【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物，特别涉及一种cle19基因在调控拟南芥角果饱满度的应用。
技术介绍
1、拟南芥(arabidopsis thaliana(l.)heynh.)是十字花科拟南芥属一年生细弱草本，高20-35厘米，被单毛与分枝毛。茎不分枝或自中上部分枝，下部有时为淡紫白色，茎上常有纵槽，上部无毛，下部被单毛，偶杂有2叉毛。基生叶莲座状，倒卵形或匙形，长1-5厘米，宽3-15毫米，顶端钝圆或略急尖，基部渐窄成柄，边缘有少数不明显的齿，两面均有2-3叉毛；茎生叶无柄，披针形，条形、长圆形或椭圆形，长5-15(-50)毫米，宽1-2(-10)毫米。花序为疏松的总状花序，结果时可伸长达20厘米；萼片长圆卵形，长约1.5毫米，顶端钝、外轮的基部成囊状，外面无毛或有少数单毛；花瓣白色，长圆条形，长2-3毫米，先端钝圆，基部线形。野生型拟南芥角果的果荚细长，角果长10-14毫米，宽不到1毫米，果瓣两端钝或钝圆，有1中脉与稀疏的网状脉，多为桔黄色或淡紫色；果梗伸展，长3-6毫米。种子每室1行，种子卵形、小、红褐色。花期4-6月。
2、拟南芥基因组中含有32个cle基因。随着研究的深入，发现cle多肽信号分子在植物生长发育的不同阶段发挥重要作用。对cle19基因的研究发现：拟南芥根部异位表达的cle19能够促进拟南芥根分生区干细胞分化，说明cle19信号分子参与调控根分生区发育过程，并且细胞内的信号组分clv2受体可以应答cle19。因此cle基因对于拟南芥植株性状的调控具有一定的研究意义。
技术实现思路<
1、有鉴于此，本专利技术提出了一种cle19基因在调控拟南芥角果饱满度的应用，以基因工程技术改造拟南芥纯合体植株，使拟南芥具有更饱满的角果表型。
2、为达上述目的，本专利技术的技术方案是这样实现的：
3、一种cle19基因在调控拟南芥角果饱满度的应用，采用转基因工程技术，将cle19基因导入拟南芥植株，导入的核苷酸序列如seq id no.1所示。
4、进一步的，所述应用的途径包括：将所述拟南芥cle19基因进行扩增；构建含有cle19基因的载体；将cle19基因导入拟南芥细胞，进行拟南芥遗传转化；培育被转化的拟南芥植株，收获拟南芥种子，进行多代育种，筛选t3代纯合体植株。
5、进一步的，cle19基因扩增采用pcr方法，上游引物的序列是5′-ccaagcttgcttacatctgcctccatcaac-3′，下游引物的序列是5′-cggaattcacgtgaccaggaaagaatactg-3′。
6、进一步的，所述载体采用双元植物农杆菌表达载体pbi121质粒。
7、进一步的，cle19基因导入的方法包括以下步骤：
8、剪去进入花期的拟南芥主苔，侧苔抽苔形成1-2个角果时，将角果及已完全开放的花蕾剪去，仅留下幼嫩花蕾；培养农杆菌，用转化介质重悬菌体至od600＝0.8；将拟南芥花序浸入含有农杆菌的转化介质，浸泡充分，侧卧放在容器中，避光保湿培养。
9、进一步的，多代育种的方法包括以下步骤：
10、将转化后的t1代种子消毒后播种在含有卡那霉素的培养基上，4℃避光放置2天，然后正常光照培养10天，筛选出拟南芥t1代抗性幼苗；移栽拟南芥t1代幼苗抗性植株，光照培养，收取t2代种子；将t2代种子培养，继续抗性筛选，选取单基因插入的转基因植株移栽；单株收取t3代种子培养进一步筛选纯合体。
11、本专利技术采用基因工程技术，将cle19基因导入拟南芥，进而培育纯合体植株，经过本专利技术的方法改造的拟南芥纯合体植株具有更饱满的角果表型，以及更低矮的植株高度。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种CLE19基因在调控拟南芥角果饱满度的应用，其特征在于，采用转基因工程技术，将CLE19基因导入拟南芥植株，导入的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.根据权利要求1所述的CLE19基因在调控拟南芥角果饱满度的应用，其特征在于，所述应用的途径包括：
3.根据权利要求1所述的CLE19基因在调控拟南芥角果饱满度的应用，其特征在于，CLE19基因扩增采用PCR方法，上游引物的序列是5′-CCAAGCTTGCTTACATCTGCCTCCATCAAC-3′，下游引物的序列是5′-CGGAATTCACGTGACCAGGAAAGAATACTG-3′。
4.根据权利要求1所述的CLE19基因在调控拟南芥角果饱满度的应用，其特征在于，所述载体采用双元植物农杆菌表达载体pBI121质粒。
5.根据权利要求1所述的CLE19基因在调控拟南芥角果饱满度的应用，其特征在于CLE19基因导入的方法包括以下步骤：
6.一种权利要求1-5任一所述的CLE19基因在调控拟南芥角果饱满度的应用，其特征在于，多代育种的方法包括以下步骤：p>...
【技术特征摘要】
1.一种cle19基因在调控拟南芥角果饱满度的应用，其特征在于，采用转基因工程技术，将cle19基因导入拟南芥植株，导入的核苷酸序列如seq id no.1所示。
2.根据权利要求1所述的cle19基因在调控拟南芥角果饱满度的应用，其特征在于，所述应用的途径包括：
3.根据权利要求1所述的cle19基因在调控拟南芥角果饱满度的应用，其特征在于，cle19基因扩增采用pcr方法，上游引物的序列是5′-ccaagcttgcttacatctgcctccatcaac-3′，下...
【专利技术属性】
技术研发人员：高丽，
申请(专利权)人：河北化工医药职业技术学院，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。