永生化猪脂肪间充质干细胞的构建方法及其应用技术

技术编号:40041359 阅读:36 留言:0更新日期:2024-01-16 19:46
本发明专利技术属于生物医药领域,公开一种永生化猪脂肪间充质干细胞的构建方法及其应用。通过将表达猴病毒40大T抗原的慢病毒质粒转导到猪脂肪间充质干细胞系,建立了具有猪脂肪间充质干细胞特性的细胞系。通过在原代猪脂肪间充质干细胞中稳定过表达SV40LT蛋白,成功得到了可以接近无限次传代的永生化的猪脂肪间充质干细胞,且永生化后猪脂肪间充质干细胞拥有和原代猪脂肪间充质干细胞相同的成脂分化的能力,并利用永生化的猪脂肪间充质干细胞成功筛选出可以促进猪脂肪间充质干细胞分化的小分子化合物厚朴酚。此发明专利技术为研究猪的脂肪代谢提供了一种更加便利的细胞系,使得体外药物筛选更加便利,也有利于推动科研工作的进步。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物医药领域,具体涉及永生化猪脂肪间充质干细胞的构建方法及其应用


技术介绍

1、脂肪组织是人和动物体内重要的物质之一,是机体能量储存的主要方式,脂肪代谢是机体最基本的能量代谢方式,脂肪代谢失衡会严重影响机体的生命活动,近年来由于脂肪沉积过多而引起机体脂类代谢紊乱,产生胰岛素抵抗和胰高血糖素血症,进而导致各种疾病,如肥胖、高血压、高血脂、冠心病、动脉粥样硬化和糖尿病等,已成为世界性的医学难题。猪与人类具有相似的代谢功能、心血管系统以及成比例的器官大小,且猪自身有足够厚的脂肪层,不需要混合不同层或不同动物的脂肪组织,也能得到足够多的脂肪细胞进行研究。因此科研人员更倾向使用猪作为研究人类能量代谢和肥胖的动物模型。在畜牧生产中,虽然已获得了大量的优良品种,但是动物机体的脂肪过度沉积和异位沉积仍是影响育种工作的难题,因此了解动物机体脂肪沉积的规律及其分子调控机理是顺利开展动物育种工作最关键的前提,同时也是科研工作者函待解决的难题。

2、脂肪间充质干细胞(adipose-derived mesenchymal stem cells,ascs本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种具有猪脂肪间充质干细胞特性的细胞系,其特征在于,其中导入并表达猴病毒40大T抗原的猪脂肪间充质干细胞系而建立。

2.如权利要求1所述的细胞系,其特征在于,所述导入并表达猴病毒40大T抗原是通过慢病毒质粒转导到猪脂肪间充质干细胞系中。

3.一种制备具有猪脂肪间充质干细胞特性的细胞系的方法,其包括如下步骤:

4.如权利要求3所述的方法,其特征在于,所述哺乳动物细胞系为293T细胞。

5.如权利要求3或4所述的方法,其特征在于,还包括对感染后的猪脂肪间充质干细胞进行形态观察和贴壁情况,以确定是否获得永生化猪脂肪间充质干细胞。

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【技术特征摘要】

1.一种具有猪脂肪间充质干细胞特性的细胞系,其特征在于,其中导入并表达猴病毒40大t抗原的猪脂肪间充质干细胞系而建立。

2.如权利要求1所述的细胞系,其特征在于,所述导入并表达猴病毒40大t抗原是通过慢病毒质粒转导到猪脂肪间充质干细胞系中。

3.一种制备具有猪脂肪间充质干细胞特性的细胞系的方法,其包括如下步骤:

4.如权利要求3所述的方法,其特征在于,所述哺乳动物细胞系为293t细胞。

5.如权利要求3或4所述的方法,其特征在于,还包括对感染后的猪脂肪间充质干细胞进行形态观察和贴壁情况,以确定是否获得永生化猪脂肪间充质干细胞。

6.一种利用如权利要求1或2所述的细胞系,以及如权利要求3至5任一项所述方法...

【专利技术属性】
技术研发人员:陈小冬褚毅桂思思郑亚侦赵亚湘
申请(专利权)人:华中农业大学
类型:发明
国别省市:

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