【技术实现步骤摘要】
本申请涉及核酸递送材料，特别是涉及一种用于核酸药物的复合材料及其制备方法和应用。
技术介绍
1、核酸药物作为一种新兴的基因疗法，在医学和生物研究领域引起广泛关注。rna药物具有广泛的治疗应用、可定制性和相对较短的开发周期等优势，在多种疾病领域，如遗传性疾病、癌症、感染性疾病和自身免疫性疾病中都具有广泛的应用潜力。然而，rna药物也面临一系列技术和应用上的挑战。其中包括递送问题，即如何有效地将rna药物输送到目标细胞内，这是实际应用的一个关键难题。目前商业上成功的递送技术主要基于可电离的阳离子脂质纳米粒（lnp）技术。然而lnp仍存在诸多问题，如递送效率偏低、肝脏富集、稳定性较差、副作用显著等，极大限制其应用范围。因此开发高效低毒的活体递送系统仍然是mrna技术发展的瓶颈问题。
2、本申请人研发了一种转染效率高、细胞毒性低的具有超支化结构的阳离子聚酯，即hbpa-e，其授权公告号为cn115926134b。hbpa-e的基因递送效率显著优于线性聚合物及现有最佳商用mrna转染试剂，且细胞毒性更低；并且，该材料可溶于乙醇因而具有潜在的临床应用潜力。
3、然而，在深入的研究发现，hbpa-e虽然具有较高的体外转染效率；但是，在进行活体递送时，其递送效率不够理想。因此，如何提高hbpa-e的活体递送效率，是亟待解决的重要课题。
技术实现思路
1、本申请的目的是提供一种新的用于核酸药物的复合材料及其制备方法和应用。
2、为了实现上述目的，本申请采用了以下技
3、本申请的第一方面公开了一种用于核酸药物的复合材料，包括阳离子聚酯和脂质组合物；脂质组合物包括中性脂质、可电离阳离子脂质、胆固醇（chol）和脂质聚乙二醇中的至少一种；阳离子聚酯为单体p、单体s和单体m三种单体，或者单体p和单体s两种单体，与单体t聚合形成的超支化聚合物，并且超支化聚合物的端基具有基团e修饰；其中，单体p为环内酯；单体s为端基含有两个或两个以上羧基的有机酸；单体m为含有两个羟基，以及一个仲胺或叔胺的化合物；单体t为含有三个或三个以上羟基的化合物；提供基团e修饰的端基修饰化合物e为至少含有一个伯胺、仲胺或叔胺基团的化合物。
4、需要说明的是，本申请采用的阳离子聚酯为cn115926134b中的阳离子聚酯，即hbpa-e；因此，cn115926134b中所有关于hbpa-e的
技术实现思路
援引至本申请。
5、还需要说明的是，本申请的复合材料，利用阳离子聚酯和脂质组合物有机结合，在作为核酸药物载体进行核酸递送时，相比于单纯采用阳离子聚酯的递送体系，采用本申请复合材料的递送体系的阳离子聚酯成分和核酸的质量比的范围明显增加，使得在较低的阳离子聚酯/核酸质量比下，仍然能够进行有效递送，同时由于脂质组合物的存在，使得核酸药物在体内的稳定性更高，从而显著提高核酸药物的体内递送效果。
6、本申请的一种实现方式中，中性脂质为二硬脂酰磷脂酰胆碱（dspc）、1,2-二油酰-sn-甘油-3-磷脂酰乙醇胺（dope）、1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱（dopc）中的至少一种。
7、本申请的一种实现方式中，可电离阳离子脂质为4-(n,n-二甲基氨基)丁酸(二亚油基)甲酯（d-lin-mc3-dma）、((4 羟基丁基)氮杂二烷基)双(己烷-6 ,1-二基)双(2-己基癸酸酯)（alc-0315）、8-[(2-羟乙基)[6-氧代-6-(十一烷基氧基)己基]氨基]辛酸1-辛基壬基酯（sm-102）中的至少一种。
8、本申请的一种实现方式中，脂质聚乙二醇为1,2-二肉豆蔻酰-rac-甘油-3-甲氧基聚乙二醇2000（dmg-peg2000）、甲氧基聚乙二醇双十四烷基乙酰胺（alc-0159）、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000（dspe-peg2000）中的至少一种。
9、需要说明的是，以上具体的中性脂质、可电离阳离子脂质和脂质聚乙二醇只是本申请的实现方式中具体采用并经过验证的脂质材料，在本申请的专利技术构思下，不排除还可以采用其他性能相似的中性脂质、可电离阳离子脂质或脂质聚乙二醇。
10、本申请的一种实现方式中，脂质组合物由重量份0%~100%的中性脂质、0~100%的可电离阳离子脂质、0%~40%的胆固醇和0%~50%的脂质聚乙二醇组成。其中，0%表示脂质组合物中可以不含该成分，可以理解，中性脂质、可电离阳离子脂质、胆固醇和脂质聚乙二醇四者不能同时为0%；100%表示脂质组合物可以完全由该成分组成，例如脂质组合物为100%的中性脂质，即脂质组合物中所有组分都是中性脂质。因此，本申请的脂质组合物可以100%为中性脂质，或者100%为可电离阳离子脂质；但是，在使用胆固醇时，需要配合中性脂质、可电离阳离子脂质和脂质聚乙二醇中的至少一种；同样的，在使用脂质聚乙二醇时，也需要配合中性脂质、可电离阳离子脂质和胆固醇中的至少一种；同时使用胆固醇和脂质聚乙二醇时，还需要配合中性脂质和可电离阳离子脂质中的至少一种。
11、需要说明的是，本申请的复合材料中，中性脂质是结构脂质，对脂质膜形成起重要作用；脂质聚乙二醇能提高核酸药物（lpp）的稳定性，延长体内循环时间。可电离阳离子脂质在促进核酸包封及内体逃逸过程中发挥重要作用，但可被本申请的阳离子聚酯替代；并且，采用本申请的阳离子聚酯还能够达到更优的递送效果，故可电离阳离子脂质可根据需求添加或不添加。胆固醇能提高脂质膜的稳定性、促进膜融合，可以根据需求添加；本申请的实现方式中，加胆固醇比没加胆固醇的递送效率高，例如本申请的实施例7、10、26和27；当然，未加胆固醇的组别递送效率仍高于对照组，例如实施例10和27高于对照例3。
12、还需要说明的是，本申请的脂质组合物可以由中性脂质、可电离阳离子脂质、胆固醇和脂质聚乙二醇组成，也可以由中性脂质、胆固醇和脂质聚乙二醇组成，或由中性脂质、可电离阳离子脂质和脂质聚乙二醇组成，或由中性脂质和脂质聚乙二醇组成。
13、本申请的一种实现方式中，阳离子聚酯和脂质组合物的重量比为1:10~20:1。
14、需要说明的是，本申请的复合材料中，脂质组合物的作用主要是与阳离子聚酯配合，提高核酸药物的活体递送效果；可以理解，脂质组合物的用量太小，其提高核酸药物活体递送的效果较差；但是，脂质组合物的用量太大，又会影响阳离子聚酯自身的功能和效果。因此，本申请优选的阳离子聚酯和脂质组合物的重量比为1:10~20:1。例如，阳离子聚酯和脂质组合物的重量比为1:10，即1份重量的阳离子聚酯和10份重量的脂质组合物混合；阳离子聚酯和脂质组合物的重量比为20:1，即20份重量阳离子聚酯和1份重量脂质组合物混合。
15、本申请的第二方面公开了本申请的复合材料在制备核酸药物载体中的应用。
16、可以理解，本申请的复合材料本身就是为了解决阳离子聚酯单独作为核酸药物载体时，递送体系的活体递送效果不理想的问题；因此，本申请的复合材料当然本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种用于核酸药物的复合材料，其特征在于：包括阳离子聚酯和脂质组合物；
2.根据权利要求1所述的复合材料，其特征在于：所述中性脂质为二硬脂酰磷脂酰胆碱、1,2-二油酰-sn-甘油-3-磷脂酰乙醇胺、1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱中的至少一种。
3.根据权利要求1所述的复合材料，其特征在于：所述可电离阳离子脂质为4-(N,N-二甲基氨基)丁酸(二亚油基)甲酯、((4 羟基丁基)氮杂二烷基)双(己烷-6 ,1-二基)双(2-己基癸酸酯)、8-[(2-羟乙基)[6-氧代-6-(十一烷基氧基)己基]氨基]辛酸1-辛基壬基酯中的至少一种。
4.根据权利要求1所述的复合材料，其特征在于：所述脂质聚乙二醇为1,2-二肉豆蔻酰-rac-甘油-3-甲氧基聚乙二醇2000、甲氧基聚乙二醇双十四烷基乙酰胺、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000中的至少一种。
5.根据权利要求1-4任一项所述的复合材料，其特征在于：所述脂质组合物由重量份0%~100%的中性脂质、0~100%的可电离阳离子脂质、0%~40%的胆固醇和0%~50%的脂质聚乙二
6.根据权利要求1-4任一项所述的复合材料，其特征在于：所述阳离子聚酯和脂质组合物的重量比为1:10~20:1。
7.权利要求1-6任一项所述的复合材料在制备核酸药物载体中的应用。
8.一种采用权利要求1-6任一项所述的复合材料作为载体的核酸药物。
9.根据权利要求8所述的核酸药物，其特征在于：核酸为mRNA、环状RNA、saRNA、siRNA、microRNA、反义寡核苷酸、shRNA、small activating RNA和DNA中的至少一种。
10.根据权利要求8或9所述的核酸药物，其特征在于：复合材料和核酸的质量比为5:1~500:1，其中复合材料的阳离子聚酯和脂质组合物的质量比为1:10~20:1。
11.权利要求8-10任一项所述的核酸药物的制备方法，其特征在于：包括以下步骤，
12.根据权利要求11所述的制备方法，其特征在于：所述溶剂为极性溶剂。
...【技术特征摘要】
1.一种用于核酸药物的复合材料，其特征在于：包括阳离子聚酯和脂质组合物；
2.根据权利要求1所述的复合材料，其特征在于：所述中性脂质为二硬脂酰磷脂酰胆碱、1,2-二油酰-sn-甘油-3-磷脂酰乙醇胺、1,2-二油酰基-sn-甘油-3-磷酸胆碱中的至少一种。
3.根据权利要求1所述的复合材料，其特征在于：所述可电离阳离子脂质为4-(n,n-二甲基氨基)丁酸(二亚油基)甲酯、((4 羟基丁基)氮杂二烷基)双(己烷-6 ,1-二基)双(2-己基癸酸酯)、8-[(2-羟乙基)[6-氧代-6-(十一烷基氧基)己基]氨基]辛酸1-辛基壬基酯中的至少一种。
4.根据权利要求1所述的复合材料，其特征在于：所述脂质聚乙二醇为1,2-二肉豆蔻酰-rac-甘油-3-甲氧基聚乙二醇2000、甲氧基聚乙二醇双十四烷基乙酰胺、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000中的至少一种。
5.根据权利要求1-4任一项所述的复合材料，其特征在于：所述脂质组合物由重量份0%~100%的中性脂质、0~100%的...
【专利技术属性】
技术研发人员：向文强，刘赣，管苗苗，郭冬宇，黄朝翔，邓扬，
申请(专利权)人：百达联康生物科技深圳有限公司，
类型：发明
国别省市：
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