【技术实现步骤摘要】
专利
本专利技术涉及制备包含磷脂稳定的全氟丁烷微泡的超声造影剂前体的方法。所述方法顺从工业规模生产，并且提供所述微泡的更一致的瓶与瓶产率(vial-to-vial yield)和尺寸分布。还提供使用本专利技术的方法制备试剂盒和超声造影剂的方法。
技术介绍
1、基于全氟化碳(例如，全氟丙烷或全氟丁烷)的磷脂稳定的微泡的超声造影剂在本领域中熟知[参见，例如wheatley等，j.drugdel.sci.technol.,23(1),57-72(2013)]。
2、wo 97/29782教导了在室温下稳定的超声造影剂前体可通过在选自蔗糖、麦芽糖、海藻糖、棉子糖或水苏糖(优选蔗糖)的冷冻-干燥稳定剂存在下冻干全氟化碳微泡来制备。
3、wo 99/03558公开了选择超声造影气体微泡形成多分散混合物以获得具有紧凑尺寸分布(即，单分散性)的这类微泡的方法。所述方法包括浮选和再悬浮。
4、wo 99/08715公开了制备包含含气体囊泡的水性分散体的药物组合物的方法，所述囊泡的膜包含两亲性成膜材料，所述方法包括：
5、(i)由包含两亲性成膜材料的混合物产生含气体囊泡的液体分散体；
6、(ii)冻干所述含气体囊泡的液体分散体；
7、(iii)用无菌水性液体重构步骤(ii)的冻干产物以生成含气体囊泡的水性分散体；和
8、(iv)处理步骤(i)或步骤(iii)的水性分散体产物或步骤(ii)的冻干产物以生成含气体囊泡的基本无聚集物的无菌水性分散体。
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10、ep 1228770 a1教导了制备包含气体微泡的冻干的超声造影剂的方法，其中冻干的前体的小瓶在减小的顶空气体压力下密封。据说该减压有助于控制在重构前体小瓶后形成的水性微泡组合物中的粒度。
11、wo 2004/069284解决了得到具有限定尺寸分布的磷脂稳定的气体微泡超声造影剂的问题。wo 2004/069284教导了在冻干之前在微泡制备乳液中应该使用与水基本不混溶的有机溶剂。wo 2004/069284教导了在重构冻干的前体后得到的微泡具有相对较小的直径和窄尺寸分布。
12、solis等[int.j.pharmaceut.,396(1-2),30-38(2010)]研究了赋形剂(包括冻干保护剂)对冻干的全氟丙烷微泡前体的影响。他们得到的结论是，葡萄糖是最好的冻干保护剂，紧接着是海藻糖，这两者均优于蔗糖或甘露糖醇。
13、feshitan等[j.coll.interf.sci.,329,316-324(2009)]报道，与表面活性剂涂覆的微泡形成对比，脂质涂覆的微泡在离心之后稳定，并且脂质壳粘性高且相对不透气。feshitan等报道在4-5μm尺寸范围内的全氟丁烷微泡稳定至少2天，但在2周后趋于崩解成较小尺寸的微泡(1-2μm)。
14、仍然需要能够控制造影剂的微泡浓度和尺寸分布、产率和其它重要特性的瓶与瓶变化的超声冻干前体制备方法。所述方法需要顺从工业规模生产，并获得具有满足规章要求(例如，美国药典和国际协调会议指南(ich guidelines))的小瓶含量和安全性特性的均一性的前体产物。
技术实现思路
1、专利技术概述
2、例如超声处理和高剪切乳化的常规微泡超声造影剂制备方法提供良好的产率和低成本生产。当容量规模扩大到工业生产时，它们具有难以控制微泡的尺寸分布的缺点。虽然已经开发了容许制备具有紧凑尺寸分布的这类微泡的其它制备技术，但这些备选方法的产率较低，涉及高成本设备或太慢而无法扩大规模到工业生产方法。
3、本专利技术寻求提供顺从工业规模生产、但对造影剂的微泡浓度、尺寸分布、产率和其它重要特性的瓶与瓶变化也给予足够控制的方法。
4、本专利技术人发现，在上千个微泡造影剂小瓶的批量生产中，两个关键参数对于控制变化性是重要的：(a)在冻干之前的微泡的尺寸范围；和(b)在分配到指定小瓶与将小瓶内含物在-40℃至-70℃下冷冻之间经过的时间(“停留时间(holding time)”)。
5、本专利技术提供了控制这两参数的方法，随之而来的优势是：
6、(i)在每个小瓶中最佳微泡产率和浓度；
7、(ii)对瓶与瓶含量的均一性的控制。
8、还发现本专利技术的造影剂前体对多价阳离子不太敏感。
9、不希望受理论约束，本专利技术人认为，由于在液体基质(例如，蔗糖溶液)和充气微泡之间的高密度增量，微泡趋于快速分离到液体体积的顶部(“乳脂化(creaming)”)。必须使该乳脂化减至最小并对其加以控制，从而提供上述益处(i)和(ii)。认为很可能表面层中高浓度的微泡在冻干期间削弱了饼的干燥，和/或太高的局部浓度减少了微泡的生存率，因为它们被部分地捕集在最终蔗糖结构的外侧，即表面中的孔，而不是完全包埋在气囊(gaspocket)中。
10、专利技术详述
11、在第一方面，本专利技术提供了制备包含由氢化卵磷脂酰丝氨酸稳定的全氟丁烷微泡在蔗糖中的冻干组合物的超声造影剂前体的方法，其中所述方法包括：
12、(i)提供所述由氢化卵磷脂酰丝氨酸稳定的全氟丁烷微泡在水性溶液中的水性悬浮液；
13、(ii)将所述微泡的尺寸调节到在2-5μm范围内的中值尺寸；
14、(iii)用无菌水性蔗糖溶液稀释来自步骤(ii)的调好尺寸的悬浮液以获得5-20％w/v的最终蔗糖浓度；
15、(iv)将来自步骤(iii)的组合物的等分试样分配到小瓶中以获得填充的小瓶；
16、(v)在完成步骤(iv)的分配之后在小于5分钟的停留时间段内，将各个这样填充的小瓶冷却到-40℃至-70℃的温度；
17、(vi)根据需要重复步骤(iv)和(v)，直到已得到所需数目的冷却的填充的小瓶；
18、(vii)冷冻干燥来自步骤(v)和(vi)的冷却的填充的小瓶；
19、(viii)用全氟丁烷回填在来自步骤(vii)的冷冻干燥的小瓶中的顶空气体；
20、(ix)用封盖件密封来自步骤(viii)的小瓶。
21、术语“造影剂”具有其在体内医学成像领域中的常规含义，并且是指以适合哺乳动物施用的形式的试剂，与通过仅使哺乳动物受试者成像得到的图像相比，其有助于提供在目标区域或器官中的更清晰的图像。术语“受试者”是指哺乳动物体内，优选完整哺乳动物体内，且更优选活着的人类受试者。短语“以适合哺乳动物施用的形式”意指如下组合物，其无菌，无热原，没有产生毒性或副作用的化合物并且在生物相容的ph(约ph 4.0-10.5)下配制。所述组合物没有会本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.制备包含由氢化卵磷脂酰丝氨酸稳定的全氟丁烷微泡在蔗糖中的冻干组合物的超声造影剂前体的工业规模批量的小瓶的方法，其中批量为500-80,000个，
2.权利要求1的方法，其中所述冻干的前体组合物为无菌的。
3.权利要求1或2的方法，其中步骤(iii)的蔗糖浓度为8-12％w/v。
4.权利要求1-2中任一项的方法，其中步骤(ii)的尺寸调节通过以下进行：
5.权利要求1-2中任一项的方法，其中，在步骤(iii)之后，在进行分配步骤(iv)之前检查尺寸分布和微泡浓度。
6.权利要求1-2中任一项的方法，其中步骤(v)的停留时间段为1.0至2.75分钟的范围内。
7.权利要求1-2中任一项的方法，其中步骤(v)的停留时间段对于各个填充的小瓶相同。
8.制备用于制备超声造影剂的试剂盒的方法，所述超声造影剂包含由氢化卵磷脂酰丝氨酸稳定的全氟丁烷微泡在无菌水性介质中的悬浮液，所述方法包括：
9.权利要求8的方法，其中所述无菌水性溶液为注射用水，所述注射用水含有小于100μm总浓度的游离铝、钡、
10.制备超声造影剂的方法，所述超声造影剂包含由氢化卵磷脂酰丝氨酸稳定的全氟丁烷微泡在无菌水性介质中的悬浮液，所述方法包括：
...【技术特征摘要】
1.制备包含由氢化卵磷脂酰丝氨酸稳定的全氟丁烷微泡在蔗糖中的冻干组合物的超声造影剂前体的工业规模批量的小瓶的方法，其中批量为500-80,000个，
2.权利要求1的方法，其中所述冻干的前体组合物为无菌的。
3.权利要求1或2的方法，其中步骤(iii)的蔗糖浓度为8-12％w/v。
4.权利要求1-2中任一项的方法，其中步骤(ii)的尺寸调节通过以下进行：
5.权利要求1-2中任一项的方法，其中，在步骤(iii)之后，在进行分配步骤(iv)之前检查尺寸分布和微泡浓度。
6.权利要求1-2中任一项的方法，其中步...
【专利技术属性】
技术研发人员：I亨里克森，S克瓦勒，OJ托克鲁，M斯维尔德诺尔德莫基斯鲁，P松图姆，
申请(专利权)人：通用电气医疗集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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