【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药领域，具体涉及一种核酸适配体偶联药物。本专利技术还涉及该核酸适配体偶联药物的制备方法和用途。
技术介绍
1、核酸适配体，也被称为核酸适体、适配子等，是从人工合成的dna/rna文库中筛选得到的能够高亲和性和高特异性地与各种靶标结合的单链寡核苷酸。最早是由szostak和gold两个小组几乎同时提出。1990年，ellington和szostak报道了能结合小分子有机染料的rna片段，并将其命名为aptamer。适配体(aptamer)是指利用指数富集的配基系统进化(systematic evolution of ligands by exponential enrichment,selex)技术，从人工合成的寡核苷酸文库中筛选得到的具有亲和性高、特异性强的能够与靶分子特异性结合的短的单链dna和rna。
2、适配体和基于抗体技术的蛋白亲和配体相比，其与靶分子之间的识别功能和抗体相似，主要分子间作用力为氢键、范德华力等非共价键。和抗体技术相比，适配体具有自身独特的优势。例如，(1)适配体对靶分子具有高度的亲和力，与单克隆抗体相当甚至更高，其kd值通常在nmol到pmol之间；(2)适配体可以通过化学合成的方法获得，制备手段较为便捷，同时可以引入多样的化学修饰，以提高其亲和力和稳定性；(3)适配体由核酸组成，具有很好的稳定性，易于贮存；(4)适配体不仅可用于单一靶点，也适用于那些尚未彻底研究的复合靶点；(5)适配体体积较小，某些因空间位阻而被隐藏的蛋白表面可与适配体发生相互作用；(6)适配体的免疫原
3、cd44分子是一类跨膜蛋白多糖黏附分子，被证明广泛分布于心脏、肝脏、肾脏、脾脏、肺等组织器官中，表达细胞包括内皮细胞、间充质细胞、造血干细胞，以及单核、巨噬、嗜中性粒、嗜酸性粒细胞和淋巴细胞等，主要参与异质性粘附，即肿瘤细胞与宿主细胞和宿主基质的粘附，其在肿瘤细胞侵袭转移中起促进作用。cd44与肿瘤浸润转移关系的研究已有大量报道。已在人类各种恶性肿瘤的研究中发现cd44s亚型普遍存在。
4、动脉粥样硬化(atherosclerosis，as)是冠心病、脑梗死、外周血管病的主要原因。脂质代谢障碍为动脉粥样硬化的病变基础，其特点是受累动脉病变从内膜开始，一般先有脂质和复合糖类积聚、出血及血栓形成，进而纤维组织增生及钙质沉着，并有动脉中层的逐渐蜕变和钙化，导致动脉壁增厚变硬、血管腔狭窄。病变常累及大中肌性动脉，一旦发展到足以阻塞动脉腔，则该动脉所供应的组织或器官将缺血或坏死。由于在动脉内膜积聚的脂质外观呈黄色粥样，因此称为动脉粥样硬化。
5、急性冠状动脉综合征(acute coronary syndrome，acs)是以冠状动脉粥样硬化斑块破裂或侵袭，继发完全或不完全闭塞性血栓形成为病理基础的一组临床综合征。急性冠状动脉综合征是一种常见的严重的心血管疾病，是冠心病的一种严重类型。它包括急性st段抬高性心肌梗死、急性非st段抬高性心肌梗死和不稳定型心绞痛(ua)。其中，以急性st段抬高性心肌梗死为主的心血管疾病已成为危害人类健康的头号杀手。据统计，全世界每年约有2千万人死于急性心肌梗死。此外，急性冠状动脉综合征的突发性和难以预期也是临床诊断和治疗的一大难题。有研究表明，大部分的急性心肌梗死是由易损斑块引起的。现代医学认为，炎性反应贯穿于易损斑块形成、破裂以及血栓出现急性冠状动脉综合征的全过程。
6、目前，治疗动脉粥样硬化的方法主要是全身给药，例如口服他汀类药物(例如羟甲基戊二酸单酰辅酶a(hmg-coa)还原酶抑制剂)、阿司匹林、基质金属蛋白酶(mmps)抑制剂和/或贝特类药物等。这些药物通过调节全身血脂、对抗炎症、抑制蛋白酶和血小板生成等来减少动脉粥样硬化中斑块内的脂质，改善血管重构，从而起到稳定斑块的作用。然而，临床应用中发现目前用于治疗动脉粥样硬化的药物的治疗效果并不理想。例如，临床常用的他汀类药物的口服给药生物利用度比较低，如辛伐他汀生物利用度＜5％，阿托伐他汀约12％，瑞舒伐他汀约为20％。动物实验也证实，当他汀类药物的剂量增加到1mg/kg以上时才可以起到增加纤维帽厚度和减少斑块体积的作用，且目前临床试验也已经证实，口服他汀类药物治疗动脉粥样硬化需要采用强化大剂量才能具有稳定动脉粥样硬化中斑块的作用，而全身大剂量使用他汀类药物治疗会存在严重副作用，例如导致肝功能异常、横纹肌溶解、ii型糖尿病发生率升高，这使得他汀类药物的口服给药的稳定性和逆转斑块的效果遭遇了瓶颈。
7、另一方面，诊断动脉粥样硬化中斑块的技术主要包括冠状动脉造影、血管内超声(ivus)、光学相干断层扫描(oct)等，但这些技术均属于有创性的检查，并且诊断分辨率和准确性不高，同时这些诊断技术费用昂贵，也在一定程度上限制了临床上的普及。
8、靶向给药系统可以使药物在目标病变部位形成相对较高的浓度，并减少血液循环中的药量，从而在提高药效的同时抑制毒副作用，减少对正常组织和细胞的伤害。在动脉粥样硬化的诊断和治疗领域中，现有技术为利用靶向配体修饰的纳米载体来诊断动脉粥样硬化。然而，此类斑块的靶向探针在临床实际应用中的主要问题在于所述靶向给药系统的靶向位点的特异性不足。例如，此类靶向给药系统的靶向位点大多选择巨噬细胞，但由于巨噬细胞存在于身体各处，导致靶向探针的靶向特异性不够理想。因此，寻找到能够特异性靶向易损斑块内的细胞的靶向给药系统在本领域仍存在迫切需求。
9、动脉粥样硬化包括“稳定斑块分子”和“易损斑块分子”。易损斑块分子是一类跨膜蛋白多糖黏附分子，被证明广泛分布于淋巴细胞、单核细胞、内皮细胞等细胞的表面。基于表达细胞的活化状态，可以将易损斑块分子分为相对静止状态、诱导活化状态和结构活跃状态。本专利技术专利技术人发现，与正常细胞相比，易损斑块中的细胞诸如内皮细胞、巨噬细胞和平滑肌细胞等的表面会被易损斑块的微环境(诸如在炎症因子的影响下)所诱导活化。这一发现提示，易损斑块处的细胞表面存在的大量活化的易损斑块分子为以识别易损斑块的靶向给药系统提供了理想的靶位。
10、现有技术中靶向活化易损斑块分子的纳米载体递送系统，表面部分地被靶向配体修饰，所述靶向配体是能与活化的易损斑块分子特异性结合的配体，所述纳米载体递送系统可用于易损斑块或与易损斑块相关的疾病的诊断、预防和治疗。但现有技术中的纳米载体递送系统在药物的靶向效率、药物的利用率和对细胞的毒副作用等方面还不是非常理想。因此，寻找到一种具有较高靶向效率、较高的药物利用率和较低细胞毒性的靶向给药系统在本领域中显得尤为急迫。
技术实现思路
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1.一种核酸适配体偶联药物，其中，所述核酸适配体偶联药物具有式(1)所示的结构：
2.根据权利要求1所述的核酸适配体偶联药物，其中，所述活性物质选自抗肿瘤药物、非甾体抗炎药物、抗自身免疫性疾病药物、抗退行性疾病药物。
3.根据权利要求1所述的核酸适配体偶联药物，其中，所述活性物质选自造影功能的有机分子或无机离子或无机化合物。
4.根据权利要求1所述的核酸适配体偶联药物，其中，n为3-80的整数，优选地，n为6-32的整数。
5.根据权利要求2所述的核酸适配体偶联药物，其中，所述抗肿瘤药物选自烷化剂类药物、抗肿瘤抗生素、抗肿瘤激素类药物、金属铂类药物、抗代谢药物、抗肿瘤植物药、酪氨酸激酶受体类、长春碱类、萜类、酪氨酸激酶受体类、NF-κB抑制剂、三氧化二砷或沙利度胺；优选地，所述烷化剂类药物选自卡莫司汀、盐酸氮芥、环磷酰胺或米尔法兰，所述抗肿瘤抗生素选自丝裂霉素、表柔比星、阿霉素、博来霉素或多柔比星，所述抗肿瘤激素类药物选自他莫昔芬、屈洛昔芬、来曲唑、氨鲁米特、亮丙瑞林或戈那瑞林，所述金属铂类药物选自顺铂、卡铂或奥沙利铂，所述抗代谢药
6.根据权利要求2所述的核酸适配体偶联药物，其中，所述非甾体抗炎药物选自乙酰水杨酸盐类、非乙酰基水杨酸盐类或非水杨酸盐类；优选地，所述乙酰水杨酸盐类选自阿司匹林，所述非乙酰基水杨酸盐类选自水杨酸镁、水杨酸钠、水杨酸胆碱镁、二氟尼柳(二氟苯水杨酸)或双水杨酸酯，所述非水杨酸盐类选自双氯芬酸、醋氯酚酸、吲哚美辛、布洛芬、氟比洛芬、萘普生、萘丁美酮、保泰松、双氯灭痛、芬洛芬、酮基布洛芬、酮咯酸、四氯芬那酸、舒林酸、托美丁、氯诺昔康、美洛昔康、吡罗昔康、塞来昔布、帕瑞昔布或依托考昔。
7.根据权利要求2所述的核酸适配体偶联药物，其中，所述抗自身免疫性疾病药物选自抗硬皮病类药物、抗类风湿性关节炎药物、抗非酒精性脂肪性肝病药物、抗银屑病药物、骨关节炎类药物、肾损伤类药物、造影剂及示踪剂；优选地，所述抗硬皮病类药物包括他克莫司、甲氨蝶呤、环磷酰胺、吗替麦考酚酯、利妥昔单抗、合贝利尤单抗、托珠单抗、Lenabasum、糖皮质激素，所述抗类风湿性关节炎药物选自免疫抑制剂、生物类或TNF-α抑制剂，所述抗非酒精性脂肪性肝病药物选自二甲双胍、利拉鲁肽、他汀类药物((阿托伐他汀、辛伐他汀、瑞舒伐他汀、普伐他汀)、多烯磷脂酰胆碱、法尼醇X受体激动剂(奥贝胆酸)、双重PPAR激动剂(Saroglitazar)、泛PPAR激动剂(Lanifibranor(IVA337))、泛胱冬酶抑制剂(Emricasan)、乙酰辅酶A羧化酶抑制剂(GS-0976(firsocostat))、成纤维细胞生长因子类似物(Pegbelfermin)、葡萄糖钠共转运体2(SGLT2)抑制剂(Canagliflozin(CANA))，所述抗银屑病药物选自JAK抑制剂(托法替布、巴瑞替尼、芦可替尼)、IL-23抑制剂(A-552、Spesolimab)、IL-1抑制剂(阿那白滞素、卡那单抗、Gevokizumab)，所述骨关节炎选自膦酸盐类药物(唑来膦酸、阿仑膦酸钠)，所述肾损伤药物选自NLRP3抑制剂，所述造影剂选自硫酸钡、碘化油、水溶性碘制剂、钆制剂或氧化铁。
8.根据权利要求1所述的核酸适配体偶联药物，其中，所述抗退行性疾病药物选自左旋多巴、卡比多巴、苄丝肼、司来吉兰、硝替卡朋、溴隐亭、普拉克唑或金刚烷胺。
9.根据权利要求1所述的核酸适配体偶联药物，其中，所述核酸适配体为通过SELEX技术体外筛选获得的对以下受体高表达的核酸序列：CD44，CD46，CD68，ICAM，stabilin-2，lectin-like ox-LDL receptor-1(LOX-1)；vascular cell adhesion protein 1(VCAM-1)，intercellular adhesion molecule 1(ICAM-1)；E-selectin，在泡沫细胞上表达的p32受体，integrinαvβ3。
10.根据权利要求1所述的核酸适配体偶联药物，其中，所述核酸适配体为通过SELEX技术筛选获得的和动脉粥样斑块高表达受体具有高亲合性的核酸适配体。
11.根据权利要求1所述的核酸适配体偶联药物，所述连接子是惰性连接臂或可被细胞内组织蛋白酶、活性氧自由基、酸性微环境或基质金属酶选择性裂解的连接子；
12.根据权利要求...
【技术特征摘要】
1.一种核酸适配体偶联药物，其中，所述核酸适配体偶联药物具有式(1)所示的结构：
2.根据权利要求1所述的核酸适配体偶联药物，其中，所述活性物质选自抗肿瘤药物、非甾体抗炎药物、抗自身免疫性疾病药物、抗退行性疾病药物。
3.根据权利要求1所述的核酸适配体偶联药物，其中，所述活性物质选自造影功能的有机分子或无机离子或无机化合物。
4.根据权利要求1所述的核酸适配体偶联药物，其中，n为3-80的整数，优选地，n为6-32的整数。
5.根据权利要求2所述的核酸适配体偶联药物，其中，所述抗肿瘤药物选自烷化剂类药物、抗肿瘤抗生素、抗肿瘤激素类药物、金属铂类药物、抗代谢药物、抗肿瘤植物药、酪氨酸激酶受体类、长春碱类、萜类、酪氨酸激酶受体类、nf-κb抑制剂、三氧化二砷或沙利度胺；优选地，所述烷化剂类药物选自卡莫司汀、盐酸氮芥、环磷酰胺或米尔法兰，所述抗肿瘤抗生素选自丝裂霉素、表柔比星、阿霉素、博来霉素或多柔比星，所述抗肿瘤激素类药物选自他莫昔芬、屈洛昔芬、来曲唑、氨鲁米特、亮丙瑞林或戈那瑞林，所述金属铂类药物选自顺铂、卡铂或奥沙利铂，所述抗代谢药物选自喜树碱类(伊立替康)，所述长春碱类选自长春碱、长春新碱，所述萜类选自紫杉醇或青蒿素，所述酪氨酸激酶受体类选自拉帕替尼，所述nf-κb抑制剂选自蛋白酶体抑制剂、硼替佐米(bortezomib)。
6.根据权利要求2所述的核酸适配体偶联药物，其中，所述非甾体抗炎药物选自乙酰水杨酸盐类、非乙酰基水杨酸盐类或非水杨酸盐类；优选地，所述乙酰水杨酸盐类选自阿司匹林，所述非乙酰基水杨酸盐类选自水杨酸镁、水杨酸钠、水杨酸胆碱镁、二氟尼柳(二氟苯水杨酸)或双水杨酸酯，所述非水杨酸盐类选自双氯芬酸、醋氯酚酸、吲哚美辛、布洛芬、氟比洛芬、萘普生、萘丁美酮、保泰松、双氯灭痛、芬洛芬、酮基布洛芬、酮咯酸、四氯芬那酸、舒林酸、托美丁、氯诺昔康、美洛昔康、吡罗昔康、塞来昔布、帕瑞昔布或依托考昔。
7.根据权利要求2所述的核酸适配体偶联药物，其中，所述抗自身免疫性疾病药物选自抗硬皮病类药物、抗类风湿性关节炎药物、抗非酒精性脂肪性肝病药物、抗银屑病药物、骨关节炎类药物、肾损伤类药物、造影剂及示踪剂；优选地，所述抗硬皮病类药物包括他克莫司、甲氨蝶呤、环磷酰胺、吗替麦考酚酯、利妥昔单抗、合贝利尤单抗、托珠单抗、lenabasum、糖皮质激素，所述抗类风湿性关节炎药物选自免疫抑制剂、生物类或tnf-α抑制剂，所述抗非酒精性脂肪性肝病药物选自二甲双胍、利拉鲁肽、他汀类药物((阿托伐他汀、辛伐他汀、瑞舒伐他汀、普伐他汀)、多烯磷脂酰胆碱、法尼醇x受体激动剂(奥贝胆酸)、双重ppar激动剂(saroglitazar)、泛ppar激动剂(lanifibranor(iva337))、泛胱冬酶抑制剂(emricasan)、乙酰辅酶a羧化酶抑制剂(gs-0976(firsocostat))、成纤维细胞生长因子类似物(pegbelfermin)、葡萄糖钠共转运体2(sglt2)抑制剂(canagliflozin(cana))，所述抗银屑病药物选自jak抑制剂(托法替布、巴瑞替尼、芦可替尼)、il-23抑制剂(a-552、spesolimab)、il-1抑制剂(阿那白滞素、卡那单抗、gevokizumab)，所述骨关节炎选自膦酸盐类药物(唑来膦酸、阿仑膦酸钠)，所述肾损伤药物选自nlrp3抑制剂，所述造影剂选自硫酸钡、碘化油、水溶性碘制剂、钆制剂或氧化铁。
8.根据权利要求1所述的核酸适配体偶联药物，其中，所述抗退行性疾病药物选自左旋多巴、卡比多巴、苄丝肼、司来吉兰、硝替卡朋、溴隐亭、普拉克唑或金刚烷胺。
9.根据权利要求1所述的核酸适配体偶联药物，其中，所述核酸适配体为通过selex技术体外筛选获得的对以下受体高表达的核酸序列：cd44，cd46，cd68，icam，stabilin-2，lectin-like ox-ldl receptor-1(lox-1)；vascular cell adhesion protein 1(vcam-1)，intercellular adhesion molecule 1(icam-1)；e-selectin，在泡沫细胞上表达的p32受体，integrinαvβ3。
10.根据权利要求1所述的核酸适配体偶联药物，其中，所述核酸适配体为通过selex技术筛选获得的和动脉粥样斑块高表达受体具有高亲合性的核酸适配体。
11.根据权利要求1所述的核酸适配体偶联药物，所述连接子是惰性连接臂或可被细胞内组织蛋白酶、活性氧自由基、酸性微环境或基质金属酶选择性裂解的连接子；
12.根据权利要求1所述的适配体偶联药物，其中，所述连接子选自以下惰性线性或树枝状高分子材料中的一种或多种：含有2-5个碳原子的短链烷烃、peg、pei、pamam、聚赖氨酸、pmmi、plga、pla、p...
【专利技术属性】
技术研发人员：马茜，孙洁芳，
申请(专利权)人：北京茵诺医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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