品代替alp溶液，通过标准加入法加入，振荡使其充分混合均匀，在30-40℃下孵育30-60min后，用荧光光谱仪在270nm的激发下测试其荧光发射光谱，将620nm和474nm处荧光强度比值代入工作曲线，即得待测样品中的碱性磷酸酶含量。
11、优选的，eu-bdc-no2/dpa材料检测碱性磷酸酶的分段线性范围为0.05-10u/l和0.2-0.9u/ml，相关系数r2分别为0.9981和0.9943。
12、优选的，所述的eu-bdc-no2/dpa材料检测碱性磷酸酶分段线性范围0.05-10u/l和0.2-0.9u/ml的检测下限分别为0.017u/l和0.067u/ml。
13、本专利技术所述的eu-bdc-no2/dpa材料检测碱性磷酸酶的原理为：nadh与eu-bdc-no2/dpa的内滤效应，导致在270nm激发下，620nm处荧光降低，而nadh的存在，使得474nm处出现新的峰；在碱性环境下，碱性磷酸酶可以与nadh反应，nadh被破坏，内滤效应解除，620nm处荧光峰增强，474nm处荧光峰减弱，形成了比率型荧光传感平台。
14、本专利技术与现有技术相比，具有以下有益效果：
15、1.本专利技术eu-bdc-no2/dpa材料制备过程简单，并且不使用高毒性试剂；
16、2.mof的高度均匀的纳米级空腔和大的比表面积在目标物的特异性识别中起重要作用，而且还促进目标物在孔中的富集，二维mof具有更大的比表面积，并且在试剂反应中可以提供更多的活性位点，将合成的eu-bdc-no2/dpa材料分散在水溶液中，极性大的溶剂会对mof产生剥离作用，将二维的片状mof剥离得到了一维的纳米纤维；
17、3.eu-bdc-no2/dpa材料剥离产生的一维的纳米纤维用于碱性磷酸酶的检测，选择性高，其他离子无干扰，准确度更高，在0.05-10u/l范围内，展现的检测碱性磷酸酶具有良好的线性范围，线性结果y＝0.962x+12.931，相关系数r2＝0.9981，最低检测下限为0.017u/l；碱性磷酸酶活性在0.2-0.9u/ml范围内，展现的检测碱性磷酸酶活性与荧光强度比之间具有良好的线性范围。线性结果y＝4.178x-0.024，相关系数r2＝0.9943，最低检测下限为0.067u/ml。
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1.低维Eu-BDC-NO2/DPA纳米材料的合成方法，其特征在于，具体如下：
2.如权利要求1所述的低维Eu-BDC-NO2/DPA纳米材料的合成方法，其特征在于，Eu(NO3)3·6H2O的物质的量与2-硝基对苯二甲酸和2，6-吡啶二羧酸配体的物质的量之和的比值为1:1.5-2，2-硝基对苯二甲酸和2，6-吡啶二羧酸的物质的量比为1:1-3。
3.如权利要求1所述的低维Eu-BDC-NO2/DPA纳米材料的合成方法，其特征在于，Eu(NO3)3·6H2O和水的质量体积比为20-30mg:1mL，2-硝基对苯二甲酸和2，6-吡啶二羧酸的总质量、乙醇和三乙胺的总体积的质量体积比为5-6mg:1mL，乙醇和三乙胺的体积比为100-150mL:1mL。
4.如权利要求1所述的低维Eu-BDC-NO2/DPA纳米材料的合成方法，其特征在于，反应温度为30-50℃，反应时间为2-4h，干燥温度为40-60℃，洗涤采用乙醇和水。
5.如权利要求1-4任一项所述的低维Eu-BDC-NO2/DPA纳米材料的合成方法合成的低维Eu-BDC-NO2/
6.如权利要求5所述的低维Eu-BDC-NO2/DPA纳米材料在测定碱性磷酸酶活性中的应用，其特征在于，具体包括：
7.如权利要求6所述的所述的低维Eu-BDC-NO2/DPA纳米材料在测定碱性磷酸酶活性中的应用，其特征在于，Eu-BDC-NO2/DPA材料检测碱性磷酸酶的分段线性范围为0.05-10U/L和0.2-0.9U/mL，相关系数R2分别为0.9981和0.9943。
8.如权利要求6所述的所述的低维Eu-BDC-NO2/DPA纳米材料在测定碱性磷酸酶活性中的应用，其特征在于，所述的Eu-BDC-NO2/DPA材料检测碱性磷酸酶分段线性范围0.05-10U/L和0.2-0.9U/mL的检测下限分别为0.017U/L和0.067U/mL。
...【技术特征摘要】
1.低维eu-bdc-no2/dpa纳米材料的合成方法，其特征在于，具体如下：
2.如权利要求1所述的低维eu-bdc-no2/dpa纳米材料的合成方法，其特征在于，eu(no3)3·6h2o的物质的量与2-硝基对苯二甲酸和2，6-吡啶二羧酸配体的物质的量之和的比值为1:1.5-2，2-硝基对苯二甲酸和2，6-吡啶二羧酸的物质的量比为1:1-3。
3.如权利要求1所述的低维eu-bdc-no2/dpa纳米材料的合成方法，其特征在于，eu(no3)3·6h2o和水的质量体积比为20-30mg:1ml，2-硝基对苯二甲酸和2，6-吡啶二羧酸的总质量、乙醇和三乙胺的总体积的质量体积比为5-6mg:1ml，乙醇和三乙胺的体积比为100-150ml:1ml。
4.如权利要求1所述的低维eu-bdc-no2/dpa纳米材料的合成方法，其特征在于，反应温度为30-50℃，反应时间为2-4h，干燥温度为40-60℃，洗涤...
【专利技术属性】
技术研发人员：夏莲，高一帆，孙晓玲，张玲东，
申请(专利权)人：曲阜师范大学，
类型：发明
国别省市：
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