【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于畜禽肉中兽药残留检测领域，具体地说是基于massworks软件结合dart-ms/ms技术建立畜禽肉中兽药残留谱库的方法。
技术介绍
1、随着畜牧养殖业的集约化、规模化发展，动物的群体发病现象已成常态，兽药的滥用现象日益严重。随着医药行业的发展，首要的种类种类呈逐年递增的趋势，而兽药的获得渠道也日益便捷。由此“兽药残留”而带来的食品安全问题以及“耐药性传递”引起的生物安全问题日益受到关注。随着我国《食品安全法》的出台以及农业部各项兽药残留限量规定的相继发布，食品及兽药种类的限定要求也越来越高。如：最新出台的国家标准《gb31650-2019食品安全国家标准食品中兽药最大残留限量》中规定了动物性食品中104种(类)兽药的最大残留限量；规定了154种允许用于食品动物，但不需要制定残留限量的兽药；规定了9种允许作治疗用，但不得在动物性食品中检出的兽药。因此食品监管部门以及食品检测部门将承担越来越重的监管压力和检测负担，且由于我国标准与他国标准可能存在差异从而导致进口畜禽肉中兽药残留不达标的可能性较大，故而对于进入我国的畜禽肉中兽药残留是海关必须要检测的项目，避免兽药残留超标的畜禽肉进入我国。
2、据数据统计兽药残留的检出率为2‰～5‰之间，却足以成为给人体带来潜在威胁以及影响产品国际竞争力的直接诱因。然而针对如此低的检出率，往往需要同一样品进行反复测定。这不仅延长了检测时间，增加了仪器损耗，而且提高了检测成本，同时还延误了产品的上市时间。更重要的是，针对每一种兽药进行准确分析，需要购买兽药标准品，且每种兽药标
3、目前，气相色谱质谱标准数据库已经被广泛建立，飞行时间质谱仪的数据谱库的建立也已有研究。但对于兽药，由于其多为难挥发性物质，在没有衍生的条件下很难采用气相色谱质谱技术对其进行测定。飞行时间质谱仪价格昂贵，操作复杂，维护成本较高难以普及。且电喷雾离子源(esi)受源外电离和基质效应的影响，需采用液相色谱仪对目标化合物进行预分离。因此谱库的建立，较多的受限于色谱柱的型号和品牌。
4、现有的化合物质谱裂解规律推断方法多采用高分辨质谱仪对化合物的母离子及子离子进行精确质量数的确定后，根据化合物本身的结构性质对其碎片结构进行推断，从而确定其裂解规律。现有专利号为201910739000.6，名称为：一种同步检测畜禽肉中152种化学污染物的高分辨质谱方法，该专利内容是利用液相色谱高分辨质谱对152种化学污染物建立检测方法，并建立谱图。首先其需要色谱分离，色谱分离时间冗长，效率较低；且其采用高分辨质谱技术，该设备价格昂贵、维护成本较高、耗材更换费用较高、对人员的能力要求较高，难以普及。
技术实现思路
1、本专利技术提供基于massworks软件结合dart-ms/ms技术建立畜禽肉中兽药残留谱库的方法，用以解决现有技术中的缺陷。
2、本专利技术通过以下技术方案予以实现：
3、基于massworks软件结合dart-ms/ms技术建立畜禽肉中兽药残留谱库的方法，包括如下步骤：
4、步骤一：配置各兽药残留的10μg/l的单个标准溶液，采用dart-ms/ms低分辨率质谱仪中的scan模式进行采集，以总离子流图的峰面积为判定指标对ms/ms锥孔电压(80v-130v)进行优化，以选择最佳的ms/ms锥孔电压；
5、步骤二：配置各兽药残留的混合标准溶液，浓度为10mg/l，在dart-ms/ms低分辨率质谱仪中的scan模式下输入上一步优化的最佳的ms/ms锥孔电压，获得各化合物的总离子流质谱图；并获得各兽药残留化合物的粗质量数；
6、步骤三：将步骤二中获得的各化合物的总离子流质谱图采用massworks软件进行同位素匹配后推算化合物的元素组成并校正计算准确相对分子质量；
7、步骤四：采用dart-ms/ms低分辨率质谱仪中的离子选择模式，对10μg/l的各兽药残留的单个标准溶液进行分析，通过考察碰撞电压5-50v范围内的变化值，来优选最佳的子离子以提高检测灵敏度，对10mg/l的混合标准工作液采用dart-ms/ms设备中的mrm模式进行采集，平行采样6次，确定各化合物母离子和子离子之间、子离子和子离子之间的丰度比，从而增加定性的准确性。
8、如上所述的基于massworks软件结合dart-ms/ms技术建立畜禽肉中兽药残留谱库的方法，所述的dart-ms/ms低分辨率质谱仪为三重四极杆串联质谱仪。
9、如上所述的基于massworks软件结合dart-ms/ms技术建立畜禽肉中兽药残留谱库的方法，所述的三重四极杆串联质谱仪的参数条件为：离子源：dart离子源；采集模式：正离子模式；离子化气体：氦气；离子源温度：350℃；进样模块：12dip-itsamplers模块；进样速度：0.6mm/s；外置真空泵的真空度：-75kpa；离子源出口距离质谱进样口的距离：2-4cm；ms/ms参数条件：毛细管电压：3500kv；干燥气温度300℃；干燥气流量1l/min；雾化气压力2psi；采集模式：全扫描模式、多反应监测。
10、如上所述的基于massworks软件结合dart-ms/ms技术建立畜禽肉中兽药残留谱库的方法，按照所诉方法建立的畜禽肉中兽药残留谱库数据包括以下数据：
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16、上述35种物质为畜禽肉中最为常见的兽药残留。
17、本专利技术的优点是：
18、1、本专利技术选择检出率较高的黄酮类化合物、喹诺酮类化合物、硝基咪唑类化合物为研究对象，为兽药化合物的定性提供依据。采用实时直接分析离子源-串联质谱仪对进行了准分子离子和碎片离子质谱信息的采集。结合massworks软件通过同位素峰对分子离子峰进行精确质量数校准，将质量数由低分辨率质谱仪提供的小数点后1位数精确到了小数点后4位数，提高了质量准确度，降低了假阳性。从而形成精确质量数据库，包括化合物的英文名、分子式，离子化模式及不同能量下的碎片离子质谱图，并探明上述药物的质谱裂解规律，从而实现用低分辨率质谱仪即可完成畜禽肉中兽药残留谱库的建立工作，从而无需使用高分辨率质谱仪也能获得精准的相对分子质量；同时本专利技术也无需色谱分离，省去了色谱分离的冗长过程，有效的提高了检测效率。
19、2、本专利技术使用的低分辨率质谱仪为目前检测机构较为普及的三重四级杆串联质谱仪，利用masswork软件的同位素推测功能，首本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.基于Massworks软件结合DART-Ms/Ms技术建立畜禽肉中兽药残留谱库的方法，其特征在于：包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的基于Massworks软件结合DART-Ms/Ms技术建立畜禽肉中兽药残留谱库的方法，其特征在于：所述的DART-MS/MS低分辨率质谱仪为三重四极杆串联质谱仪。
3.根据权利要求2所述的基于Massworks软件结合DART-Ms/Ms技术建立畜禽肉中兽药残留谱库的方法，其特征在于：所述的三重四极杆串联质谱仪的参数条件为：离子源：DART离子源；采集模式：正离子模式；离子化气体：氦气；离子源温度：350℃；进样模块：12Dip-itSamplers模块；进样速度：0.6mm/s；外置真空泵的真空度：-75KPa；离子源出口距离质谱进样口的距离：2-4cm；MS/MS参数条件：毛细管电压：3500KV；干燥气温度300℃；干燥气流量1L/min；雾化气压力2psi；采集模式：全扫描模式、多反应监测。
4.根据权利要求1所述的基于Massworks软件结合DART-Ms/Ms技术建立畜禽肉中兽药残留谱库的方
...【技术特征摘要】
1.基于massworks软件结合dart-ms/ms技术建立畜禽肉中兽药残留谱库的方法，其特征在于：包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的基于massworks软件结合dart-ms/ms技术建立畜禽肉中兽药残留谱库的方法，其特征在于：所述的dart-ms/ms低分辨率质谱仪为三重四极杆串联质谱仪。
3.根据权利要求2所述的基于massworks软件结合dart-ms/ms技术建立畜禽肉中兽药残留谱库的方法，其特征在于：所述的三重四极杆串联质谱仪的参数条件为：离子源：dart离子源；采集模式：正离子模...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘兰霞，解迎双，王波，刘阿静，寇宗红，白兴斌，
申请(专利权)人：白银市食品检验检测中心，
类型：发明
国别省市：
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