选择细胞的方法技术

提供了用于在

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】选择细胞的方法


[0001]本专利技术涉及基于所需特征使用装置选择细胞的方法
。
然后可以扩增这些选择的细胞用于治疗或制造用途
。
该方法可用于过继细胞疗法
(ACT)
，特别是细胞免疫疗法，但也有其他用途，特别是在来自群体的细胞的表征中，通常群体中的细胞已被遗传改造
。
此外，该方法可用于基于细胞产生所需分子
(
例如免疫球蛋白或免疫治疗药物
)
的能力来选择细胞
。
合成生物学是一个发展迅速的领域，可以利用细胞生产药物
、
燃料
、
食品和饮料，或者生产可以降解塑料和其他污染物的酶
。
本专利技术的装置属于微流体领域，并且涉及能够操纵微滴的微流体装置
。

技术介绍

[0002]细胞的快速和高通量处理是研究
、
开发和制造过程中的一项重大挑战
。
对于细胞疗法和细胞衍生疗法等生物治疗药物的产生尤其如此，其中需要识别和选择细胞，同时保留细胞以供进一本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.
用于在
EWOD
或
oEWOD
装置中基于至少一个特征来选择细胞和
/
或一个或多个细胞的一部分的方法，所述方法包括：
i.
提供微滴的测试组，所述微滴包括至少培养基或培养基和至少一个细胞；
ii.
提供微滴的至少一个报告子组，所述微滴包含一个或多个报告子实体；
iii.
将所述测试组的微滴与所述至少一个报告子组的微滴合并以形成合并的测定微滴组；和
iv.
使用能够基于至少一个特征的存在检测所述报告子实体的变化的检测系统来监测所述测定微滴组，以及
v.
基于报告子实体的变化从组中选择微滴的子集，所述子集包含所选择的细胞；其中通过将包含至少一个细胞和培养基的微滴组分裂，来创建包含至少培养基的微滴的测试组，进一步创建包含至少一个细胞的微滴的参考组；和
/
或进一步地，其中在步骤
(i)
至
(v)
中的任一个之前或之后，将包括至少一个细胞的微滴的测试组分裂成至少两个微滴组，所述组是：包括至少培养基或培养基和至少一个细胞的适于与报告子实体组的微滴合并的微滴的测试组；以及包含至少一个细胞的微滴的参考组
。2.
根据权利要求1所述的方法，其中所述细胞的特征选自以下中的任一个或多个：一种或多种细胞表面分子的存在；一种或多种细胞活动的存在；细胞形态；一种或多种细胞分泌物的存在；和
/
或一种或多种细胞内产物的存在
。3.
根据权利要求1或权利要求2所述的方法，其中在分裂包含至少一个细胞的微滴组之前，在允许细胞分裂的条件下培养所述细胞
。4.
根据权利要求3所述的方法，其中所述条件包括将包含至少一个细胞的微滴组与包含培养基的微滴组合并
。5.
根据权利要求3或权利要求4所述的方法，其中所述微滴的参考组和测试组被分裂，使得参考组或微滴包含与包含在微滴的测试组中的细胞相对应的细胞的至少一个克隆拷贝
。6.
根据权利要求3至5中任一项所述的方法，其中所述包含至少一个细胞的微滴的测试组与包含用于裂解所述细胞的试剂的微滴组合并
。7.
根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中检查包含至少一个细胞的任何微滴组中的细胞的形态特征，并且所述形态特征用于选择细胞的子集
。8.
根据权利要求7所述的方法，其中所述形态特征包括大小
、
形状
、
粘附状态
、
细胞膜状态和
/
或细胞内特征的存在
。9.
根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中在步骤
(ii)
之前，对含有至少一个细胞的微滴组进行至少一次测定以确定细胞的特征，所述测定是通过将包含至少一个细胞的所述微滴组与包含至少一个报告子实体的至少一个微滴组合并并基于所述特征的存在确定所述至少一个报告子实体的变化来进行的
。10.
根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中在步骤
(iv)
之后，将至少一个含水微滴组与合并的微滴测定组合并，并且随后分裂合并的微滴组
。11.
根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中在所述方法的任何阶段，丢弃不需要的或空的微滴
。
12.
根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中从所述装置分配所述选择的微滴组的细胞
。13.
根据权利要求
12
所述的方法，其中在分配所述选择的微滴组之后，处理其中包含的细胞以扩增群体和
/
或培养克隆
。14.
根据权利要求
12
或
13
所述的方法，其中，在分配所述选择的微滴组之后，对其中包含的细胞和
/
或非细胞实体如分泌物
、
代谢物进行进一步分析，包括但不限于以下任意一种或多种：
I.
质谱法；
II.
表面等离子体共振；
III.
高效液相色谱法；和
/
或
IV.
基因分析，包括核酸测序和
PCR
扩增
。15.
根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述测试组的微滴对应于所述参考组的微滴，使得可以基于所述微滴的测试组中所述报告子实体的变化来选择保留在所述参考组中的细胞
。16.
根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述细胞是遗传改造的
。17.
根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述细胞在步骤
(i)
之前进行遗传改造，包括以下步骤：
a.
提供微滴组，每个微滴包括至少一个细胞；
b.
提供修饰微滴组；每个微滴包含能够修饰细胞的一个或多个遗传元件；
c.
将含有细胞的微滴与含有一个或多个遗传元件的微滴合并，形成微滴组，每个微滴都含有遗传改造的细胞
。18.
根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述细胞的特征是成活力
、
细胞活化和
/
或细胞杀伤能力
。19.
根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述细胞的特征在于，它们能够制造以下产物中的任...

【专利技术属性】
技术研发人员：托马斯，
申请(专利权)人：光投发现有限公司，
类型：发明
国别省市：