蓝莓的嫩茎段离体快速培养方法技术

本发明专利技术提供了一种蓝莓的嫩茎段离体快速培养方法，其特征在于，具体步骤为：第一步：选取蓝莓当年萌发的半木质化的嫩茎，剪去叶片，冲洗干净，消毒；第二步，将消毒干净的蓝莓嫩茎切成嫩茎段，进行生芽培养，将新芽切下，进行丛生芽诱导；第三步，将丛生芽切成单芽，进行生根培养；第四步，将生根的试管苗移入由重量比为５∶１的珍珠岩和泥炭混合而成的基质中，６０天后将幼苗移至灌满纯泥炭的塑料穴盘，经二个月培养后直接移栽至大田中。本发明专利技术的优点是繁殖率高，繁殖速度快。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种，利用当年抽生的半木质化的嫩茎段经消毒后诱导丛生芽，再经过培养后得到完整的试管苗，属于蓝莓培养方法

技术介绍
蓝莓是一种优质高档水果，营养丰富，经济价值高，其种苗主要靠扦插等常规方法繁殖，繁殖率低，周期长且易带病毒，无法满足生产用种苗之需。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种繁殖率高、繁殖速度快的蓝莓培养方法。 为了达到上述目的，本专利技术的技术方案是提供一种，其特征在于，具体步骤为 第一步选取蓝莓当年萌发的半木质化的嫩茎，剪去叶片，冲洗干净，在超净工作台上先用75vol％乙醇溶液消毒，然后用0.1vol％的洁尔敏溶液消毒，最后用0.1vol％升汞溶液消毒，用无菌水冲洗，无菌滤纸吸干水分； 第二步，将消毒干净的蓝莓嫩茎切成1cm长的嫩茎段，接种于第一培养基中进行生芽培养，所述第一培养基是在1/2Ms培养基的基础上添加了玉米素(Zt)和萘乙酸(NAA)，待嫩茎段上长出1cm长的新芽后，将新芽切下，接种到第二培养基中进行丛生芽诱导，所述第二培养基是在1/4Ms培养基的基础上添加了玉米素(Zt)、水解乳蛋白、Ms铁盐以及1/10Ms微量元素； 第三步，将丛生芽切成单芽，接种于第三培养基中进行生根培养，所述第三培养基是在1/2Ms培养基的基础上添加了萘乙酸和活性炭； 第四步，将生根的试管苗移入由重量比为5∶1的珍珠岩和泥炭混合而成的基质中，浇足水后用塑料薄膜覆盖保温保湿，一周后揭开薄膜逐步炼苗，每天叶面喷水2-3次，15天后施加肥料液，60天后将幼苗移至灌满纯泥炭的塑料穴盘，浇水后用塑料薄膜覆盖保温保湿，经二个月培养后直接移栽至大田中。 优选地，所述第一培养基中玉米素(Zt)的浓度为3mg/L，萘乙酸(NAA)的浓度为0.2mg/L，琼脂浓度为7g/L，蔗糖浓度为30g/L，pH值为5.8。 所述第二培养基中玉米素(Zt)的浓度为2mg/L，水解乳蛋白的浓度为500mg/L。 所述第三培养基中萘乙酸的浓度为5mg/L，活性炭的浓度为0.005mg/L。 所述第二步中生芽培养是25℃、光照强度2500LX以及光照时间12小时/天的条件下进行。 所述第二步中丛生芽诱导是在23℃、光照强度3500LX以及光照时间12小时/天的条件下进行。 所述第三步中生根培养是在23℃、光照强度3500LX，光照时间12小时/天的条件下进行。 所述第四步中用到的肥料液中含有0.1wt％硝酸铵和0.1wt％磷酸二氢钾。 本专利技术具有繁殖率高，繁殖速度快，脱病毒及提纯复壮等优点。可以在短时期内工厂化生产种苗，以供应栽培之用。 具体实施例方式 下面结合实施例来具体说明本专利技术。 实施例1 MS培养基成分如下 1/2Ms培养基是将上述大量元素和微量元素减半，其他成分不变配制得到。1/4Ms培养基是将上述大量元素和微量元素减成上表中的1/4，其他成分不变配制得到。第二培养基是在1/4Ms培养基的基础上加入Ms铁盐和1/10Ms微量元素，即所述培养液中大量元素浓度为上表中的1/4，微量元素浓度为上表中的1/4+1/10，两种铁盐成分浓度为上表中的2倍，其他成分不变。 ，具体步骤如下 第一步选取蓝莓当年萌发的半木质化的嫩茎，剪去叶片，冲洗干净，在超净工作台上先用75vol％乙醇溶液消毒1分钟，然后用0.1vol％的洁尔敏溶液消毒15分钟，最后用0.1vol％升汞溶液消毒15分钟，用无菌水冲洗，无菌滤纸吸干水分； 第二步，将消毒干净的蓝莓嫩茎切成1cm长的嫩茎段，接种于第一培养基中，所述第一培养基是在1/2Ms培养基的基础上添加了玉米素和萘乙酸，第一培养基中玉米素的浓度为3mg/L，萘乙酸的浓度为0.2mg/L，琼脂浓度为7g/L，蔗糖浓度为30g/L，pH值为5.8；在25℃、光照强度2500LX以及光照时间12小时/天的条件下进行生芽培养，待嫩茎段上长出1cm长的新芽后，将新芽切下，接种到第二培养基中，所述第二培养基是在1/4Ms培养基的基础上添加了玉米素、水解乳蛋白、Ms铁盐以及1/10Ms微量元素，第二培养基中玉米素的浓度为2mg/L，水解乳蛋白的浓度为500mg/L；在23℃、光照强度3500LX以及光照时间12小时/天的条件下进行丛生芽诱导并继代增殖，每30-35天增殖一次，增殖率为13-4； 第三步，将丛生芽切成单芽，接种于第三培养基中，所述第三培养基是在1/2Ms培养基的基础上添加了萘乙酸和活性炭，第三培养基中萘乙酸的浓度为5mg/L，活性炭的浓度为0.005mg/L，在23℃、光照强度3500LX，光照时间12小时/天的条件下进行生根培养； 第四步，将生根的试管苗移入由重量比为5∶1的珍珠岩和泥炭混合而成的基质中，浇足水后用塑料薄膜覆盖保温保湿，一周后揭开薄膜逐步炼苗，每天叶面喷水2-3次，15天后施加含有0.1wt％硝酸铵和0.1wt％磷酸二氢钾的肥料液，60天后将幼苗移至灌满纯泥炭的塑料穴盘(72孔)，浇水后用塑料薄膜覆盖保温保湿，经二个月培养后直接移栽至大田中，存活率可达100％。权利要求1.一种，其特征在于，具体步骤为第一步选取蓝莓当年萌发的半木质化的嫩茎，剪去叶片，冲洗干净，在超净工作台上先用75vol％乙醇溶液消毒，然后用0.1vol％的洁尔敏溶液消毒，最后用0.1vol％升汞溶液消毒，用无菌水冲洗，无菌滤纸吸干水分；第二步，将消毒干净的蓝莓嫩茎切成1cm长的嫩茎段，接种于第一培养基中进行生芽培养，所述第一培养基是在1/2Ms培养基的基础上添加了玉米素和萘乙酸，待嫩茎段上长出1cm长的新芽后，将新芽切下，接种到第二培养基中进行丛生芽诱导，所述第二培养基是在1/4Ms培养基的基础上添加了玉米素、水解乳蛋白、Ms铁盐以及1/10Ms微量元素；第三步，将丛生芽切成单芽，接种于第三培养基中进行生根培养，所述第三培养基是在1/2Ms培养基的基础上添加了萘乙酸和活性炭；第四步，将生根的试管苗移入由重量比为5∶1的珍珠岩和泥炭混合而成的基质中，浇足水后用塑料薄膜覆盖保温保湿，一周后揭开薄膜逐步炼苗，每天叶面喷水2-3次，15天后施加肥料液，60天后将幼苗移至灌满纯泥炭的塑料穴盘，浇水后用塑料薄膜覆盖保温保湿，经二个月培养后直接移栽至大田中。2.如权利要求1所述的，其特征在于，所述第一培养基中玉米素的浓度为3mg/L，萘乙酸的浓度为0.2mg/L，琼脂浓度为7g/L，蔗糖浓度为30g/L，pH值为5.8。3.如权利要求1所述的，其特征在于，所述第二培养基中玉米素的浓度为2mg/L，水解乳蛋白的浓度为500mg/L。4.如权利要求1所述的，其特征在于，所述第三培养基中萘乙酸的浓度为5mg/L，活性炭的浓度为0.005mg/L。5.如权利要求1所述的，其特征在于，所述第二步中生芽培养是25℃、光照强度2500LX以及光照时间12小时/天的条件下进行。6.如权利要求1所述的，其特征在于，所述第二步中丛生芽诱导是在23℃、光照强度3500LX以及光照时间12小时/天的条件下进行。7.如权利要求1所述的，其特征在于，所述第三步中生根培养是在23℃、光照强度3500LX，光照时间12小时/天的条件下进行。8.如权利要求1所述的，其特征在于，所本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种蓝莓的嫩茎段离体快速培养方法，其特征在于，具体步骤为：第一步：选取蓝莓当年萌发的半木质化的嫩茎，剪去叶片，冲洗干净，在超净工作台上先用７５ｖｏｌ％乙醇溶液消毒，然后用０．１ｖｏｌ％的洁尔敏溶液消毒，最后用０．１ｖｏｌ％升汞溶液消毒，用无菌水冲洗，无菌滤纸吸干水分；第二步，将消毒干净的蓝莓嫩茎切成１ｃｍ长的嫩茎段，接种于第一培养基中进行生芽培养，所述第一培养基是在１／２Ｍｓ培养基的基础上添加了玉米素和萘乙酸，待嫩茎段上长出１ｃｍ长的新芽后，将新芽切下，接种到第二培养基中进行丛生芽诱导，所述第二培养基是在１／４Ｍｓ培养基的基础上添加了玉米素、水解乳蛋白、Ｍｓ铁盐以及１／１０Ｍｓ微量元素；第三步，将丛生芽切成单芽，接种于第三培养基中进行生根培养，所述第三培养基是在１／２Ｍｓ培养基的基础上添加了萘乙酸和活性炭；第四步，将生根的试管苗移入由重量比为５∶１的珍珠岩和泥炭混合而成的基质中，浇足水后用塑料薄膜覆盖保温保湿，一周后揭开薄膜逐步炼苗，每天叶面喷水２－３次，１５天后施加肥料液，６０天后将幼苗移至灌满纯泥炭的塑料穴盘，浇水后用塑料薄膜覆盖保温保湿，经二个月培养后直接移栽至大田中。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：陆锦明，
申请(专利权)人：上海闵行区苗圃，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]