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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物培养,具体涉及一种促进长裙竹荪孢子萌发的培养基及其萌发方法。
技术介绍
1、全球已报道的竹荪共有12种,我国分布有7种,能够规模化栽培的有3种,分别为长裙竹荪、红托竹荪和棘托竹荪,其主产区分别为四川长宁、贵州织金和福建古田。其中,长裙竹荪(dictyophora indusiata)隶属于担子菌亚门(basidiomycotina)腹菌纲(gasteromycetes)鬼笔目(phallales)鬼笔科(phallaceae)竹荪属(dictyophora),是竹荪属的模式物种,属于四极性异宗结合食用菌。
2、食用菌育种技术主要包括:野生食用菌驯化育种、杂交育种、辐射诱变育种、原生质体融合育种以及基因工程育种。其中,杂交育种是现代生物育种技术应用最广泛且成效较好的一种方法。近年来很多学者开展了香菇、草菇、双孢蘑菇、平菇、羊肚菌等食药用真菌的杂交选育工作,并利用孢子杂交技术选育出许多优良新品种。
3、目前,竹荪人工栽培菌种主要来源于野生驯化,还没有通过孢子杂交选育而来的品种。竹荪菌种退化、产量不稳定等问题日益突出,严重制约了竹荪产业的可持续发展。对竹荪的研究主要集中在其栽培方法与模式、活性物质的提取与应用等方面,而对其遗传背景研究以及育种技术等方面的文献报道较少。虽然专利申请cn202110169309.3公开了一种红托竹荪孢子的萌发培养基及其分离纯化方法,但是红托竹荪孢子在25℃下培养50d才萌发。竹荪孢子萌发慢且萌发率低是当前竹荪遗传育种研究面临的难题。因此,促进竹荪孢子的萌发,缩短萌
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种促进长裙竹荪孢子萌发的培养基及其萌发方法,解决现有技术中竹荪孢子萌发慢且萌发率低的技术问题。
2、本专利技术公开了一种促进长裙竹荪孢子萌发培养基,每100ml水中以重量百分比计包括如下组分:土豆10~20%,葡萄糖1~2%,蛋白胨0.3~0.5%,黄豆粉0.3~0.5%,磷酸二氢钾0.05~0.2%,硫酸镁0.05~0.1%,琼脂1.5~2%。
3、进一步的,每100ml水中以重量百分比计包括如下组分:土豆20%,葡萄糖2%,蛋白胨0.5%,黄豆粉0.5%,磷酸二氢钾0.1%,硫酸镁0.05%,琼脂2%。
4、进一步的,每100ml水中以重量百分比计包括如下组分:土豆10%,葡萄糖1%,蛋白胨0.3%,黄豆粉0.3%,磷酸二氢钾0.05%,硫酸镁0.05%,琼脂1.5%。
5、一种促进长裙竹荪孢子萌发的方法,使用上述培养基来完成。
6、进一步的,具体包括如下步骤:
7、(1)取样:选择发育成熟的长裙竹荪蛋,在竹荪蛋表皮未破损前,取出位于菌盖的孢子;
8、(2)预处理:将孢子冷藏处理;
9、(3)重悬:用无菌生理盐水将孢子重悬得到孢子液;
10、(4)离心:将孢子液离心,去除上清液,然后用无菌生理盐水将孢子沉淀重悬。
11、(5)稀释:用无菌生理盐水将沉淀重悬后的孢子液进行梯度稀释。
12、(6)培养:吸取稀释后的孢子液,均匀涂布在培养基中黑暗培养。
13、进一步的,步骤(2)所述冷藏处理为在4℃放置1天。
14、进一步的,步骤(3)所述孢子与所述无菌生理盐水的用量为每0.1g孢子加入1ml无菌生理盐水。
15、进一步的,步骤(4)中所述离心为在10000×g离心力下离心1min。
16、进一步的,步骤(5)中将重悬后的孢子液稀释到稀释度为10-4。
17、进一步的,步骤(6)中所述黑暗培养的温度为24℃。
18、与现有技术相比,本专利技术具有的有益效果是:
19、1.本专利技术能够获得促进长裙竹荪孢子萌发的培养基,将萌发时间从35±5天缩短至20±5天,能有效分离获取竹荪单孢子,为后续长裙竹荪的遗传育种研究提供了技术基础。
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1.一种促进长裙竹荪孢子萌发培养基,其特征在于:每100mL水中以重量百分比计包括如下组分:土豆10~20%,葡萄糖1~2%,蛋白胨0.3~0.5%,黄豆粉0.3~0.5%,磷酸二氢钾0.05~0.2%,硫酸镁0.05~0.1%,琼脂1.5~2%。
2.根据权利要求1所述的一种促进长裙竹荪孢子萌发培养基,其特征在于:每100mL水中以重量百分比计包括如下组分:土豆20%,葡萄糖2%,蛋白胨0.5%,黄豆粉0.5%,磷酸二氢钾0.1%,硫酸镁0.05%,琼脂2%。
3.根据权利要求1所述的一种促进长裙竹荪孢子萌发培养基,其特征在于:每100mL水中以重量百分比计包括如下组分:土豆10%,葡萄糖1%,蛋白胨0.3%,黄豆粉0.3%,磷酸二氢钾0.05%,硫酸镁0.05%,琼脂1.5%。
4.一种促进长裙竹荪孢子萌发的方法,其特征在于:使用权利要求1-3任一项所述培养基来完成。
5.根据权利要求4所述的一种促进长裙竹荪孢子萌发的方法,其特征在于:具体包括如下步骤:
6.根据权利要求4所述的一种促进长裙竹荪孢子萌发的方法,其特征
7.根据权利要求4所述的一种促进长裙竹荪孢子萌发的方法,其特征在于:步骤(3)中所述孢子与所述无菌生理盐水的用量为每0.1g孢子加入1mL无菌生理盐水。
8.根据权利要求4所述的一种促进长裙竹荪孢子萌发的方法,其特征在于:步骤(4)中所述离心为在10000×g离心力下离心1min。
9.根据权利要求4所述的一种促进长裙竹荪孢子萌发的方法,其特征在于:步骤(5)中将重悬后的孢子液稀释到稀释度为10-4。
10.根据权利要求4所述的一种促进长裙竹荪孢子萌发的方法,其特征在于:步骤(6)中所述黑暗培养的温度为24℃。
...【技术特征摘要】
1.一种促进长裙竹荪孢子萌发培养基,其特征在于:每100ml水中以重量百分比计包括如下组分:土豆10~20%,葡萄糖1~2%,蛋白胨0.3~0.5%,黄豆粉0.3~0.5%,磷酸二氢钾0.05~0.2%,硫酸镁0.05~0.1%,琼脂1.5~2%。
2.根据权利要求1所述的一种促进长裙竹荪孢子萌发培养基,其特征在于:每100ml水中以重量百分比计包括如下组分:土豆20%,葡萄糖2%,蛋白胨0.5%,黄豆粉0.5%,磷酸二氢钾0.1%,硫酸镁0.05%,琼脂2%。
3.根据权利要求1所述的一种促进长裙竹荪孢子萌发培养基,其特征在于:每100ml水中以重量百分比计包括如下组分:土豆10%,葡萄糖1%,蛋白胨0.3%,黄豆粉0.3%,磷酸二氢钾0.05%,硫酸镁0.05%,琼脂1.5%。
4.一种促进长裙竹荪孢子萌发的方法,其特征在于:使用权利要求1-3任一项所述...
【专利技术属性】
技术研发人员:刘筱雪,曾泽彬,王一,杨敬,李冬兵,王洪江,兰凤杰,
申请(专利权)人:宜宾市农业科学院,
类型:发明
国别省市:
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