【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及植物繁殖，具体而言涉及一种鹿葱石蒜的组织培养方法。
技术介绍
1、石蒜属(lycoris herb)是世界公认的著名球根花卉，被誉为“中国郁金香”。它是一类具地下鳞茎的多年生草本植物，具有丰富的花型与色彩。本属全世界共有20个种。我国石蒜属植物有15种，占全球总数的四分之三。石蒜通常用分球、鳞茎基底切割和组织培养等方法繁殖，分球和鳞茎基底切割方法简单易行，但繁殖系数不高、速度慢，很难满足近年来对石蒜种球的大量需求，因此，通过组织培养快速繁殖是获得大量石蒜种球的有效途径。
2、目前对石蒜属植物的组织培养研究已有较多报道。如申请号为201910275458.0的专利技术专利中公开了一种香石蒜组织培养方法，(1)将灭菌处理后的香石蒜鳞茎接种到丛生芽诱导培养基中进行诱导培养，得到第一小鳞茎；(2)将第一小鳞茎接种到愈伤诱导培养基上进行诱导愈伤培养，得到愈伤团块；(3)将愈伤团块接种到愈伤分化培养基上进行分化培养，得到第二小鳞茎；(4)将第二小鳞茎接种到壮芽生根培养基上进行壮芽生根培养。又如申请号为200810121013.9的专利技术专利中公开了一种红蓝石蒜的组织培养和快速繁殖技术的方法，步骤如下：1)、培养基的配制；包括基本培养基和组培各阶段培养基的各组分与每升所含重量为：基本培养基：ms或1/2ms，其中蔗糖20～40g/l，琼脂8g/l，ph5.8；诱导培养基：ms+tdz0.2～1.0mg/l+活性炭2g/l；增殖培养基：ms+6-ba3～7mg/l+naa0.5～2.5mg/l；壮苗培养基：ms+6-
3、但由于种间差异大，在愈伤诱导和分化阶段所用植物激素种类和浓度会直接影响到组织培养的成败和繁殖系数。鹿葱为其中一种石蒜属植物，在自然状态下，鹿葱结籽少，且发芽率极低；建立完善的不同种的组织培养快繁体系对高效获得大量石蒜属植物非常重要。
技术实现思路
1、针对现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种鹿葱石蒜的组织培养方法，在鹿葱石蒜苗的外植体诱导培养、增殖培养、壮苗培养、生根培养时采用不同的培养基进行培养，满足各个时期的营养和激素需求；让鹿葱石蒜芽更好的生长，避免发生鹿葱石蒜玻璃化、变异、难生根的现象。
2、本专利技术解决技术问题所采用的技术方案是：一种鹿葱石蒜的组织培养方法，所述组织培养方法具体包括，鹿葱石蒜外植体的采集、鹿葱石蒜外植体的前处理、鹿葱石蒜外植体的消毒、鹿葱石蒜外植体的诱导培养、鹿葱石蒜芽的增殖培养、鹿葱石蒜芽的壮苗培养、鹿葱石蒜苗的生根培养；
3、所述鹿葱石蒜外植体采集后，洗净后于4℃下冷藏一周，然后取出进行消毒处理，再进行鹿葱石蒜外植体的前处理；所述诱导培养采用的诱导培养基由1/3ms+6-ba 3～8mg/l+naa 1mg/l+ad 8mg/l+糖20g/l+琼脂7g/l+酸解酪蛋白1g/l+椰汁100ml/l组成，每瓶接种1个外植体；所述增殖培养采用的增殖培养基由1/3ms+6-ba 1～5mg/l+naa 0.5mg/l+ad5mg/l+糖20g/l+琼脂7g/l+酸解酪蛋白1g/l+椰汁100ml/l组成，每瓶接种1个鳞块；所述壮苗培养采用的壮苗培养基由ms+6-ba 0.1～0.5mg/l+naa 0.1～0.5mg/l+kt 0.5mg/l+糖20g/l+琼脂7g/l+酸解酪蛋白1g/l组成，每瓶接种2～4个单芽；所述生根培养采用的生根培养基由1/3ms+naa 0.2～1mg/l+糖20g/l+琼脂7g/l+酸解酪蛋白1g/l组成，每瓶接种5～8棵苗。
4、进一步地，所述诱导培养基由1/3ms+6-ba 8mg/l+naa 1mg/l+ad 8mg/l+糖20g/l+琼脂7g/l+酸解酪蛋白1g/l+椰汁100ml/l组成；所述增殖培养基由1/3ms+6-ba 5mg/l+naa0.5mg/l+ad 5mg/l+糖20g/l+琼脂7g/l+酸解酪蛋白1g/l+椰汁100ml/l组成；所述壮苗培养基由ms+6-ba 0.5mg/l+naa 0.5mg/l+kt 0.5mg/l+糖20g/l+琼脂7g/l+酸解酪蛋白1g/l组成；所述生根培养基由1/3ms+naa 1mg/l+糖20g/l+琼脂7g/l+酸解酪蛋白1g/l组成。
5、进一步地，所述鹿葱石蒜外植体的采集包括，挑选无病虫害的优良种球做好标记，用75％的酒精消毒过的修枝剪将其茎段以上、根部以下剪去，剥去其黑色表皮，洗净后放置于4℃下冷藏一段时间。
6、进一步地，所述鹿葱石蒜外植体的前处理包括，将冷藏后的鹿葱石蒜取出，将所述鹿葱石蒜顶端往下的三分之一处用刀片切除，剩余三分之二根部朝下垂直摆放后，将其均匀切成四瓣放入量杯中；在量杯中加入一滴洗洁精并倒入三分之二的纯净水搅拌15min，搅拌完成后将其全部放入超声波清洗机中清洗25min，清洗完毕将所述鹿葱石蒜再次倒入量杯内并盖好纱布放置于流水下冲洗1h。
7、进一步地，所述鹿葱石蒜外植体的消毒包括，将前处理后的鹿葱石蒜外植体转移至超净工作台上；将所述鹿葱石蒜外植体置入无菌瓶内，用75％的酒精摇晃消毒1min，然后倒掉酒精并用无菌水浸洗3～5次，每次1min；然后倒入2％的naclo溶液并加入3～5滴吐温84不断摇晃消毒30～40分钟，使外植体与消毒液充分接触以达到消毒效果，减少污染率。
8、进一步地，所述鹿葱石蒜外植体的诱导培养包括，将消毒后的鹿葱石蒜外植体置于无菌接种盘中，将外植体周边漂白的部分切掉，并将外植体切割成3～4公分的小鳞块，然后接种在含有初代诱导培养基的培养瓶中，ph调至5.6～5.8之间；将接种好的培养瓶放在培养架上暗培养7天，7天后打开灯光，灯源采用冷光源，光照强度为2000lx～3000lx，光照时间为16小时，温度为25～28℃，培养30天后外植体慢慢萌发出芽。
9、进一步地，所述鹿葱石蒜芽的增殖培养包括，将诱导培养产生的单芽、丛生芽从鳞块上切割下来，将单芽分割成两瓣、丛生芽刺破其生长点；将切好的单芽、丛生芽接种至增殖培养基中，ph调至5.6～5.8之间，光照强度为2000lx～3000lx，光照时间为16小时，温度为25～28℃；所述单芽、丛生芽接种到增殖培养基中30天左右会长出2～4颗芽。
10、进一步地，所述鹿葱石蒜芽的壮苗培养包括，将增殖培养基中新长出的壮硕单芽切割成两瓣，接种在增殖培养基上继续增殖，增殖单芽生长一个月后，继续进行壮苗、生本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种鹿葱石蒜的组织培养方法，其特征在于：所述组织培养方法具体包括，鹿葱石蒜外植体的采集、鹿葱石蒜外植体的前处理、鹿葱石蒜外植体的消毒、鹿葱石蒜外植体的诱导培养、鹿葱石蒜芽的增殖培养、鹿葱石蒜芽的壮苗培养、鹿葱石蒜苗的生根培养；
2.如权利要求1所述的一种鹿葱石蒜的组织培养方法，其特征在于：所述诱导培养基由1/3MS+6-ba 8mg/L+NAA 1mg/L+AD 8mg/L+糖20g/L+琼脂7g/L+酸解酪蛋白1g/L+椰汁100ml/L组成；所述增殖培养基由1/3MS+6-ba5mg/L+NAA 0.5mg/L+AD 5mg/L+糖20g/L+琼脂7g/L+酸解酪蛋白1g/L+椰汁100ml/L组成；所述壮苗培养基由MS+6-ba 0.5mg/L+NAA0.5mg/L+KT 0.5mg/L+糖20g/L+琼脂7g/L+酸解酪蛋白1g/L组成；所述生根培养基由1/3MS+NAA 1mg/L+糖20g/L+琼脂7g/L+酸解酪蛋白1g/L组成。
3.如权利要求1所述的一种鹿葱石蒜的组织培养方法，其特征在于：所述鹿葱石蒜外植体的采集包括，挑选无病虫害的优
4.如权利要求1所述的一种鹿葱石蒜的组织培养方法，其特征在于：所述鹿葱石蒜外植体的前处理包括，将冷藏后的鹿葱石蒜取出，将所述鹿葱石蒜顶端往下的三分之一处用刀片切除，剩余三分之二根部朝下垂直摆放后，将其均匀切成四瓣放入量杯中；在量杯中加入一滴洗洁精并倒入三分之二的纯净水搅拌15min，搅拌完成后将其全部放入超声波清洗机中清洗25min，清洗完毕将所述鹿葱石蒜再次倒入量杯内并盖好纱布放置于流水下冲洗1h。
5.如权利要求1所述的一种鹿葱石蒜的组织培养方法，其特征在于：所述鹿葱石蒜外植体的消毒包括，将前处理后的鹿葱石蒜外植体转移至超净工作台上；将所述鹿葱石蒜外植体置入无菌瓶内，用75％的酒精摇晃消毒1min，然后倒掉酒精并用无菌水浸洗3～5次，每次1min；然后倒入2％的NaClO溶液并加入3～5滴吐温84不断摇晃消毒30～40分钟，使外植体与消毒液充分接触以达到消毒效果，减少污染率。
6.如权利要求1所述的一种鹿葱石蒜的组织培养方法，其特征在于：所述鹿葱石蒜外植体的诱导培养包括，将消毒后的鹿葱石蒜外植体置于无菌接种盘中，将外植体周边漂白的部分切掉，并将外植体切割成3～4公分的小鳞块，然后接种在含有初代诱导培养基的培养瓶中，pH调至5.6～5.8之间；将接种好的培养瓶放在培养架上暗培养7天，7天后打开灯光，灯源采用冷光源，光照强度为2000lx～3000lx，光照时间为16小时，温度为25～28℃，培养30天后外植体慢慢萌发出芽。
7.如权利要求1所述的一种鹿葱石蒜的组织培养方法，其特征在于：所述鹿葱石蒜芽的增殖培养包括，将诱导培养产生的单芽、丛生芽从鳞块上切割下来，将单芽分割成两瓣、丛生芽刺破其生长点；将切好的单芽、丛生芽接种至增殖培养基中，pH调至5.6～5.8之间，光照强度为2000lx～3000lx，光照时间为16小时，温度为25～28℃；所述单芽、丛生芽接种到增殖培养基中30天左右会长出2～4颗芽。
8.如权利要求1所述的一种鹿葱石蒜的组织培养方法，其特征在于：所述鹿葱石蒜芽的壮苗培养包括，将增殖培养基中新长出的壮硕单芽切割成两瓣，接种在增殖培养基上继续增殖；将瘦弱的单芽、丛生芽接种至壮苗培养基中，pH调至5.6～5.8之间，光照强度为2000lx～3000lx，光照时间为16小时，温度为25～28℃；30天之后，所述瘦弱的单芽、丛生芽抽长2～3片叶片且基部膨大成球，即从瘦弱的芽长成球径壮硕的组培苗。
9.如权利要求1所述的一种鹿葱石蒜的组织培养方法，其特征在于：所述鹿葱石蒜芽的生根培养包括，将壮苗培养基内球径壮硕的组培苗接种至生根培养基中，pH调至5.6～5.8之间，光照强度为2000lx～3000lx，光照时间为16小时，温度为25～28℃，30天之后长出3条以上的根，大棚训化成活率达80％以上。
...【技术特征摘要】
1.一种鹿葱石蒜的组织培养方法，其特征在于：所述组织培养方法具体包括，鹿葱石蒜外植体的采集、鹿葱石蒜外植体的前处理、鹿葱石蒜外植体的消毒、鹿葱石蒜外植体的诱导培养、鹿葱石蒜芽的增殖培养、鹿葱石蒜芽的壮苗培养、鹿葱石蒜苗的生根培养；
2.如权利要求1所述的一种鹿葱石蒜的组织培养方法，其特征在于：所述诱导培养基由1/3ms+6-ba 8mg/l+naa 1mg/l+ad 8mg/l+糖20g/l+琼脂7g/l+酸解酪蛋白1g/l+椰汁100ml/l组成；所述增殖培养基由1/3ms+6-ba5mg/l+naa 0.5mg/l+ad 5mg/l+糖20g/l+琼脂7g/l+酸解酪蛋白1g/l+椰汁100ml/l组成；所述壮苗培养基由ms+6-ba 0.5mg/l+naa0.5mg/l+kt 0.5mg/l+糖20g/l+琼脂7g/l+酸解酪蛋白1g/l组成；所述生根培养基由1/3ms+naa 1mg/l+糖20g/l+琼脂7g/l+酸解酪蛋白1g/l组成。
3.如权利要求1所述的一种鹿葱石蒜的组织培养方法，其特征在于：所述鹿葱石蒜外植体的采集包括，挑选无病虫害的优良种球做好标记，用75％的酒精消毒过的修枝剪将其茎段以上、根部以下剪去，剥去其黑色表皮，洗净后放置于4℃下冷藏一段时间。
4.如权利要求1所述的一种鹿葱石蒜的组织培养方法，其特征在于：所述鹿葱石蒜外植体的前处理包括，将冷藏后的鹿葱石蒜取出，将所述鹿葱石蒜顶端往下的三分之一处用刀片切除，剩余三分之二根部朝下垂直摆放后，将其均匀切成四瓣放入量杯中；在量杯中加入一滴洗洁精并倒入三分之二的纯净水搅拌15min，搅拌完成后将其全部放入超声波清洗机中清洗25min，清洗完毕将所述鹿葱石蒜再次倒入量杯内并盖好纱布放置于流水下冲洗1h。
5.如权利要求1所述的一种鹿葱石蒜的组织培养方法，其特征在于：所述鹿葱石蒜外植体的消毒包括，将前处理后的鹿葱石蒜外植体转移至超净工作台上；将所述鹿葱石蒜外植体置入无菌瓶内，用75％的酒精摇晃消毒1min，然后倒掉酒精并用无...
【专利技术属性】
技术研发人员：饶婉蓉，吴奕鹏，董绍胜，金盛祥，周小安，严萍，万小建，
申请(专利权)人：德兴市荣兴苗木有限责任公司，
类型：发明
国别省市：
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