【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于细菌裂解，具体涉及肽聚糖水解酶lyszw3、突变体、编码基因、重组表达载体及其应用。
技术介绍
1、抗生素曾被认为是治疗细菌感染性疾病最有力的武器，然而随着抗生素的滥用现象日益严重，细菌耐药性问题日益加剧，新抗生素研发的速度远低于耐药菌产生的速度。可作为替代的新抗生素又为数极少，且费用昂贵，造成临床上大量耐药菌感染者因无药可医而死亡，在这样严峻的抗生素耐药形式作用下，作为可替代抗生素成为新型抗菌制剂的噬菌体，引起国内外学者的重视。
2、噬菌体是一类以微生物(细菌、真菌、放线菌或螺旋体)为宿主的病毒，没有细胞结构，仅由衣壳蛋白和其内部的遗传物质组成，必须依赖宿主进行复制和增殖。噬菌体作为细菌的天然杀手，广泛存在于自然界中，是地球上最丰富多样的生物体，它们的数量大约是细菌的10倍。近一个多世纪以来，噬菌体治疗的安全性和有效性已经在大量动物试验中得到了证实。裂解性噬菌体在感染宿主细菌细胞后即立即启动自身早期基因的表达，通过这些早期基因表达产物降解宿主dna，从而终止宿主的基因表达，夺取宿主的dna复制机器大量合成自身核酸；当产生足够的噬菌体后，这些核酸被当作模板产生大量的噬菌体结构蛋白，这些结构蛋白对噬菌体基因组进行加工和包装，产生下一代噬菌体颗粒。一旦噬菌体调控蛋白积累到一定水平，即启动噬菌体的穿孔素大量表达，穿孔素在宿主细胞内形成孔洞，导致噬菌体裂解酶穿过内膜并接近细胞壁，将细胞壁裂解，从而达到裂解细菌的目的。
3、除了完整的噬菌体颗粒可以作为抗菌剂外，噬菌体编码的肽聚糖水解酶—裂解酶(lys
4、目前，对革兰氏阴性菌和革兰氏阴性菌具有裂解活性的噬菌体裂解酶研究较少。因此，有必要开发新的、对革兰氏阴性菌具有高效裂解活性的噬菌体裂解酶。
技术实现思路
1、本专利技术提出一种肽聚糖水解酶lyszw3及其突变体，实现对革兰氏阳性菌和阴性菌具均有高效裂解活性。
2、基于此，本专利技术的方案如下：
3、本专利技术的第一个方面在于，提出肽聚糖水解酶lyszw3在细菌裂解中的应用，所述肽聚糖水解酶lyszw3的氨基酸序列如seq id no：1所示。
4、可选地，所述肽聚糖水解酶lyszw3的核苷酸序列如seq id no：2所示。
5、可选地，所述细菌为革兰氏阴性菌。
6、本专利技术的第二个方面在于，提出氨基酸序列如seq id no：3、seq id no：5或seqid no：7所示的肽聚糖水解酶突变体。
7、本专利技术的第三个方面在于，提出编码以上所述肽聚糖水解酶突变体的基因。
8、可选地，上述基因的核苷酸序列如seq id no：4、seq id no：6或seq idno：8所示。
9、本专利技术的第四个方面在于，提出一种重组表达载体，包含有以上第三方面所述的基因。
10、本专利技术的第五个方面在于，提出一种重组工程菌，包含有以上第三方面所述的重组表达载体。
11、可选地，所述重组工程菌为大肠杆菌。
12、本专利技术的第六个方面在于，提出第二个方面所述的肽聚糖水解酶突变体在细菌裂解中的应用，所述细菌包括多种革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌。
13、可选地，所述细菌包括鲍曼不动杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、猪链球菌、无乳链球菌、停乳链球菌、化脓链球菌和肺炎链球菌中的一种或多种。
14、更优选地，所述细菌包括鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌中的一种或多种。
15、本专利技术的第七个方面在于，提出一种抗菌产品，包括如seq id no：3、seq id no：5或seq id no：7所示氨基酸序列中的一种或多种肽聚糖水解酶突变体；所述抗菌产品包括抗感染药物组合物、饲料添加剂。
16、可选地，所述抗菌产品还包括氨基酸序列如seq id no：1所示的肽聚糖水解酶lyszw3。
17、相比现有技术，本专利技术的有益效果在于：
18、1.本专利技术提出的肽聚糖水解酶lyszw3，以及肽聚糖水解酶突变体在体内和体外对鲍曼不动杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、猪链球菌、无乳链球菌、停乳链球菌、化脓链球菌和肺炎链球菌具有较好的裂解效果，能广谱裂解革兰氏阴性菌和阳性菌。
19、2.本专利技术提出的肽聚糖水解酶突变体相比野生型具有更好的效果；同时所述肽聚糖水解酶突变体能在大肠杆菌中进行可溶性表达，酶活性高，在抗感染类药物以及饲料添加剂的研发中具有较好的应用前景。
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1.肽聚糖水解酶LysZW3在细菌裂解中的应用，其特征在于，所述肽聚糖水解酶LysZW3的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。
2.氨基酸序列如SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：5或SEQ ID NO：7所示的肽聚糖水解酶突变体。
3.编码权利要求2所述肽聚糖水解酶突变体的基因。
4.根据权利要求3所述的基因，其特征在于，核苷酸序列如SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：8所示。
5.重组表达载体，其特征在于，含有权利要求3或4所述的基因。
6.重组工程菌，其特征在于，含有权利要求5所述的重组表达载体。
7.权利要求2所述肽聚糖水解酶突变体在细菌裂解中的应用，所述细菌包括多种革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述细菌包括鲍曼不动杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、猪链球菌、无乳链球菌、停乳链球菌、化脓链球菌和肺炎链球菌中的一种或多种。
9.抗菌产品，其特征在于，
10.根据权利要求9所述的抗菌产品，其特征在于，还包括氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示的肽聚糖水解酶LysZW3。
...【技术特征摘要】
1.肽聚糖水解酶lyszw3在细菌裂解中的应用，其特征在于，所述肽聚糖水解酶lyszw3的氨基酸序列如seq id no：1所示。
2.氨基酸序列如seq id no：3、seq id no：5或seq id no：7所示的肽聚糖水解酶突变体。
3.编码权利要求2所述肽聚糖水解酶突变体的基因。
4.根据权利要求3所述的基因，其特征在于，核苷酸序列如seq id no：4、seq id no：6、seq id no：8所示。
5.重组表达载体，其特征在于，含有权利要求3或4所述的基因。
6.重组工程菌，其特征在于，含有权利要求5所述的重组表达载体。
7.权利要求2所述肽聚...
【专利技术属性】
技术研发人员：杨航，何进，张丽，赵子荣，
申请(专利权)人：湖北之微生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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