【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及稳转细胞，具体涉及一种重组质粒、重组慢病毒载体、稳转细胞系及其应用。
技术介绍
1、cd32a是由fcγriia编码的免疫球蛋白受体，是一种对igg fc片段具有低亲和力的激活受体跨膜糖蛋白，主要表达在单核/巨噬细胞和树突状细胞上，触发细胞效应分子的一系列功能，如吞噬作用、抗体依赖的细胞介导的细胞毒性、抗原呈递、细胞因子释放等，被证实是hiv潜伏感染储存库的标志物。艾滋病的主要障碍是潜伏感染储存库的存在，因此cd32a作为潜伏感染储存库的标志物与gp120联合制备成gp120/cd32a双car-t用于hiv潜伏感染储存库的清除引起了极大的关注。fcγriia、fcγriib、fcγriic同属于fcγrii亚家族成员，且还有多种丰富的多态性。其所编码的蛋白cd32a、cd32b、cd32c胞外域一致度达89％，相似度达93％。尤其是cd32c和cd32a同属于激活受体，胞内域序列几乎一致。如何利用噬菌体展示技术筛选出针对cd32a胞外域的特异性高亲和的scfv序列成为其中的关键。
技术实现思路
【技术保护点】
1.一种重组质粒，其特征在于，所述重组质粒中含有如SEQ ID NO:1所示的去除部分胞内域后的FcγRIIC核苷酸序列。
2.根据权利要求1所述的重组质粒，其特征在于，所述重组质粒是以PLVX-EGFP-puro为质粒载体骨架，利用同源重组将SEQ ID NO：1所示的去除部分胞内域后的FcγRIIC核苷酸序列重组到PLVX-EGFP-puro载体上得到。
3.权利要求1或2所述的重组质粒的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：
4.根据权利要求3所述的重组质粒的构建方法，其特征在于，用于扩增去除部分胞内域后的FcγRIIC核苷酸序
【技术特征摘要】
1.一种重组质粒，其特征在于，所述重组质粒中含有如seq id no:1所示的去除部分胞内域后的fcγriic核苷酸序列。
2.根据权利要求1所述的重组质粒，其特征在于，所述重组质粒是以plvx-egfp-puro为质粒载体骨架，利用同源重组将seq id no：1所示的去除部分胞内域后的fcγriic核苷酸序列重组到plvx-egfp-puro载体上得到。
3.权利要求1或2所述的重组质粒的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：
4....
【专利技术属性】
技术研发人员：孙健红，陈志方，邓鑫澳，韦婵娟，徐承晨，
申请(专利权)人：武汉科技大学，
类型：发明
国别省市：
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