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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及精液冻存,具体是一种绵羊冻精稀释剂配方及精液冷冻方法。
技术介绍
1、长期以来国内外许多学者在羊精液保存方面做了大量研究工作,主要集中在羊精液冷冻稀释液方面,研究发现精子在降温和冷冻保存的过程中,很容易产生各种损伤,包括物理性的、化学性的和生物性的损伤。冷冻处理的精液在解冻后与新鲜精液相比较,其精子的成活率、精子活力和顶体完整率显著下降,这对生产实践来说是极其不利的。
技术实现思路
1、本专利技术要解决的技术问题就是克服以上的技术缺陷,提供一种绵羊冻精稀释剂配方及精液冷冻方法能显著提高了冷冻处理的精液在解冻后的精子成活率、精子活力和顶体完整率。
2、为了解决上述问题,本专利技术的技术方案为:稀释剂包括以下成分:鲜脱脂牛奶、乳糖、葡萄糖、柠檬酸纳、维生素c、双链霉素、牛血清、卵黄、甘油、水;每100m l水中含有以下成分:鲜脱脂牛奶4-6m l、乳糖3-4g、葡萄糖3-4g、柠檬酸纳1-2g、维生素c0.003-0.005g、双链霉素80-120u l、牛血清4-6m l、卵黄18-22m l、甘油5-7m l。
3、进一步,稀释剂制备包括以下步骤:
4、步骤1,按照以下配比进行称量:鲜脱脂牛奶4-6m l、乳糖3-4g、葡萄糖3-4g、柠檬酸纳1-2g、维生素c 0.003-0.005g、双链霉素80-120u l、牛血清4-6m l、卵黄18-22m l、甘油5-7m l,余量为水,以上体积总量为100m l;
5、步
6、步骤3、将步骤2中制备得到的混合液中加入甘油,搅拌均匀,加入水至100m l,调节ph为6.9-7.2,渗透压为1290mosm,制备得到冻精稀释剂。
7、进一步,所述每100m l水中含有以下成分:鲜脱脂牛奶5m l、乳糖3.13g、葡萄糖3.25g、柠檬酸纳1.65g、维生素c0.004g、双链霉素100u l、牛血清5m l、卵黄20m l、甘油6ml。
8、进一步,所述冷冻方法如下:
9、步骤1、取健康绵羊精液并检测品质,活力大于80%的精液,水浴升温后等温1:1稀释;
10、步骤2、二次水浴等温1:3稀释;
11、步骤3、取出集精管,将上述稀释后的精液溶液装0.25ml或0.5ml的细管密封;
12、步骤4、将细管精液单层码平,包裹10层纱布,在4摄氏度下平衡2.5-3小时;
13、步骤5、将上述细管精液戴手套快速码架,保证一齿一管,继续平衡0.5h左右;
14、步骤6、快速取出细管精液以及细管架,置于液氮面上熏蒸;
15、步骤7、迅速倒入液氮中冷冻,冷冻5分钟后,解冻检验精液品质,活力大于60%的进行保存。
16、进一步,所述冷冻方法中步骤1温度为36摄氏度。
17、进一步,所述冷冻方法步骤2温度为36摄氏度。
18、进一步,所述冷冻方法中步骤6细管架位于液氮面上方2厘米处熏蒸6分钟。
19、进一步,所述稀释剂在1-4摄氏度保存。
20、本专利技术与现有的技术相比的优点在于:
21、1、本专利技术稀释剂每100m l水中含有以下成分:鲜脱脂牛奶4-6m l、乳糖3-4g、葡萄糖3-4g、柠檬酸纳1-2g、维生素c0.003-0.005g、双链霉素80-120u l、牛血清4-6m l、卵黄18-22m l、甘油5-7m l,通过适宜组分复配制备的精液冷冻稀释液,显著提高了冷冻处理的精液在解冻后的精子成活率、精子活力和顶体完整率。
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1.一种绵羊冻精稀释剂配方及精液冷冻方法,其特征在于:稀释剂包括以下成分:鲜脱脂牛奶、乳糖、葡萄糖、柠檬酸纳、维生素C、双链霉素、牛血清、卵黄、甘油、水;每100ml水中含有以下成分:鲜脱脂牛奶4-6ml、乳糖3-4g、葡萄糖3-4g、柠檬酸纳1-2g、维生素C0.003-0.005g、双链霉素80-120ul、牛血清4-6ml、卵黄18-22ml、甘油5-7ml。
2.根据权利要求1所述的一种绵羊冻精稀释剂配方及精液冷冻方法,其特征在于:稀释剂制备包括以下步骤:
3.根据权利要求1所述的一种绵羊冻精稀释剂配方及精液冷冻方法,其特征在于:所述每100ml水中含有以下成分:鲜脱脂牛奶5ml、乳糖3.13g、葡萄糖3.25g、柠檬酸纳1.65g、维生素C0.004g、双链霉素100ul、牛血清5ml、卵黄20ml、甘油6ml。
4.根据权利要求1所述的一种绵羊冻精稀释剂配方及精液冷冻方法,其特征在于:所述冷冻方法如下:
5.根据权利要求4所述的一种绵羊冻精稀释剂配方及精液冷冻方法,其特征在于:所述冷冻方法中步骤1温度为36摄氏度。
>6.根据权利要求4所述的一种绵羊冻精稀释剂配方及精液冷冻方法,其特征在于:所述冷冻方法步骤2温度为36摄氏度。
7.根据权利要求4所述的一种绵羊冻精稀释剂配方及精液冷冻方法,其特征在于:所述冷冻方法中步骤6细管架位于液氮面上方2厘米处熏蒸6分钟。
8.根据权利要求1所述的一种绵羊冻精稀释剂配方及精液冷冻方法,其特征在于:所述稀释剂在1-4摄氏度保存。
...【技术特征摘要】
1.一种绵羊冻精稀释剂配方及精液冷冻方法,其特征在于:稀释剂包括以下成分:鲜脱脂牛奶、乳糖、葡萄糖、柠檬酸纳、维生素c、双链霉素、牛血清、卵黄、甘油、水;每100ml水中含有以下成分:鲜脱脂牛奶4-6ml、乳糖3-4g、葡萄糖3-4g、柠檬酸纳1-2g、维生素c0.003-0.005g、双链霉素80-120ul、牛血清4-6ml、卵黄18-22ml、甘油5-7ml。
2.根据权利要求1所述的一种绵羊冻精稀释剂配方及精液冷冻方法,其特征在于:稀释剂制备包括以下步骤:
3.根据权利要求1所述的一种绵羊冻精稀释剂配方及精液冷冻方法,其特征在于:所述每100ml水中含有以下成分:鲜脱脂牛奶5ml、乳糖3.13g、葡萄糖3.25g、柠檬酸纳1.65g、维生素c0.00...
【专利技术属性】
技术研发人员:李玉鹏,张效生,张金龙,张龙,姚大为,郭晓飞,陈龙宾,
申请(专利权)人:天津市农业科学院,
类型:发明
国别省市:
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