【技术实现步骤摘要】
本申请涉及狂犬病疫苗，具体涉及一种无血清培养人二倍体细胞制备狂犬病毒抗原的方法和应用。
技术介绍
1、二倍体细胞是指由受精卵发育而来，且体细胞中含有两个染色体组的细胞。人二倍体细胞来源于人体组织，是已经公知的可用于制备病毒疫苗的宿主细胞，其用于制备疫苗时细胞内的残余成分通常不会成为超敏反应原，因此其对应制得的疫苗的安全性相对较高。
2、目前，在二倍体细胞制备狂犬病疫苗生产中，尚未一款成熟且产毒量高的病毒培养基，而在研究中发现通常使用含10％左右血清的基础mem培养基培养狂犬病毒时病毒滴度高，但是当把病毒培养基去掉血清时，病毒产量会大幅下降，而疫苗生产中血清成分复杂且不完全明确，存在着外源病毒等致病因子污染风险，疫苗因异种血清残留所致过敏反应的安全风险也始终存在。
技术实现思路
1、本申请提供一种无血清培养人二倍体细胞制备狂犬病毒抗原的方法和应用，其在无血清培养的基础上依旧具有较高的病毒抗原产量，能有效降低致病因子的污染风险，降低疫苗因异种血清残留所致过敏反应的安全风险。
...【技术保护点】
1.一种无血清培养人二倍体细胞制备狂犬病毒抗原的方法，其特征在于，包括以下步骤：细胞培养：取人二倍体细胞液复苏后用无血清细胞培养液进行扩增，细胞扩增后的单层细胞用所述无血清细胞培养液制成细胞密度为5.0×105个/mL-7.0×105个/mL的细胞悬液，再将获得的细胞悬液接种于培养容器中继续用无血清细胞培养液培养，控制在25±1℃的温度下细胞吸附3-4h；控制搅拌速度70-80rpm、温度37±1℃、pH值7.1-7.3、DO值40-60％的参数条件下培养45-50h；
2.根据权利要求1所述的制备狂犬病毒抗原的方法，其特征在于：所述无血清病毒维持液中，所...
【技术特征摘要】
1.一种无血清培养人二倍体细胞制备狂犬病毒抗原的方法，其特征在于，包括以下步骤：细胞培养：取人二倍体细胞液复苏后用无血清细胞培养液进行扩增，细胞扩增后的单层细胞用所述无血清细胞培养液制成细胞密度为5.0×105个/ml-7.0×105个/ml的细胞悬液，再将获得的细胞悬液接种于培养容器中继续用无血清细胞培养液培养，控制在25±1℃的温度下细胞吸附3-4h；控制搅拌速度70-80rpm、温度37±1℃、ph值7.1-7.3、do值40-60％的参数条件下培养45-50h；
2.根据权利要求1所述的制备狂犬病毒抗原的方法，其特征在于：所述无血清病毒维持液中，所述基础mem培养基和所述199培养基的重量比为3:7-4:6。
3.根据权利要求1所述的制备狂犬病毒抗原的方法，其特征在于：所述无血清病毒维持液中，所述l-谷氨酰胺与所述海藻糖的重量比为1:4.5-5。
4.根...
【专利技术属性】
技术研发人员：吴季南，李举，储明磊，李加乐，乐丹，刘畅，周卫，吴数成，
申请(专利权)人：宁波荣安生物药业有限公司，
类型：发明
国别省市：
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