【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物检测技术，尤其是涉及一种脲酶检测试剂盒。
技术介绍
1、脲酶（urease）是一种催化尿素水解成氨和二氧化碳的含镍酶，其活性中心含有氨基甲酸根桥连的双核镍，具有高度专一性，广泛存在于微生物和动植物组织中，如变形杆菌属、克雷伯杆菌属、假单胞菌属和葡萄球菌属均可分泌脲酶，其中解脲脲原体和胃幽门螺旋杆菌存在更高的脲酶活性。因此，在医疗行业中脲酶常被用来作为检测微生物的特异性酶。
2、目前，脲酶的检测方法主要有两种，第一种是基于同位素标记法，其是利用脲酶分解由放射性同位素（13c或14c）标记的尿素，分解释放出具有13co2或14co2，通过检测13co2或14co2确定脲酶的含量。然而，该方法的检测对象为co2气体，无法用于体外样本中脲酶的检测，且需要特殊的同位素检测设备。
3、第二种是通过脲酶分解尿素产氨而导致反应体系的ph变化，根据ph变化判断是否存在脲酶，进而判断病原菌的感染情况，如市场上较为常见的支原体培养鉴定试剂。然而，该方法易受样本自身ph的影响，灵敏度较低，存在误判情况；另外，培养检测周期交长，无法满足高通量样本的快速检测需求。
4、综上，脲酶作为一种检测鉴定微生物的重要酶类，但是目前脲酶的检测方法具有较大的局限性。因此开发一种既不受样本自身ph影响，又无需特殊检测设备，又兼顾快速、稳定性和高灵敏度的脲酶检测方法是本行业需要解决的难题。
技术实现思路
1、有鉴于此，本专利技术提出了一种脲酶检测试剂盒，不仅能够克服样本自身
2、为实现上述目的，本专利技术采取下述技术方案：
3、本专利技术所述的脲酶检测试剂盒，包括脲酶检测试剂和含有显色剂的显色液，所述脲酶检测试剂为尿素溶液；所述显色剂为4-二甲氨基肉桂醛及其衍生物中的任意一种。有益效果是：本专利技术以尿素或其衍生物（如羟甲基尿素、磷酸尿素）作为脲酶的反应底物，利用4-二甲氨基肉桂醛能够与尿素发生显色反应的原理判断是否存在脲酶，完全不受样本自身ph的影响，提高了精准度，减少误判，克服了现有检测方法以ph变化作为判断标准时容易误判的技术缺陷。
4、优选的，本专利技术所述的脲酶检测试剂盒，还包括用于处理样本的样本稀释液。更优选的，所述样本稀释液为浓度为0.9%的氯化钠溶液。
5、优选的，所述显色液中显色剂的含量为0.1%～5.0%，对应的质量浓度为0.1 mg/ml～5.0 mg/ml。
6、优选的，所述显色液采用稀盐酸、稀硫酸或硫酸氢钠溶液中的任意一种或两种以上配制，为显色反应提供酸性环境。其中，稀盐酸的浓度控制在0.1-5m。
7、优选的，所述脲酶检测试剂采用生物缓冲液配制而成，所述底物的质量浓度为0.1%～10%。其中，所述生物缓冲液为磷酸盐缓冲液、tris-hcl缓冲溶液、硼酸盐缓冲液、甘氨酸缓冲液或柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液中任意一种或两种以上的组合，生物缓冲液的ph为6.0～8.0。更优选的，本专利技术的生物缓冲液采用0.1m的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。
8、优选的，本专利技术所述的脲酶检测试剂盒，还包括检测卡，所述检测卡具有脲酶反应孔，所述脲酶反应孔内包被有所述脲酶检测试剂。有益效果是：本专利技术将尿素检测试剂包被在检测卡的反应垫上，方便操作。当然，在实际出厂时，脲酶检测试剂也可以采用试剂瓶封装方式。
9、与现有技术相比，本专利技术以尿素或其衍生物（如羟甲基尿素、磷酸尿素等）作为脲酶的反应底物，首次提出基于4-二甲氨基肉桂醛与尿素发生显色反应的原理判断样本中是否存在脲酶，当样本中无脲酶时尿素及其衍生物未被分解，能够与4-二甲氨基肉桂醛发生显色反应，呈现红色；当样本中存在脲酶时，脲酶可将底物分解而不能再与4-二甲氨基肉桂醛反应，反应体系颜色无明显变化，可根据颜色变化直接判读。这也意味着本专利技术完全不受样本自身ph的影响，提高了灵敏度，减少误判，克服了现有检测方法以ph作为判断标准时受样本自身环境影响大且容易误判的缺陷。
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1.一种脲酶检测试剂盒，其特征在于：包括脲酶检测试剂和含有显色剂的显色液，所述脲酶检测试剂的底物为尿素或尿素衍生物；所述显色剂为4-二甲氨基肉桂醛及其衍生物中的任意一种。
2.根据权利要求1所述的脲酶检测试剂盒，其特征在于：还包括用于处理样本的样本稀释液。
3.根据权利要求2所述的脲酶检测试剂盒，其特征在于：所述样本稀释液为浓度为0.9%的氯化钠溶液。
4.根据权利要求1所述的脲酶检测试剂盒，其特征在于：所述显色液中显色剂的含量为0.1%～5.0%。
5.根据权利要求1所述的脲酶检测试剂盒，其特征在于：所述显色液采用稀盐酸、稀硫酸或硫酸氢钠溶液中的任意一种或两种以上配制。
6.根据权利要求5所述的脲酶检测试剂盒，其特征在于：所述稀盐酸的浓度为0.1-5M。
7.根据权利要求1所述的脲酶检测试剂盒，其特征在于：所述脲酶检测试剂采用生物缓冲液配制而成，所述底物的质量浓度为0.1%～10%。
8.根据权利要求7所述的脲酶检测试剂盒，其特征在于：所述生物缓冲液为磷酸盐缓冲液、Tris-HCl缓冲溶液、硼酸
9.根据权利要求8所述的脲酶检测试剂盒，其特征在于：所述生物缓冲液为柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。
10.根据权利要求1所述的脲酶检测试剂盒，其特征在于：还包括检测卡，所述检测卡具有脲酶反应孔，所述脲酶反应孔内包被有所述脲酶检测试剂。
...【技术特征摘要】
1.一种脲酶检测试剂盒，其特征在于：包括脲酶检测试剂和含有显色剂的显色液，所述脲酶检测试剂的底物为尿素或尿素衍生物；所述显色剂为4-二甲氨基肉桂醛及其衍生物中的任意一种。
2.根据权利要求1所述的脲酶检测试剂盒，其特征在于：还包括用于处理样本的样本稀释液。
3.根据权利要求2所述的脲酶检测试剂盒，其特征在于：所述样本稀释液为浓度为0.9%的氯化钠溶液。
4.根据权利要求1所述的脲酶检测试剂盒，其特征在于：所述显色液中显色剂的含量为0.1%～5.0%。
5.根据权利要求1所述的脲酶检测试剂盒，其特征在于：所述显色液采用稀盐酸、稀硫酸或硫酸氢钠溶液中的任意一种或两种以上配制。
6.根据权利要求5所述的脲酶检测试剂盒...
【专利技术属性】
技术研发人员：王则宇，杨森，杨红云，李晓霞，张学东，王利英，汪礼琴，刘志磊，杨咏康，宋少颖，刘亚峰，胡玉，付光宇，杨增利，
申请(专利权)人：郑州安图生物工程股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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