过表达制造技术

本发明专利技术提供了过表达

【技术实现步骤摘要】
过表达GhCIB1基因在促进棉花开花中的应用


[0001]本专利技术涉及基因工程
，特别是涉及过表达
GhCIB1
基因在促进棉花开花中的应用
。

技术介绍

[0002]棉花是我国重要的经济作物和关系国民经济的战略重要物资
。
我国是全球最大的棉花生产国和消费国，在纺织服装的出口量也位居世界前列
。
早熟陆地棉生育周期短，生长发育快，利用其适宜晚春播
、
初夏播和夏播的特性，可以和冬季作物如冬小麦
、
油麦菜等实现粮棉轮作，通过优化作物种植指数，有效提高土地复种指数
(
王雪颖等
,2022)。
此外，早熟棉的选育可以有效提高棉花的霜前花率，在光热条件差和气温变化大的高纬度地区如辽宁
、
甘肃等地区提高棉花的品质
(
喻树迅等
,1991)。
因此，鉴定棉花开花相关基因，阐明其调控机制，并创制早熟棉优异种质资源，对于我国棉花产业健康稳定发展具有重要的意义
。
[0003]研究人员利用双杂交筛库的方法首次在植物中筛选出与蓝光受体
CRY2
蓝光特异性相互作用的
bHLH
蛋白，命名为
CIB1。CIB1
位于
bHLH
转录因子家族第
18
亚族，该亚族包括
17
个成员，其中6个成员与
CIB1
亲缘关系更近，分别命名为
CIB2、CIB3、CIB4、CIB5、CIL1(CIB1 Like)
和
CIL2。CIB1
的
N
端结构域与
CRY2
仅在蓝光下发生特异性相互作用，并通过
BiFC
实验进一步验证，长日照下
cibl
功能缺失突变体没有晚花表型，推测植物中存在与
CIB1
功能冗余的
bHLH
蛋白
。
[0004]通过对
cib2、cib3、cib5
和
cill
突变体研究发现，拟南芥的单突变体都没有明显的开花表型
(LIU et al.,2008)。
但在长日照野生型背景下过表达
CIB1、CIB2、CIB4、CIB5
和
CIL1
，拟南芥开花显著早于野生型，进一步研究发现，
CIB1
，
CIB2、CIB4
和
CIB5
都具有促进开花的功能，且
CIB2
和
CIB5
都与
CRY2
互作，
CIB4
不与
CRY2
发生体内互作，但
CIB4
促进开花的功能却依赖于
CRY2(LIU et al.,2013)。
进一步研究发现，
CIB1
能够与
CIB2、CIB4
和
CIB5
形成二聚体，结合
FT
启动子中的
E
‑
box
基序；
CIB1、CIB2、CIB4
和
CIB5
过表达都引起转基因拟南芥中
FT
基因表达量上升，植株提早开花
(LIU et al.,2013)。
结果表明，上述
CIB
蛋白存在功能冗余，并形成异源二聚体，从而促进
FT
的
mRNA
的表达，促进植物开花
。
并且
CIB1
蛋白在蓝光下积累，蓝光受体
ZTL
和
LKP2
在蓝光下抑制了
CIB1
的泛素化降解
(LIU et al.,2018)。
此外，
CIB1、CO
及
CRY2
可形成复合体
CRY
‑
CIB1
‑
CO
，促进
FT
的转录
(LIU et al.,2018)。

技术实现思路

[0005]为了解决上述问题，本专利技术提供了过表达
GhCIB1
基因在促进棉花开花中的应用，本专利技术从陆地棉中克隆出
GhCIB1
基因，该基因通过构建过表达载体，在拟南芥中异源表达得到的过表达转基因株系相比于野生型开花提前，说明
GhCIB1
基因在控制棉花开花期方面起到了重要的调控作用
。
[0006]为了实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：
[0007]本专利技术提供了过表达
GhCIB1
基因在促进棉花开花中的应用，所述
GhCIB1
基因的核
苷酸序列如
SEQ ID No.1
所示
。
[0008]本专利技术还提供了过表达
GhCIB1
基因在促进棉花生殖生长中的应用，所述
GhCIB1
基因的核苷酸序列如
SEQ ID No.1
所示
。
[0009]优选的，所述
GhCIB1
基因的氨基酸序列如
SEQ ID No.2
所示
。
[0010]本专利技术的有益效果为：
[0011]本专利技术从陆地棉中克隆出
GhCIB1
基因，该基因通过构建过表达载体，在拟南芥中异源表达得到的过表达转基因株系相比于野生型开花提前，说明
GhCIB1
基因在控制棉花开花期方面起到了重要的调控作用
。
附图说明
[0012]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍
。
[0013]图1为
GhCIB1
基因在早熟材料顶芽中的表达量；
[0014]图2为
GhCIB1
基因在晚熟材料中的表达量；
[0015]图3为
GhCIB1
超表达拟南芥表型；
[0016]图4为
GhCIB1
超表达拟南芥抽薹天数统计；
[0017]图5为
GhCIB1
超表达拟南芥抽薹时莲座叶数量统计
。
具体实施方式
[0018]本专利技术提供了过表达
GhCIB1
基因在促进棉花开花中的应用，所述
GhCIB1
基因的核苷酸序列如
SEQ ID No.1
所示
。
[0019]本专利技术还提供了过表达
GhCIB1
基因在促进棉花生殖生长中的应用，所述
GhCIB1
基因的核苷酸序列如
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
过表达
GhCIB1
基因在促进棉花开花中的应用，所述
GhCIB1
基因的核苷酸序列如
SEQ ID No.1
所示
。2.
过表达
GhCIB1
基因在促进棉花生殖生长中的应用，所述

【专利技术属性】
技术研发人员：王寒涛，孙梦玺，马亮，魏恒玲，付小康，喻树迅，康萌，芦建华，
申请(专利权)人：中国农业科学院棉花研究所，
类型：发明
国别省市：