【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种从雪菊中提取高纯度奥卡宁的方法及采用该方法获得的提取物奥卡宁。
技术介绍
1、雪菊又名两色金鸡菊(coreopsis tinctoria.nutt.)，一年生草本，主要有效成分包括糖类、黄酮类、皂苷类、生物碱、鞣质、蒽醌类、大分子色素类化合物。
2、奥卡宁为雪菊中黄酮类化合物，具有良好的抗氧化、抗炎活性、抗衰老、抗光老化等效果。体外研究表明奥卡宁可显著抑制lps引起的tlr4表达和lps诱导的inos表达，并且还能抑制lps刺激的il-6和tnf-α的产生和mrna表达，从而具有较好的抗炎效果。且有研究学者报道，奥卡宁对uvb诱导的细胞损伤均有较强的保护效果。由于奥卡宁具有较优得抗氧化、抗炎活性、抗衰老等活性，因此在医药和护肤品应用领域具有广泛的前景。随着对奥卡宁药理研究的深入，奥卡宁的制备工艺也越来越受到研究者的重视，但是奥卡宁的酚羟基较多，立体环境比较复杂，采用化学合成方式获得合成路线繁琐，成本高，且纯度难以保证。
3、目前奥卡宁主要从菊科植物中获得分离提取。但是奥卡宁在菊科植物中含量较低，奥卡宁含量在0.1％～0.3％，且雪菊中化合物复杂，所以奥卡宁的纯化难度极大，得率低，生产成本高，目前奥卡宁的提取方法主要有以下几种：水提、醇提后大孔树脂柱层析、醇提后硅胶柱层析等，上述方法要么工艺简单，但奥卡宁含量低，要么奥卡宁含量高，但工艺繁琐，使用大量的易燃和有毒的有机溶剂，并且这些方法所制备的奥卡宁的从干药材的收率并不高，以干雪菊计算在0.01％～0.05％之间，造成雪菊药材不能被充分利用
4、专利号为cn201310064628.3的专利技术专利公开一种从雪菊中奥卡宁的提取方法，将雪菊醇提后，使用为正己烷和乙酸乙酯萃取，萃取物使用硅胶柱层析，经过结晶和重结晶后提取出奥卡宁，该法工艺繁琐，生产周期长，生产成本高。
5、专利号为cn202211457503.2的专利技术专利公开一种从雪菊提取物的制备方法，将雪菊醇提后，进行大孔树脂柱层析，制得的雪菊提取物中奥卡宁含量为10％。该法的缺点是雪菊中有效成分种类较多，难以单独分离出某一单一物质，分离出的物质纯度较低，导致奥卡宁的纯度低。
6、专利号为cn202111135486.6的专利技术专利公开一种从雪菊提取物的制备方法，采用水提、浓缩干燥等方法来提取奥卡宁，最终制得的雪菊粗提取物中奥卡宁含量仅为0.5％。
7、因此，可工业化生产的奥卡宁制备工艺的开发将具有显著的意义。
技术实现思路
1、本专利技术要解决的技术问题是克服现有技术中从雪菊中提取奥卡宁的纯度和得率都较低的缺陷，提供一种提高奥卡宁产率的提取方法。
2、为了解决上述技术问题，本专利技术提供了如下的技术方案：
3、一种从雪菊中提取高纯度奥卡宁的方法，包括如下步骤：
4、s1、醇提取：取药材粉碎后，以溶媒进行提取1～4次，每次提取0.2h～5个小时，合并提取液，将提取液减压浓缩得到雪菊醇提取物；溶媒为水、乙醇、甲醇中的一种或者几种混合溶液；优选地为溶媒为乙醇水溶液时，乙醇水溶液的体积分数为60～90％，优选地，乙醇水溶液的体积分数为90％；
5、溶媒的添加量为药材质量：溶媒质量＝1:5～1:30，提取温度为30-100℃；
6、优选地，药材与溶媒药材质量：溶媒质量＝1:10～15；
7、优选地，提取温度为80℃；
8、s2、酸水溶液萃取及水解：往s1所得雪菊醇提取物中，加入质量浓度为0.05％-4％的酸水溶液，搅拌，过滤得奥卡宁水解液；经过酸水解后，可以将雪菊中奥卡宁衍生物(例如马里苷)转化为奥卡宁，提高奥卡宁的提取率。优选的，酸水溶液的酸是硫酸、盐酸、硝酸、磷酸、醋酸、草酸、柠檬酸、苹果酸或马来酸中的任意一种或者多种；其中，盐酸挥发性强，腐蚀性强，对制备装置和工艺要求高；硝酸易制爆，获取难度大，易造成土壤富养化，排污难度大；磷酸易造成土壤富养化，排污难度大；醋酸挥发性强、对制备环境要求高，转化低，水解时间要求长，不利于工业生产；草酸具有毒性，容易在产品中残留，不利于产品的后续开发应用；优选地，酸是硫酸、盐酸；更优选地，酸是硫酸。
9、当酸水溶液的浓度太低时，将导致奥卡宁衍生物的转化率低，不能彻底转化，导致奥卡宁的产率低；当酸水溶液的浓度太高时，可能对奥卡宁的结构产生破坏，导致奥卡宁的产率低，此外酸浓度很高时对生产设备、生产环境的要求高，大大增加生产难度，生产可行性低。
10、优选地，酸的浓度优选为0.1～1％。在该浓度要求下，奥卡宁衍生物的转化率较高，对生产设备、生产环境的要求较低，生产可行性大大增加。
11、在一个实施方式中，所述加热水解的温度为70-100℃，水解时间为1～8小时；当温度不够，或时间不足时，将导致奥卡宁衍生物的转化率较低，不能彻底转化，导致奥卡宁的产率低；当温度过高、时间太长，奥卡宁的结构将遭受破坏，导致奥卡宁的产率降低。
12、优选地，加热水解的温度为80-95℃，水解时间为2～5小时。
13、在一个实施方式中，酸溶液的添加量为药材质量：酸溶液体积＝1：1～1:10。优选为：1：5～1：8。
14、s3、大孔树脂柱层析分离：取奥卡宁水解液进行大孔树脂分离，然后用不同体积分数的醇水溶液进行梯度洗脱，收集洗脱液，干燥后得纯度大于40％奥卡宁粗提取物；
15、大孔树脂对奥卡宁的吸附是以范德华力等作用力为主的物理吸附，奥卡宁又是弱酸性物质，在酸性环境下，奥卡宁以分子形式存在，有剩余的电子容易与大孔树脂的活性基团之间产生范德华力等作用力，所以容易被吸附，吸附量就高。在本申请中质量浓度为0.05％-4％的酸水溶液可以达到最高的吸附量，进一步提取奥卡宁的提取率。
16、大孔树脂是一类人工合成的具有多孔立体结构的有机高分子聚合物吸附剂，可利用它的巨大的表面积进行物理吸附。大孔树脂具有吸附选择性好、再生简便、物化稳定性高、解吸条件温和以及成本低廉等优点广泛用于工业化生产。大孔树脂用于分离纯化奥卡宁的原理是利用大孔树脂的表面吸附及其与奥卡宁的酚羟基形成氢键缔和，进而选择性的吸附奥卡宁，然后利用溶剂分子与奥卡宁形成结合能力更强的氢键将奥卡宁洗脱，从而达到纯化精制的目的。
17、大孔树脂为lx-100b、lsa100、xda-6、d101、ab-8、hpd-300或x-5。优选地为d101或ab-8；
18、优选的，柱体积为1～1.5l/bv，大孔吸附树脂柱径与柱高之比为1：10～12，上样速度为1～1.2bv/h；用不同体积分数的醇水溶液进行梯度洗脱，收集洗脱液，得到3个部分，即fr.1～fr.3；将fr.3浓缩、干燥后得纯度大于40％奥卡宁粗提取物；
19、醇水溶液优选为乙醇水溶液、甲醇水溶液；
20、梯度洗脱时各梯度的洗脱剂依次为：
21、梯度ⅰ，洗脱剂为纯化水或者体积分数5～10％的醇水溶液，用量为5本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种从雪菊中提取高纯度奥卡宁的方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.如权利要求1所述的从雪菊中提取高纯度奥卡宁的方法，其特征在于，
3.如权利要求1所述的从雪菊中提取高纯度奥卡宁的方法，其特征在于，S1中醇提取时，采用体积分数为60％～90％的乙醇水溶液作为溶媒进行提取；
4.如权利要求3所述的从雪菊中提取高纯度奥卡宁的方法，其特征在于，S1中醇提取时，提取的次数为1～4次，每次提取0.2～5个小时。
5.如权利要求1所述的从雪菊中提取高纯度奥卡宁的方法，其特征在于，S3中，柱体积为1～1.5L/BV，大孔吸附树脂柱径与柱高之比为1：10～12，上样速度为1～1.2BV/h。
6.如权利要求5所述的从雪菊中提取高纯度奥卡宁的方法，其特征在于，S3中醇水溶液进行梯度洗脱时，
7.如权利要求6所述的从雪菊中提取高纯度奥卡宁的方法，其特征在于，
8.如权利要求1所述的从雪菊中提取高纯度奥卡宁的方法，其特征在于，结晶时加入溶剂加热溶解降温，在5℃，搅拌速度20～50r/min的条件下，搅拌析晶6h～1
9.如权利要求8所述的从雪菊中提取高纯度奥卡宁的方法，其特征在于，采用50％～80％的乙醇水溶液为溶剂进行结晶。
10.一种雪菊提取物，采用如权利要求1-10中任一项所述的方法制备得到的奥卡宁制品。
...【技术特征摘要】
1.一种从雪菊中提取高纯度奥卡宁的方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.如权利要求1所述的从雪菊中提取高纯度奥卡宁的方法，其特征在于，
3.如权利要求1所述的从雪菊中提取高纯度奥卡宁的方法，其特征在于，s1中醇提取时，采用体积分数为60％～90％的乙醇水溶液作为溶媒进行提取；
4.如权利要求3所述的从雪菊中提取高纯度奥卡宁的方法，其特征在于，s1中醇提取时，提取的次数为1～4次，每次提取0.2～5个小时。
5.如权利要求1所述的从雪菊中提取高纯度奥卡宁的方法，其特征在于，s3中，柱体积为1～1.5l/bv，大孔吸附树脂柱径与柱高之比为1：10～12，上样速度为1～1.2b...
【专利技术属性】
技术研发人员：舒鹏，李名洁，
申请(专利权)人：深圳市护家科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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