【技术实现步骤摘要】
本申请属于生物，具体涉及一种抗新型冠状病毒n蛋白的重组单克隆抗体及其制备与应用。
技术介绍
1、新型冠状病毒n蛋白是唯一存在于核衣壳中的蛋白，也是新型冠状病毒中含量最高的蛋白。n蛋白是一种具有高度免疫原性的磷蛋白，基因序列非常保守。新型冠状病毒的n蛋白通常被用作诊断检测的标志物。在病毒体组装过程中，n蛋白与病毒rna结合并形成螺旋核衣壳。高含量的n蛋白以及n蛋白的高亲水性被认为有利于新型冠状病毒感染细胞后产生有效免疫力。
2、目前市场上的新型冠状病毒n蛋白抗体以鼠单克隆抗体居多，主要通过纯化杂交瘤培养上清或者小鼠腹水获得。
3、随着新型冠状病毒感染的流行化和常态化，对于新型冠状病毒的检测需求也将常态化。因此开发一种高灵敏度、强特异性的抗新型冠状病毒n蛋白的抗体，对检测新型冠状病毒感染具有非常重要的作用。
技术实现思路
1、1.专利技术目的
2、本申请目的是提供一种兔抗新型冠状病毒n蛋白的重组单克隆抗体及其制备与应用，该重组单克隆抗体能够特异性识别新型冠状病毒n蛋白。经过elisa检测发现，该重组单克隆抗体可以特异性识别新型冠状病毒的n蛋白，可应用于elisa和免疫层析检测。
3、2.技术方案
4、为了达到上述目的，本申请所采用的技术方案如下：
5、本申请提供了一种抗新型冠状病毒n蛋白的重组单克隆抗体，该重组单克隆抗体能特异性的与新型冠状病毒n蛋白结合，包括重链可变区和轻链可变区，重链可变区包括seq id no
6、进一步地，上述一种抗新型冠状病毒n蛋白的重组单克隆抗体，重链可变区包括seq id no.9所示的氨基酸序列，轻链可变区包括seq id no.13所示的氨基酸序列。
7、进一步地，上述一种抗新型冠状病毒n蛋白的重组单克隆抗体，重链可变区包括seq idno.10所示的氨基酸序列，轻链可变区包括seq id no.14所示的氨基酸序列。
8、进一步地，上述一种抗新型冠状病毒n蛋白的重组单克隆抗体，重链可变区包括seq id no.11所示的氨基酸序列，轻链可变区包括seq id no.15所示的氨基酸序列。
9、进一步地，上述一种抗新型冠状病毒n蛋白的重组单克隆抗体，重链可变区包括seq id no.12所示的氨基酸序列，轻链可变区包括seq id no.16所示的氨基酸序列。
10、本申请还提供了一种核酸，该核酸编码上述抗新型冠状病毒n蛋白的重组单克隆抗体。
11、进一步地，上述编码抗新型冠状病毒n蛋白的重组单克隆抗体的核酸，包括：
12、如seq id no.1所示的核苷酸序列，用于编码上述抗新型冠状病毒n蛋白的重组兔单克隆抗体的包括seq id no.9所示的氨基酸序列的重链可变区；
13、如seq id no.2所示的核苷酸序列，用于编码上述抗新型冠状病毒n蛋白的重组兔单克隆抗体的包括seq id no.10所示的氨基酸序列的重链可变区；
14、如seq id no.3所示的核苷酸序列，用于编码上述抗新型冠状病毒n蛋白的重组兔单克隆抗体的包括seq id no.11所示的氨基酸序列的重链可变区；
15、如seq id no.4所示的核苷酸序列，用于编码上述抗新型冠状病毒n蛋白的重组兔单克隆抗体的包括seq id no.12所示的氨基酸序列的轻链可变区。
16、如seq id no.5所示的核苷酸序列，用于编码上述抗新型冠状病毒n蛋白的重组兔单克隆抗体的包括seq id no.13所示的氨基酸序列的轻链可变区。
17、如seq id no.6所示的核苷酸序列，用于编码上述抗新型冠状病毒n蛋白的重组兔单克隆抗体的包括seq id no.14所示的氨基酸序列的轻链可变区。
18、如seq id no.7所示的核苷酸序列，用于编码上述抗新型冠状病毒n蛋白的重组兔单克隆抗体的包括seq id no.15所示的氨基酸序列的轻链可变区。
19、如seq id no.8所示的核苷酸序列，用于编码上述抗新型冠状病毒n蛋白的重组兔单克隆抗体的包括seq id no.16所示的氨基酸序列的轻链可变区。
20、本申请还提供了一种重组表达载体，该重组表达载体含有上述编码抗新型冠状病毒n蛋白的重组单克隆抗体的核酸，可以表达抗新型冠状病毒n蛋白的重组单克隆抗体。
21、进一步地，上述重组表达载体包括：含有上述编码抗新型冠状病毒n蛋白的重组单克隆抗体的核酸的pcdna3.4++质粒。
22、本申请还提供了一种重组表达细胞，该重组表达细胞包括上述重组表达载体或上述编码抗新型冠状病毒n蛋白的重组单克隆抗体的核酸，可以表达抗新型冠状病毒n蛋白的重组单克隆抗体。
23、进一步地，上述重组表达细胞包括：293细胞系。
24、本申请还提供了上述核酸、重组表达载体、重组表达细胞在制备抗新型冠状病毒n蛋白的重组单克隆抗体中的应用。
25、本申请还提供了一种上述抗新型冠状病毒n蛋白的重组单克隆抗体的制备方法，包括：采用上述重组表达载体转染细胞获得重组表达细胞；培养转染后的重组表达细胞；收集上清液并纯化，得到抗新型冠状病毒n蛋白的重组单克隆抗体。
26、本申请还提供了一种标记抗体，包括上述抗新型冠状病毒n蛋白的重组单克隆抗体，并偶联了酶、荧光素、磁珠等偶联剂。
27、本申请还提供了上述抗新型冠状病毒n蛋白的重组单克隆抗体、核酸、重组表达载体、重组表达细胞或抗新型冠状病毒n蛋白的重组单克隆抗体的制备方法在检测新型冠状病毒n蛋白分子，或制备检测新型冠状病毒n蛋白分子设备中的应用。
28、进一步地，上述检测新型冠状病毒n蛋白分子包括elisa、免疫层析等检测方法中任意一种或多种。
29、进一步地，上述检测新型冠状病毒n蛋白分子设备包括试剂盒、抗体偶联、抗体芯片等中的任意一种或多种。
30、本申请还提供了一种检测新型冠状病毒n蛋白分子的试剂盒，该试剂盒包括上述抗新型冠状病毒n蛋白的重组单克隆抗体，以抗新型冠状病毒n蛋白的重组单克隆抗体为一抗。
31、进一步地，上述试剂盒为免疫层析剂盒，包括上述包被了上述抗新型冠状病毒n蛋白的重组单克隆抗体的试纸条，还包括生物样本裂解溶液。
32、本申请还提供了上述一种检测新型冠状病毒n蛋白分子的试剂盒在检测新型冠状病毒n蛋白分子中的应用。
33、3.有益效果
34、本申请与现有技术相比，其有益效果在于：
35、(1)本申请提供的是一种抗新型冠状病毒n蛋白的重组单克隆抗体及其制备与应用，与新型冠状病毒n蛋白分子的结合具有高特异性和高灵敏度，能够特异性地识别和检测新型冠状病毒n蛋白的表达，在检测本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种抗新型冠状病毒N蛋白的重组单克隆抗体，其特征在于，所述重组单克隆抗体包括重链可变区和轻链可变区，重链可变区包括SEQ ID NO.9-12所示的氨基酸序列中的一种，轻链可变区包括SEQ ID NO.13-16所示的氨基酸序列中的一种。
2.根据权利要求1所述的一种抗新型冠状病毒N蛋白的重组单克隆抗体，其特征在于，所述重链可变区包括SEQ ID NO.9所示的氨基酸序列，轻链可变区包括SEQ ID NO.13所示的氨基酸序列；
3.一种核酸，其特征在于，所述核酸编码权利要求1或2所述的抗新型冠状病毒N蛋白的重组单克隆抗体的重链可变区和/或轻链可变区。
4.根据权利要求3所述的一种核酸，其特征在于，所述核酸包括SEQ ID NO.1-8所示的核苷酸序列中的一种或多种。
5.一种重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体含有权利要求3或4所述的核酸。
6.一种重组表达细胞，其特征在于，所述重组表达细胞包括权利要求5所述的重组表达载体，或权利要求3或4所述的核酸。
7.权利要求3或4所述的核酸、或权利要求5所
8.权利要求1或2所述的抗新型冠状病毒N蛋白的重组单克隆抗体的制备方法，其特征在于，所述方法包括：采用权利要求5所述的重组表达载体转染细胞获得重组表达细胞；培养转染后的重组表达细胞；收集上清液并纯化，得到抗新型冠状病毒N蛋白的重组单克隆抗体。
9.权利要求1或2所述的抗新型冠状病毒N蛋白的重组单克隆抗体、或权利要求3或4所述的核酸、或权利要求5所述的重组表达载体、或权利要求6所述的重组表达细胞、或权利要求7所述的抗新型冠状病毒N蛋白的重组单克隆抗体的制备方法在检测新型冠状病毒N蛋白分子，或制备检测新型冠状病毒N蛋白分子设备中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述检测新型冠状病毒N蛋白分子包括ELISA、免疫层析中任意一种或多种。
11.一种检测新型冠状病毒N蛋白分子的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1或2所述的抗新型冠状病毒N蛋白的重组单克隆抗体。
12.根据权利要求11所述的一种检测新型冠状病毒N蛋白分子的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒为免疫层析试剂盒。
...【技术特征摘要】
1.一种抗新型冠状病毒n蛋白的重组单克隆抗体，其特征在于，所述重组单克隆抗体包括重链可变区和轻链可变区，重链可变区包括seq id no.9-12所示的氨基酸序列中的一种，轻链可变区包括seq id no.13-16所示的氨基酸序列中的一种。
2.根据权利要求1所述的一种抗新型冠状病毒n蛋白的重组单克隆抗体，其特征在于，所述重链可变区包括seq id no.9所示的氨基酸序列，轻链可变区包括seq id no.13所示的氨基酸序列；
3.一种核酸，其特征在于，所述核酸编码权利要求1或2所述的抗新型冠状病毒n蛋白的重组单克隆抗体的重链可变区和/或轻链可变区。
4.根据权利要求3所述的一种核酸，其特征在于，所述核酸包括seq id no.1-8所示的核苷酸序列中的一种或多种。
5.一种重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体含有权利要求3或4所述的核酸。
6.一种重组表达细胞，其特征在于，所述重组表达细胞包括权利要求5所述的重组表达载体，或权利要求3或4所述的核酸。
7.权利要求3或4所述的核酸、或权利要求5所述的重组表达载体、或权利要求6所述...
【专利技术属性】
技术研发人员：马妍，骆燕，皇甫虹姣，何苗峰，潘红阳，
申请(专利权)人：杭州斯达特生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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