一种多能干细胞来源的RPE细胞、制剂、药物组合物、试剂、方法及试剂盒技术

本发明专利技术属于再生医学领域，涉及细胞治疗，具体涉及一种多能干细胞来源的RPE细胞、制剂、药物组合物、试剂、方法及试剂盒，iPSC分化获得RPE细胞为由E6培养基中添加化学小分子作为抑制剂或激活剂实现，包括如下阶段：神经外胚层细胞诱导期、RPE祖细胞诱导期、RPE细胞诱导期和RPE细胞成熟期。本申请的分化过程中不需要手工剔除形态非RPE样的杂细胞，并通过传代培养，即可得到纯的RPE细胞。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于再生医学领域，涉及细胞治疗，具体涉及一种多能干细胞来源的rpe细胞、制剂、药物组合物、试剂、方法及试剂盒。

技术介绍

1、黄斑是视网膜的一个重要区域，位于眼后极部，主要与精细视觉及色觉等视功能有关。黄斑区出现病变，视网膜色素上皮（retinal pigment epithelium，rpe）细胞的进行性损失，最终导致视功能的丧失。年龄相关性黄斑变性（amd）是一种常见的、慢性的、持续性的黄斑退行性疾病，全球患病率约为8.7%，用药市场呈现一片蓝海。amd现有的主流治疗方式主要分为3类：激光介导、手术治疗和药物治疗：

2、（1）激光介导和药物治疗皆无法根治新生血管性amd，随着注射次数增加，抗vegf药的疗效逐渐减弱，且在部分患者身上会促进萎缩性amd的发生。激光疗法每年治疗成本在4,000-60,000元范围，药物治疗成本基本在20,000元以上，长期用药。

3、（2）而视网膜色素上皮（rpe）细胞是位于视网膜基底侧的一层规则的、紧密排列、多边形的色素细胞，其顶端布满微绒毛，包围着感光细胞的外节段（pos），参与rpe本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种多能干细胞来源的RPE细胞，其特征在于，所述RPE细胞是多能干细胞基于如下分化步骤获得，

2.根据权利要求1所述的一种多能干细胞来源的RPE细胞，其特征在于，所述多能干细胞为ESC、iPSC或通用型iPSCHLA-KO分化获得；

3.根据权利要求2所述的一种多能干细胞来源的RPE细胞，其特征在于，所述ESC为传代至4-7代的ESC细胞，每次接种与传代的比例设计为1：（3-12）；培养的ESC用消化成单细胞后，用iPSC培养基培养1天后，将ESC分化获得RPE细胞；

4.根据权利要求1所述的一种多能干细胞来源的RPE细胞，其特征在于，所述iPSC...

【技术特征摘要】

1.一种多能干细胞来源的rpe细胞，其特征在于，所述rpe细胞是多能干细胞基于如下分化步骤获得，

2.根据权利要求1所述的一种多能干细胞来源的rpe细胞，其特征在于，所述多能干细胞为esc、ipsc或通用型ipschla-ko分化获得；

3.根据权利要求2所述的一种多能干细胞来源的rpe细胞，其特征在于，所述esc为传代至4-7代的esc细胞，每次接种与传代的比例设计为1：（3-12）；培养的esc用消化成单细胞后，用ipsc培养基培养1天后，将esc分化获得rpe细胞；

4.根据权利要求1所述的一种多能干细胞来源的rpe细胞，其特征在于，所述ipsc培养基为：e8、stem flex或mtesr1为基础培养基，加入添加物y27632，y27632用量10μm。

5.根据权利要求1所述的一种多能干细胞来源的rpe细胞，其特征在于，ipsc分化获得rpe细胞为由e6培养基中添加化学小分子作为抑制剂或激活剂实现，包括如下阶段：神经外胚层诱导期、rpe祖细胞诱导期、rpe细胞诱导期和rpe细胞成熟期。

6.根据权利要求1所述的一种多能干细胞来源的rpe细胞，其特征在于，神经外胚层诱导期：

7.根据权利要求1所述的一种多能干细胞来源的rpe细胞，其特征在于，rpe祖细胞诱导期中：激活nicotinamide代谢信号通路是通过加入nicotinami...

【专利技术属性】
技术研发人员：王嘉显，张月辉，
申请(专利权)人：南京艾尔普再生医学科技有限公司，
类型：发明
国别省市：