一种培养基及其制备方法技术

本发明专利技术提供了一种培养基及其制备方法，其中，该培养基的组成包括胰蛋白胨

【技术实现步骤摘要】
一种培养基及其制备方法


[0001]本专利技术涉及微生物检测领域，具体涉及一种培养基及其制备方法
。

技术介绍

[0002]金黄色葡萄球菌在自然界中分布广泛，且适应不同环境的能力较强，金黄色葡萄球菌是引发细菌性食物中毒的主要致病菌之一，对人类及动物生命健康
、
食品安全和公共卫生造成潜在威胁，还可以引起多种人体感染，主要为皮肤或黏膜感染以及败血性感染
。
因此对金黄色葡萄球菌进行快速而准确的检测十分重要
。
[0003]现行
GB4789.10
分离金黄色葡萄球菌通常采用血平板
、Baird
‑
Parke
培养基分离葡萄球菌，但因血平板需要新鲜羊血，通常食品检测
、
防疫检测站都不具备相应条件
。
而目前
Baird
‑
Parke
培养基配方中均含有氯化锂
。
氯化锂是白色的晶体，具有潮解性，味咸，易溶于水
、
乙醇
、
丙酮
、
吡啶等有机溶剂，尽管其属于低毒类物质，但对眼睛和粘膜具有强烈的刺激和腐蚀作用，因此，氯化锂在一定程度上对于培养基的生产安全，使用安全都有影响
。
另外，培养基的透明度对实验结果的判断有很大影响，而现有的培养基的透明度使得在判断实验结果时需要仔细甄别，容易产生误判
。
因此，有必要对培养基进行进一步的改进
。
专利
技术实现思路

[0004]本专利技术通过反复实验对
Baird
‑
Parker
培养基进行优化改进，去除了氯化锂的使用，让培养基配制起来更简单安全
。
因此，本专利技术的第一方面提供了一种培养基，其组成包括：胰蛋白胨
、
牛肉膏粉
、
酵母膏粉
、
丙酮酸钠
、
甘氨酸和琼脂，但不包括氯化锂
。
[0005]进一步优化的，本专利技术提供的培养基还包括卡拉胶
。
[0006]在本专利技术的一个具体实施方式中，本专利技术第一方面的培养基包括基础培养基和增菌剂，其中每升基础培养基的组分及含量为：胰蛋白胨
12
‑
14g
，牛肉膏粉2‑
3g
，酵母膏粉5‑
7g
，丙酮酸钠
10
‑
12g
，甘氨酸
10
‑
12g
，琼脂
12
‑
15g
，卡拉胶
0.2
‑
0.4g。
[0007]同时，本专利技术提供了一种基础培养基，该基础培养基为粉末状，包括：胰蛋白胨
、
牛肉膏粉
、
酵母膏粉
、
丙酮酸钠
、
甘氨酸和琼脂，且不包括氯化锂
。
[0008]进一步优化的，上述基础培养基还包括卡拉胶
。
[0009]在本专利技术的一种具体实施方式中，上述基础培养基包括：
20.6
‑
24
％的胰蛋白胨
、3.4
％
‑5％的牛肉膏粉
、8.6
％
‑
12
％的酵母膏粉
、17.2
％
‑
20.6
％的丙酮酸钠
、17.2
％
‑
20.6
％的甘氨酸
、20.6
％
‑
25.8
％的琼脂
、0.34
％
‑
0.69
％的卡拉胶，按质量分数计
。
[0010]本专利技术的第二方面提供了一种培养基的制备方法，该方法具体包括：将第一方面中的各成分加到蒸馏水或去离子水中，加热煮沸至完全溶解，再调节
pH
值至
7.0
±
0.2
，后分装灭菌保存
。
[0011]本专利技术的有益效果在于：通过实验验证，本专利技术优化后的培养基中去除了氯化锂，解决了生产安全
、
使用安全
、
环境污染等由氯化锂所带来的相关问题，实现并优于原有效果
。
此外，本专利技术加入卡拉胶后的优化方案能进一步改善培养基平板的致密性问题，在接上
金黄色葡萄球菌后，使得含有卵磷脂酶的葡萄球菌降解卵黄使菌落产生的透明圈更容易识别，从而更加容易判断实验结果，不容易出错，节省时间避免出错
。
附图说明
[0012]图1为实施例二中优化
Baird
‑
Parke
培养基
(
无氯化锂
)
后有卡拉胶组和未无卡拉胶组的金黄色葡萄球菌
ATCC 25923
的
24
小时生长状态图，其中，
A
和
B
为无卡拉胶组，
C
和
D
为有卡拉胶组
。
具体实施方式
[0013]现行标准
GB4789.10
中分离金黄色葡萄球菌中采用的
Baird
‑
Parke
琼脂平板
(Baird
‑
Parke
培养基
)
的基础培养基成分为胰蛋白胨
、
牛肉膏
、
酵母膏
、
丙酮酸钠
、
甘氨酸
、
氯化锂
(LiCl
·
6H2O)
和琼脂
。
上述基础培养基与添加剂
(
增菌剂，卵黄盐水与亚碲酸钾溶液混合
)
搭配使用制成完整的
Baird
‑
Parke
琼脂平板进行使用
。
本专利技术通过对现有的
Baird
‑
Parker
培养基进行了深入的研究和分析，发现其培养基中胰蛋白胨
、
牛肉膏粉和酵母膏粉主要用于提供碳氮源
、
维生素和生长因子；丙酮酸钠和甘氨酸则可刺激葡萄球菌的生长；含有卵磷脂酶的葡萄球菌降解卵黄使菌落产生透明圈，而脂酶作用则产生不透明的沉淀环；凝固酶阳性的葡萄球菌能还原亚碲酸钾而产生黑色菌落，琼脂则是培养基的凝固剂；氯化锂和亚碲酸钾则可抑制非葡萄球菌的微生物
。
[0014]为解决氯化锂的安全性问题，在研究氯化锂的可替代性方案时，本专利技术设计并使用了多种替代方法，并在替换实验中意外地发现：添加氯化锂而不含亚碲酸钾
(
仅含氯化锂
)
的培养基中金色葡萄球菌
、
表皮葡萄球菌菌落明本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种培养基，其特征在于，所述培养基包括胰蛋白胨
、
牛肉膏粉
、
酵母膏粉
、
丙酮酸钠
、
甘氨酸和琼脂，且不包括氯化锂
。2.
如权利要求1所述的培养基，其特征在于，还包括卡拉胶
。3.
如权利要求2所述的培养基，其特征在于，所述培养基包括基础培养基和增菌剂，每升所述基础培养基中包括：胰蛋白胨
12
‑
14g、
牛肉膏粉2‑
3g、
酵母膏粉5‑
7g、
丙酮酸钠
10
‑
12g、
甘氨酸
10
‑
12g、
琼脂
12
‑
15g、
卡拉胶
0.2
‑
0.4g。4.
如权利要求3所述的培养基，其特征在于，所述增菌剂为亚碲酸盐卵黄增菌液
。5.
一种基础培养基，其特征在于，所述基础培养基为粉末状，包括：胰蛋白胨
、
牛肉膏粉
、
酵母膏粉
、
丙酮酸钠
、
甘氨酸和琼脂，且不包括氯化锂
。6.
如权利要求5所述的基础培养基，其特征在于，所述基础培养基还包括卡拉胶
。7.

【专利技术属性】
技术研发人员：蒋廉良，叶文意，李莹莹，肖钢军，陈高明，胡玉梅，
申请(专利权)人：深圳逗点生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：