【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及牛结节性皮肤病病毒基因缺失毒株及其构建方法。
技术介绍
1、牛结节性皮肤病(lumpy skin disease，lsd)也叫做牛结节性皮炎、牛疙瘩皮肤病、牛结节疹等。是由牛结节性皮肤病病毒(lumpy skin disease virus，lsdv)感染牛后所致的急性、亚急性或慢性传染病。主要临床特征为发热、消瘦、淋巴结肿大、皮肤水肿、局部形成坚硬的结节或溃疡。lsdv能感染各品种的牛，感染后导致病牛死亡、产能下降、经济价值下降，给经济造成严重损失。感染lsdv的牛是主要传染源，感染动物和节肢动物媒介的移动被认为是lsdv传播的主要风险因素。该病被woah列为必须报告疫病，被我国农业农村部列为二类动物疫病。该病目前尚无有效商品化疫苗，尽管山羊痘或绵羊痘弱毒疫苗对lsd的防控有一定作用，但其免疫效果没有用lsdv本身的疫苗免疫效果好。由于lsdv编码众多蛋白，且大多数蛋白功能未知，严重阻碍了对其致病机制的研究。因此，对lsdv的感染与致病机制进行深入研究，在lsdv防控方面具有积极意义。
技术实...
【技术保护点】
1.牛结节性皮肤病病毒基因缺失毒株的构建方法，其特征在于：包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于：步骤S1中，所述左右同源臂ORF005、ORF008的上下游引物为：
3.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于：步骤S2中，将载体pUC57-EGFP与左同源臂分别用EcoR I及Kpn I限制性内切酶进行双酶切、连接和转化，从而构建得到pUC57-L-EGFP；再将pUC57-L-EGFP与右同源臂用Xba I及Hind III限制性内切酶进行双酶切、连接和转化，得到转移载体pUC57-LSDVΔORF005-008-E
...【技术特征摘要】
1.牛结节性皮肤病病毒基因缺失毒株的构建方法，其特征在于：包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于：步骤s1中，所述左右同源臂orf005、orf008的上下游引物为：
3.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于：步骤s2中，将载体puc57-egfp与左同源臂分别用ecor i及kpn i限制性内切酶进行双酶切、连接和转化，从而构建得到puc57-l-egfp；再将puc57-l-egfp与右同源臂用xba i及hind iii限制性内切酶进行双酶切、连接和转化，得到转移载体puc57-lsdvδorf005-008-egfp质粒。
4.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于：步骤s3中，用牛结节性皮肤病病毒lsdv感染bhk-21细胞，之后将步骤s2的puc57-lsdvδorf005-008-egfp质粒转染至bhk-21细胞，得到牛结节性皮肤病病毒基因缺失毒株rlsdvδorf005-008。
5.牛结节性皮肤病病毒基因缺失毒株，是应用权利要求1-4...
【专利技术属性】
技术研发人员：殷相平，马小琴，孙跃峰，任善会，王相伟，王莎莎，陈豪泰，
申请(专利权)人：中国农业科学院兰州兽医研究所，
类型：发明
国别省市：
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