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葡萄类受体蛋白激酶HERK1的新用途制造技术

技术编号:39997926 阅读:6 留言:0更新日期:2024-01-09 02:57
本发明专利技术涉及一种葡萄类受体蛋白激酶的新用途。本发明专利技术所述的葡萄类受体蛋白激酶HERK1(VvHERK1)、编码该VvHERK1的编码基因、含有前述编码基因的重组表达载体可以抑制葡萄卷叶伴随病毒2号(GLRaV‑2)基因组的复制。本发明专利技术分别通过在葡萄愈伤组织和组培苗中用农杆菌介导法共转化能表达葡萄类受体蛋白激酶HERK1(VvHERK1)的质粒和GLRaV‑2侵染性cDNA克隆,发现过表达VvHERK1可将GLRaV‑2的RNA和蛋白水平均降低约50%,这表明过表达VvHERK1可极有效抑制GLRaV‑2基因组复制,可以有效防治葡萄卷叶病,同时有利于葡萄的分子育种。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及植物基因工程,具体说是一种葡萄类受体蛋白激酶herk1的新用途


技术介绍

1、葡萄是我国重要的栽培物种,据统计,2019年我国葡萄种植面积高达1062万亩左右。而葡萄也是感染病毒最多的果树树种之一,在生产中发生严重的葡萄病毒病主要有葡萄卷叶病、扇叶病和栓皮综合症,其中葡萄卷叶病是世界范围内发生最普遍、危害最严重的葡萄病毒病害(naidu r a,maree h j,burger j t.grapevine leafroll disease andassociated viruses:a unique pathosystem.annual review of phytopathology,2015,53:613-634),在我国的发生率更是高达80-90%(liu m h,li mj,qi h h,etal.occurrence of grapevine leafroll-associated viruses in china.plantdisease,2013,97:1339-1345)。该病可造成葡萄产量减少30-40%左右,葡萄果粒大小不等、着色差、且可溶性固形物含量显著降低,严重影响葡萄产量和品质(song y,hanner rh,meng b.probing into the effects of grapevine leafroll-associated viruses onthe physiology,fruit quality and gene expression of grapes.viruses,2021,13:593)。目前,葡萄卷叶病已成为制约我国葡萄产业发展的关键因素。已知有6种葡萄卷叶伴随病毒(glravs)与该病相关,而葡萄卷叶伴随病毒2号(glrav-2)是与葡萄卷叶病相关最重要的病原物之一(song y,hanner r h,meng b.probing into the effects of grapevineleafroll-associated viruses on the physiology,fruit quality and geneexpression of grapes.viruses,2021,13:593)。此外,glrav-2侵染也与葡萄嫁接不亲和综合症的发生有关(meng b,martelli gp,golino da,et al.grapevine viruses:molecular biology,diagnostics and management||grapevine leafroll-associatedvirus 2.2017,10.1007/978-3-319-57706-7:141-165)。与其它植物病毒病害一样,葡萄植株一旦被glravs等病毒入侵,则难以用化学药剂防治。因此鉴定葡萄植物在抗glravs防卫反应中起重要作用的蛋白,可拓宽对葡萄卷叶病的防控途径,并为最终通过转基因技术获得抗glravs葡萄新种质提供重要的理论依据和试验材料。

2、在病毒入侵时,植物会采取多种防御途径如促分裂原活化激酶(mitogen-activated protein kinase,mapk)级联信号途径(hu t,huang c,hey,et al.βc1 proteinencoded in geminivirus satellite concertedly targets mkk2 and mpk4 to counterhost defense.plos pathogen,2019,15:e1007728)及sa、ja等介导的信号传导途径(alazem m,lin n s.roles of plant hormones in the regulation of host virrusinteractions.molecular plant pathology,2015,16:529-540)来抵抗病毒侵染。目前已知植物类受体蛋白激酶(receptor-like kinase,rlk)在其中起着极其关键的作用(antolin-overa m,ried m,binder a,et al.receptor kinase signaling pathways inplant-microbe interactions.annual review of phytopathology,2012,50:451-473)。

3、rlk是一类跨膜蛋白激酶家族,是蛋白激酶中的重要一类,也是信号分子的重要受体,能够感受外界刺激,从而在信号转导过程中起着重要作用。植物遭受病原物入侵时,rlk的胞外结构域识别细胞外的病原信号分子后将信号传递到胞内,其胞内激酶结构域随后通过磷酸化将信号传导到下游蛋白,从而启动一系列下游信号转导途径,如mapk、sa、ja等信号通路,最终诱导植物抗病防卫基因如病程相关蛋白基因、防御素基因等的表达。目前已发现有几种rlks如bak1、bam1和nik1在植物抗病毒防卫反应起十分重要的作用。如植物在遭受病毒入侵时可以通过bak1激发植物病原相关分子模式(pti)防御机制(c j,klauser d,niehl a,et al.the immunity regulator bak1 contributes to resistanceagainst diverse rna viruses.molecular plant-microbe interaction,2013,26:1271-1280)。bam1通过促进rna沉默信号在细胞间移动而在植物抗病毒防卫反应中起重要作用(rosas-diaz t,zhang d,fan p,et al.a virus-targeted plant receptor-like kinasepromotes cell-to-cell spread of rnai.pnas.2018,115:1388-1393)。此外,nki1也介导植物抗病毒信号途径(carvalho c,santos a,pires s,et al.regulated nucleartrafficking of rpl10amediated by nik1represents a defense strategy of plantcells against viruses.plos pathogen,2008,4:e1000247)。但目前尚不清楚其它众多rlk家族成员在病毒侵染时的功能。


技术实现思路

1、针对现有技术中存在的缺陷,本专利技术的目的在于提供一种葡萄类受体蛋白激酶herk1的新用途。本专利技术分别通过在葡萄愈伤组织和组培苗中用农杆菌介导法共转化能表达葡萄类受体蛋白激酶herk1(vvherk1)的质粒和glrav-2侵染性cdna克隆,发现过表达vvherk1可极有效抑制glrav-2基因组复制,有利于防治葡萄卷叶病和葡萄的分子育种。

2、为达到以上目的,本专利技术采取的技术方案是:

3、葡萄本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.葡萄类受体蛋白激酶HERK1的新用途,其特征在于,所述葡萄类受体蛋白激酶HERK1可以抑制GLRaV-2基因组的复制,上述葡萄类受体蛋白激酶HERK1的序列如SEQ ID NO:1所示。

2.编码如权利要求1所述的葡萄类受体蛋白激酶HERK1的编码基因的应用,其特征在于:所述编码基因通过其编码的葡萄类受体蛋白激酶HERK1可以抑制GLRaV-2基因组的复制,上述编码基因的序列如SEQ ID NO:2所示。

3.含有如权利要求2所述的编码基因的重组表达载体的应用,其特征在于:所述重组表达载体上包含的编码基因通过其编码的葡萄类受体蛋白激酶HERK1可以抑制苹果茎沟病毒基因组的复制;

【技术特征摘要】

1.葡萄类受体蛋白激酶herk1的新用途,其特征在于,所述葡萄类受体蛋白激酶herk1可以抑制glrav-2基因组的复制,上述葡萄类受体蛋白激酶herk1的序列如seq id no:1所示。

2.编码如权利要求1所述的葡萄类受体蛋白激酶herk1的编码基因的应用,其特征在于:所述编码基因通过其...

【专利技术属性】
技术研发人员:程玉琴王金英谢印帅刘灿
申请(专利权)人:中国农业大学
类型:发明
国别省市:

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