一种基于(6,5)单手性单壁碳纳米管的比率型荧光传感器的核酸检测方法技术

本发明专利技术提供了一种基于(6,5)单手性单壁碳纳米管的比率型荧光传感器的核酸检测方法，所述方法包括：将ssDNA与SWCNTs经超声处理得到ssDNA‑SWCNTs分散液，采用双水相萃取法分离获取ssDNA‑(6,5)‑SWCNTs；将靶标单链核酸和核酸标准品分别与荧光探针在杂交缓冲溶液中发生杂交反应；反应结束加入ssDNA‑(6,5)‑SWCNTs和无机盐混合避光孵育；孵育后采用近红外光谱仪检测荧光探针的荧光强度和单手性单壁碳纳米管的荧光强度；将荧光探针的荧光强度与单手性单壁碳纳米管的荧光强度相乘，构建核酸标准品浓度和荧光强度乘积的标准曲线；根据标准曲线计算待测靶标单链核酸样品中的核酸浓度。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物传感器领域，具体涉及一种基于(6,5)单手性单壁碳纳米管的比率型荧光传感器的核酸检测方法。

技术介绍

1、外泌体，近年来被广泛认可是尺寸为40-120nm的纳米级细胞外囊泡，存在于所有类型的体液(血浆、唾液、尿液和腹水等)且易于获得，通过在细胞中转移多种类型的生物分子，其在细胞间通讯中起到重要作用，并影响人类健康和疾病。因此，外泌体可以用作诊断各类疾病的标志物，并可分类为：肿瘤源性外泌体(tumor-derived exosomes，texs)，包括外泌体表面蛋白和外泌体核酸。其中外泌体mirna因其对rna酶依赖性降解的稳定性而被认为是最广泛和最显著的癌症生物标志物。zhu yefei等探究了乳腺癌患者血清外泌体中mir-375的表达水平，发现与良性卵巢疾病与健康组相比显著上调。血清外泌体中的mir-375可作为潜在的肿瘤生物标志物，以提高乳腺癌的诊断效率。

2、目前，常规检测肿瘤源性外泌体核酸主要有定量逆转录聚合酶链反应、微阵列和二代测序等，通过常规方法获得的外泌体rna测量值对tex rna没有特异性，因为相同的rna也本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于(6,5)单手性单壁碳纳米管的比率型荧光传感器的核酸检测方法，其特征在于，所述核酸检测方法包括：

2.根据权利要求1所述的基于(6,5)单手性单壁碳纳米管的比率型荧光传感器的核酸检测方法，其特征在于，步骤(1)中，所述荧光探针上的荧光基团选自羧基荧光素、cy3或cy5中任意一种；

3.根据权利要求1或2所述的基于(6,5)单手性单壁碳纳米管的比率型荧光传感器，其特征在于，步骤(1)中，检测ssDNA-(6,5)-SWCNTs的荧光强度时，激发波长设置为575±2nm，发射波长设置为998±2nm。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的基于(...

【技术特征摘要】

1.一种基于(6,5)单手性单壁碳纳米管的比率型荧光传感器的核酸检测方法，其特征在于，所述核酸检测方法包括：

2.根据权利要求1所述的基于(6,5)单手性单壁碳纳米管的比率型荧光传感器的核酸检测方法，其特征在于，步骤(1)中，所述荧光探针上的荧光基团选自羧基荧光素、cy3或cy5中任意一种；

3.根据权利要求1或2所述的基于(6,5)单手性单壁碳纳米管的比率型荧光传感器，其特征在于，步骤(1)中，检测ssdna-(6,5)-swcnts的荧光强度时，激发波长设置为575±2nm，发射波长设置为998±2nm。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的基于(6,5)单手性单壁碳纳米管的比率型荧光传感器，其特征在于，步骤(1)中，所述杂交缓冲溶液按摩尔浓度计包括：8-12mm pb、138-142mm nacl、0.8-1.2mm mgcl2·6h2o和0.8-1.2mm cacl2，溶剂为depc；

5.根据权利要求1-4中任一项所述的基于(6...

【专利技术属性】
技术研发人员：李兰英，刘刚，闻艳丽，陈玉茹，王乐乐，曹梅霞，陶晴，许丽，梁文，杨雪，
申请(专利权)人：上海市计量测试技术研究院中国上海测试中心，华东国家计量测试中心，上海市计量器具强制检定中心，
类型：发明
国别省市：