【技术实现步骤摘要】
一种纳米金@聚多巴胺铁包覆细菌外膜囊泡的纳米颗粒制备方法
[0001]本专利技术涉及免疫学及生物医药
,特别涉及一种纳米金
@
聚多巴胺铁包覆细菌外膜囊泡的纳米颗粒制备方法
。
技术介绍
[0002]肿瘤免疫治疗是通过重新启动并维持肿瘤
‑
免疫循环,恢复机体正常的抗肿瘤免疫反应,从而控制与清除肿瘤的一种治疗方法,具有十分广阔的应用前景,但肿瘤免疫抑制微环境已成为掣肘肿瘤免疫疗法发挥功效的关键问题,利用纳米颗粒将免疫药物递送至肿瘤部位是改善肿瘤免疫抑制微环境的一种经典方法,但基于人工合成颗粒开发的免疫治疗体系仍存在着制备工艺复杂
、
药物装载率低
、
批次间重复性差等一系列难题
。
近些年,人们通过不断研究发现了细菌天然分泌的单纯细菌外膜囊泡
(OuterMembrane Vesicles
,
OMVs)
在调节肿瘤免疫抑制微环境中具有一定的潜力,细菌外膜囊泡
(OMVs)
是一种由革 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.
一种纳米金
@
聚多巴胺铁包覆细菌外膜囊泡的纳米颗粒的制备方法,其特征在于,所述制备方法具体包括以下步骤:
S1、
将大肠杆菌活化后连续传代培养,培养至对数期后再用
IPTG
诱导其产生细菌外膜囊泡;
S2、
将步骤
S1
提取的细菌外膜囊泡与多巴胺
、
硫酸亚铁
、PEG
2000
通过一锅法制得聚多巴胺铁包覆的细菌外膜囊泡
OMV
‑
DF
;
S3、
将步骤
S2
制得的聚多巴胺铁包覆的细菌外膜囊泡与
HAuCl4避光孵育,再经还原得到纳米金
@
聚多巴胺铁包覆细菌外膜囊泡的纳米颗粒
OMV
‑
DFA。2.
根据权利要求1所述一种纳米金
@
聚多巴胺铁包覆细菌外膜囊泡的纳米颗粒的制备方法,其特征在于,所述步骤
S1
具体为:将大肠杆菌通过培养基活化并培养至对数期后接种于新培养基中,
100
~
300r/min、37℃
下培养1~
3h
;再加入
IPTG
诱导剂诱导3~
5h
,收集菌液后
6000
~
8000r/min
离心收集上清,抽滤
、
浓缩上清并去除细菌碎,最后
130000
~
150000g
超高速离心提取得到细菌外膜囊泡
。3.
根据权利要求2所述一种纳米金
@
聚多巴胺铁包覆细菌外膜囊泡的纳米颗粒的制备方法,其特征在于,所述
IPTG
诱导剂的终浓度为
10
~
30
μ
g/mL。4.
根据权利要求1所述一种纳米金
@
聚多巴胺铁包覆细菌外膜囊泡的纳米颗粒的制备方法,其特征在于,所述步骤
S2
具体为:先将步骤
S1
提取的细菌外膜囊泡重悬于
Tris
‑
HCl
‑
HEPES
缓冲液中至其终浓度为1~
2mg/mL
,然后依次加入多巴胺
、
硫酸亚铁
、PEG
2000<...
【专利技术属性】
技术研发人员:张帆,梅林,李倩倩,张锦勰,欧美彤,余永康,曾伟伟,
申请(专利权)人:中山大学,
类型:发明
国别省市:
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