广谱中和制造技术

本发明专利技术公开了一种广谱中和

【技术实现步骤摘要】
广谱中和SARS
‑
CoV
‑
2的单克隆抗体VacBB
‑
665及其应用


[0001]本专利技术属于新型冠状病毒治疗
，具体涉及一种广谱中和
SARS
‑
CoV
‑2的单克隆抗体
VacBB
‑
665
及其应用
。

技术介绍

[0002]Spike
蛋白是一种的三聚体跨膜糖蛋白，是新型冠状病毒
(SARS
‑
CoV
‑
2)
最重要的表面膜蛋白，含有两个亚基
S1
和
S2
，其中
S1
主要包含有
N
端结构域
(NTD)
和受体结合区域
(RBD)
，负责识别和结合宿主细胞受体；
S2
含有膜融合过程所需的基本元件
。
当发生病毒感染时，
S1
亚基与宿主细胞的血管紧张素转换酶
2(angiotensinconverting enzyme 2
，
ACE2)
结合，使得病毒附着在宿主细胞表面，丝氨酸蛋白酶
TMPRSS2
激活
S
蛋白；然后宿主细胞的
Furin
酶在
S
蛋白的
S1/S2
位点进行切割，病毒
‑
受体结合使得预融合的
S/>蛋白三聚体不稳定，
S1
亚基脱落，
S2
亚基转变为稳定的融合后构象，从而驱动病毒膜与细胞膜融合，使病毒进入宿主细胞
。
中和抗体
(neutralizing antibody
，
nAb)
能够通过阻断
spike
蛋白与细胞受体
ACE2
结合从而抑制病毒进入宿主细胞；而
spike
蛋白上的
RBD
直接结合
ACE2
，是中和抗体最重要的识别靶点
。RBD
中出现的突变通常影响病毒感染和传播，甚至导致病毒逃逸自然感染或疫苗接种诱导的抗体中和作用
。
[0003]同自然感染病毒一样，接种疫苗能够在人体内诱导出有效的体液免疫反应，因此在预防病毒感染上发挥了关键作用
。
并且多次接种疫苗可以不断刺激人体免疫系统并诱导出越来越高水平的中和抗体，尤其是一些广谱中和抗体
。
然而不断出现的新冠病毒变种，尤其是
Omicron
变种，极大程度上破坏了疫苗所建立的免疫屏障，显著逃逸了疫苗接种者体内产生的中和抗体
。
目前有不少文献报道，疫苗加强免疫能够在一定水平上对抗病毒逃逸，不过这其中发挥关键作用的抗体特征尚不清楚，尤其是在灭活疫苗接种者体内
。
同时，从灭活疫苗接种者中分离出来的广谱中和抗体，特别是能中和多种
Omicron
亚型变异株的，目前报道较少
。
[0004]因此，为了应对世界各地
SARS
‑
CoV
‑2的不断进化和重组以及中和抗体逃逸的潜在风险，研发新的新型冠状病毒抗体，仍然是本领域的研究重点和难点
。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是提供一种广谱中和
SARS
‑
CoV
‑2的单克隆抗体
VacBB
‑
665
及其应用
。
[0006]为了实现上述目的，本专利技术采用了以下技术方案：
[0007]本专利技术的第一方面公开了一种广谱中和
SARS
‑
CoV
‑2的单克隆抗体，所述广谱中和
SARS
‑
CoV
‑2的单克隆抗体为
VacBB
‑
665
，该单克隆抗体由重链和与之配对的轻链组成；所述重链的
CDR1、CDR2
和
CDR3
的氨基酸序列依序为“GFTFTPSA”、“IVVGSGNT”和“AAPHCNRTNCYDGFDL”，所述轻链的
CDR1、CDR2
和
CDR3
的氨基酸序列依序为“QSVSSSY”、“GAS”和“QQYGRSPWT”。
[0008]需要说明的是，本专利技术的关键在于，从接种三针灭活疫苗的志愿者的外周血特异性单个记忆
B
细胞中克隆并鉴定获得了1株单克隆中和抗体，即
VacBB
‑
665
，其能够对包括新型冠状病毒
Omicron
变体在内的多种
SARS
‑
CoV
‑2变异假病毒发挥中和作用，具体包括
WT(
野生型
)、Beta、Delta、BA.1、BA.1.1、BA.2、BA.2.12.1、BA.4/5、BA.2.75。
并且与现有报道的从灭活疫苗中分离的中和抗体相比，本专利技术的
VacBB
‑
665
单克隆抗体的中和作用更强
。
[0009]本专利技术的一种实现方式中，新型冠状病毒单克隆抗体
VacBB
‑
665
的重链可变区序列为
Seq ID No.1
所示序列，轻链可变区序列为
Seq ID No.2
所示序列
。
[0010]需要说明的是，以上具体序列的重链序列可变区和轻链序列可变区只是本专利技术的一种实现方式中具体采用的单克隆抗体序列；可以理解，对于单克隆抗体而言，影响其与抗原决定簇形成精密互补的区域是互补性决定区
(
缩写
CDR)
，具体的，即重链序列的
CDR1、CDR2
和
CDR3
，以及轻链序列的
CDR1、CDR2
和
CDR3
；因此，只要保障本专利技术的重链序列和轻链序列的
CDR1、CDR2
和
CDR3
序列不变，都能够基本实现本专利技术新型冠状病毒单克隆抗体的功能和作用
。
也就是说，本专利技术的新型冠状病毒单克隆抗体，其具体序列不仅限于以上具体序列的重链序列可变区和轻链序列可变区
。
[0011]本专利技术的第二方面公开了一种编码本专利技术的广谱中和
SARS
‑
CoV
‑2的单克隆抗体的核酸片段，所述核酸片段编码
VacBB
‑
665
的重链和轻链
。
[0012]本专利技术的一种实现方式中，编码
Seq ID No.1
所示的重链序列可变区的核酸序列如本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种广谱中和
SARS
‑
CoV
‑2的单克隆抗体，其特征在于，所述广谱中和
SARS
‑
CoV
‑2的单克隆抗体为
VacBB
‑
665
，该单克隆抗体由重链和与之配对的轻链组成；所述重链的
CDR1、CDR2
和
CDR3
的氨基酸序列依序为“GFTFTPSA”、“IVVGSGNT”和“AAPHCNRTNCYDGFDL”，所述轻链的
CDR1、CDR2
和
CDR3
的氨基酸序列依序为“QSVSSSY”、“GAS”和“QQYGRSPWT”。2.
根据权利要求1所述的广谱中和
SARS
‑
CoV
‑2的单克隆抗体，其特征在于，
VacBB
‑
665
的重链可变区序列为
Seq ID No.1
所示序列，轻链可变区序列为
Seq ID No.2
所示序列
。3.
一种编码权利要求1或2所述的广谱中和
SARS
‑
CoV
‑2的单克隆抗体的核酸片段，其特征在于，所述核酸片段编码
VacBB
‑
665
的重链和轻链
。4.
根据权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：鞠斌，张政，王苗，范晴，段美美，周兵，沈森林，
申请(专利权)人：深圳国家感染性疾病临床医学研究中心，
类型：发明
国别省市：