【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于肿瘤标志物，具体涉及一种免疫相关性肺炎的血清多肽标志物serpina5及其应用和检测试剂盒。
技术介绍
1、据世界卫生组织报告，肿瘤是全球第二大死因，恶性肿瘤一直是人类重大疾病负担。自从2011年首个ctla-4抗体——伊匹木单抗被批准用于恶性黑色素瘤的治疗后，肿瘤免疫治疗领域迎来了一次又一次伟大复兴(nat rev drug discov,2016,15:235-247.)。近年来，多项药物临床试验已在全球广泛开展，并显示出了巨大的抗肿瘤效力。以pd-1/pd-l1抑制剂为代表的免疫检查点抑制剂(icis)已在非小细胞肺癌(n engl j med,2018,379:2040-2051.)、恶性黑色素瘤(n engl j med,2017,377:1345-1356.)等多种肿瘤中被广泛应用，取得了令人满意的疗效，开创了抗肿瘤治疗新纪元。然而，在icis治疗的长期获益之外，也出现了一系列难以避免的不良反应，严重的免疫相关性不良反应极大地阻碍免疫治疗的临床应用。
2、免疫相关性肺炎(checkpoint immune pneumonitis，cip)是其中一种最常见的致死性最高的不良反应之一(jama oncol,2016,2:1346-1353.)。既往报道文献及申请人前期研究显示，cip的发病率可达10％-20％(j thorac oncol,2018,13:1930-1939.)，重症cip的病死率高达14％-35％(jama oncol,2018,4:1721-1728.)，严重的cip会对患者
3、目前，cip的临床诊断主要依靠影像学检查，但cip影像学改变滞后、复杂、特异性差，难以早期发现，也难以与其他呼吸道疾病进行鉴别，极易出现漏诊可能，增加了发展成为重症cip的风险。因此，早期筛选cip高危患者，积极探索特异性更高的、预测效能更强的全新途径变得迫在眉睫，这对于降低cip的发病率和病死率，提升免疫治疗安全性是至关重要的。作为研究热点与难点问题，多项研究试图探索cip的危险因素和生物标志物。既往研究表明，联合治疗，尤其是pd-1/l1抑制剂联合ctla-4抑制剂的治疗方案，更易发生cip(jamaoncol,2018,4:1721-1728.)。另外，高龄、吸烟也被认为是增加cip发生风险的危险因素(j thorac oncol,2018,13:1930-1939；j thorac oncol,2018,13:1138-1145.)。ryotashibaki等人发现男性、吸烟、既往存在间质性肺疾病、肺气肿的患者也被认为是cip发生的高危人群(cancer immunol immunother,2020,69:15-22.)。在血液学指标中，来自我国上海肺科医院的苏春霞教授团队发现，治疗期间，基线时绝对嗜酸性粒细胞计数的增加高度警示了cip发生风险(lung cancer,2020,150:76-82.)。类似地，ryosuke matsukane等人发现，在发生cip期间，可反应全身炎症状况的中性粒细胞-淋巴细胞比率出现了显著增加。(sci rep,2021,11:1324.)。虽然，上述研究结果可以在一定程度上预测cip的发生，但其识别cip的roc曲线下面积大多低于0.8(lung cancer,2020,150:76-82.；clin lung cancer,2019,20:442-450.e4.)，存在单一维度的预测特异性差、稳定性低的缺点，且目前的cip预测性标志物的研究仅限于临床特征和非特异性血液学指标，无法实现“精准预测”的目标，因此亟需开发新的准确性高、特异性强的生物标志物。近年来飞速发展的蛋白质谱分析技术，凭借其高分辨率、高准确度和高敏感性的巨大优势，将基于蛋白组学的临床血浆生物标志物筛查推上了舞台，正在成为精准医学新的发展趋势。这说明针对蛋白组学的质谱分析有望成为全面筛选与cip发生密切相关的血清生物标志物，从而实现预测cip发生的全新诊疗手段。
4、但是，目前尚无任何基于蛋白组学质谱分析技术获得高特异性的预测cip发生的生物标志物的研究报道。
技术实现思路
1、为了克服上述现有技术的缺点，本专利技术的目的在于提供一种免疫相关性肺炎的血清多肽标志物serpina5及其应用和检测试剂盒。
2、为了达到上述目的，本专利技术采用以下技术方案予以实现：
3、本专利技术提供了一种通过血清蛋白组学质谱分析技术获得的可预测cip发生的特异性预测蛋白，即为免疫相关性肺炎(cip)的血清多肽标志物serpina5，其氨基酸序列为：r.sarlnsqrlvfnrpflmfivdnnilflgkvnrp.-(人血浆丝氨酸蛋白酶抑制剂，serpina5)，具体序列如seq id no:1所示。
4、优选地，利用“铜离子型”磁珠试剂盒(imac-cu)提取血清蛋白，后用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术(maldi-tof-ms)进行一级质谱分析，获得患者血清中的蛋白多肽峰，并进行统计分析，获得实验组和对照组之间差异明显的蛋白多肽峰。之后对所筛选出来的差异蛋白多肽峰进行二级蛋白质谱鉴定，以明确其对应的蛋白质。最终经鉴定，m/z:3901.24道尔顿的肽段对应的是serpina5蛋白，其在实验组和对照组之间具有极显著差异(p＜0.001)，即所述血清多肽标志物serpina5的精确分子量为3901.24道尔顿。
5、本专利技术还公开了上述的免疫相关性肺炎的血清多肽标志物serpina5在制备免疫相关性肺炎血清诊断试剂/试剂盒中的应用。
6、优选地，血清多肽标志物serpina5在血清中的检测参数为625.36～807.75pg/ml。
7、优选地，所述免疫相关性肺炎血清诊断试剂/试剂盒为通过elisa检测免疫相关性肺炎的血清诊断试剂/试剂盒。
8、优选地，酶联免疫吸附反应(elisa)定量验证：利用elisa方法定量检测验证集中实验组和对照组serpina5蛋白的表达量，最终发现，serpina5蛋白在cip患者中高表达，在实验组和对照组中存在极显著差异(p＜0.001)，血清多肽标志物serpina5在血清中的检测最佳截断值为642.27pg/ml，对应的auc为0.908，p＜0.0001。
9、本专利技术还公开了与上述的免疫相关性肺炎的血清多肽标志物serpina5相结合的分子在制备免疫相关性肺炎血清诊断试剂/试剂盒中的应用。
10、本专利技术还公开了一种免疫相关性肺炎的血清诊断试剂，该血清诊断试剂中包含上述的免疫相关性肺炎的血清多肽标志物serpina5，或者包括与上述的免疫相关性肺炎的血清多肽标志物serpina5相结合的分子。
11、本专利技术还公开了一种预测免疫相关性肺炎的试剂盒，该试剂盒中包含权利要求1所述的免疫相关性肺炎的血清多本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种免疫相关性肺炎的血清多肽标志物SERPINA5，其特征在于，其氨基酸序列如SEQID NO:1所示。
2.根据权利要求1所述的免疫相关性肺炎的血清多肽标志物SERPINA5，其特征在于，所述血清多肽标志物SERPINA5的精确分子量为3901.24道尔顿。
3.权利要求1或2所述的免疫相关性肺炎的血清多肽标志物SERPINA5在制备免疫相关性肺炎血清诊断试剂/试剂盒中的应用。
4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，血清多肽标志物SERPINA5在血清中的检测参数为625.36～807.75pg/mL。
5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，血清多肽标志物SERPINA5在血清中的检测最佳截断值为642.27pg/mL，对应的AUC为0.908，p＜0.0001。
6.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述免疫相关性肺炎血清诊断试剂/试剂盒为通过ELISA检测免疫相关性肺炎的血清诊断试剂/试剂盒。
7.如权利要求6所述的应用，其特征在于，利用ELISA方法定量检测SERPINA5蛋白的表达量，SE
8.与权利要求1所述的免疫相关性肺炎的血清多肽标志物SERPINA5相结合的分子在制备免疫相关性肺炎血清诊断试剂/试剂盒中的应用。
9.一种免疫相关性肺炎的血清诊断试剂，其特征在于，该血清诊断试剂中包含权利要求1所述的免疫相关性肺炎的血清多肽标志物SERPINA5，或者包括与权利要求1所述的免疫相关性肺炎的血清多肽标志物SERPINA5相结合的分子。
10.一种预测免疫相关性肺炎的试剂盒，其特征在于，该试剂盒中包含权利要求1所述的免疫相关性肺炎的血清多肽标志物SERPINA5，或者包括与权利要求1所述的免疫相关性肺炎的血清多肽标志物SERPINA5相结合的分子。
...【技术特征摘要】
1.一种免疫相关性肺炎的血清多肽标志物serpina5，其特征在于，其氨基酸序列如seqid no:1所示。
2.根据权利要求1所述的免疫相关性肺炎的血清多肽标志物serpina5，其特征在于，所述血清多肽标志物serpina5的精确分子量为3901.24道尔顿。
3.权利要求1或2所述的免疫相关性肺炎的血清多肽标志物serpina5在制备免疫相关性肺炎血清诊断试剂/试剂盒中的应用。
4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，血清多肽标志物serpina5在血清中的检测参数为625.36～807.75pg/ml。
5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，血清多肽标志物serpina5在血清中的检测最佳截断值为642.27pg/ml，对应的auc为0.908，p＜0.0001。
6.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述免疫相关性肺炎血清诊断试剂/试剂盒为通过...
【专利技术属性】
技术研发人员：姜丽丽，贾晓慧，焦敏，郭卉，王文娟，刘梦洁，李彦霖，张雅娟，张师容，李文元，付小岚，徐龙文，耿璐莹，姜盼盼，毛子扬，于鑫，
申请(专利权)人：西安交通大学，
类型：发明
国别省市：
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