一种制造技术

本发明专利技术公开了一种

【技术实现步骤摘要】
一种DEK蛋白在制备激活休眠神经干细胞药物中的应用
(一)

[0001]本专利技术涉及一种
DEK
蛋白在制备激活休眠神经干细胞药物中的应用，特别是
DEK
蛋白在神经退行性及损伤性疾病中促进神经发生产生新生神经元细胞，从而实现脑衰老及脑卒中的治愈，以及在临床上用于治愈各种神经退行及损伤性疾病
。
(二)
技术介绍

[0002]神经退行性
(
脑衰老
)
及损伤性疾病，如阿尔兹海默症
、
帕金森症
、
脑卒中
(
中风
)、
颅脑及脊髓损伤等患者在神经系统不同区域功能性神经元死亡并导致运动
、
语言
、
认知等功能障碍
。
由于神经损伤性病变后，凋亡的神经细胞不能得到补充使得神经系统疾病成为致死
、
致残率最高的疾病之一
。
目前尚没有针对细胞完全死亡区
(
如缺血性脑卒中的暗区
)
治疗的有效途径
。
成年人的大脑内是否能够有新生神经元产生的神经再生备受争议
。
尽管在成年人的大脑中存在着神经干细胞，但是它们长期处于休眠状态而且其生物学功能尚不明确
。
如何通过激活成体休眠神经干细胞，促进神经发生产生新生神经元，修复并补充已损伤或死亡的功能神经元，一直以来是神经退行性及损伤性疾病有效治疗面临的重大挑战
。
[0003]哺乳动物的神经发生主要起源于哺乳动物侧脑室的室管膜下区以及海马体齿状回的颗粒细胞下层的神经干细胞
。
它们可以通过增殖并产生过渡态的神经前体细胞及神经母细胞，并通过侧迁移流迁移运动到嗅球以及放射状沿着颗粒细胞层迁移，进而分化为成不同的神经元亚型
。
然而，成体神经干细胞基本处于休眠状态，它们在各种神经退行性及损伤性疾病条件下的生物学功能及其休眠与激活的调控机制尚未被明确
。
休眠神经干细胞一旦被激活，就能够产生具有增殖分化能力的激活态的神经干细胞从而维持干细胞库，并通过细胞增殖
、
迁移
、
分化产生功能性神经元和胶质细胞完成对神经系统的功能维持与重建
。
因此，通过激活休眠神经干细胞促进神经再生在神经损伤性疾病治疗上被寄予了极大的期待
。
近年来的研究发现各种调控神经干细胞休眠的分子都与
Notch
信号通路密切相关
。
其中，由
Notch
通路效应分子
HES
家族调控的通过抑制
Ascl1
基因表达以及
ASCL1
泛素化连接酶
HUWE1
降解进而调控神经干细胞进入休眠状态
(Ables,J.L., Breunig,J.J.,Eisch,A.J.,and Rakic,P.(2011).Not(ch)just development:Notch signalling in the adultbrain.Nat.Rev.Neurosci.12,269
–
283.)。
然而，通过
Notch
敲除能够激活休眠神经干细胞但很快导致干细胞库的耗竭，无法实现持续性神经再生
。
[0004]为了突破休眠神经的激活调控的研究瓶颈，我们利用生活在高山盐湖并能够产生休眠胚胎的卤虫
(
丰年虫
)
，研究发现了
DEK
蛋白能够通过与染色质结合，促进异染色质向常染色质结构的转变，从而表观调控休眠细胞的激活，导致卤虫打破胚胎休眠
(Wen
‑
Huan Jia,An
‑
Qi Li,Jing
‑
YiFeng,Yan
‑
Fu Ding,Sen Ye,Jin
‑
Shu Yang and Wei
‑
Jun Yang(2019).DEK terminates diapause byactivation of quiescent cells in the crustacean Artemia.Biochemical Journal 476(12),1753
–
1769.)。
[0005]本专利技术通过构建以
DEK
条件性过表达激活休眠神经干细胞的小鼠研究模型，发现
DEK
条件性过表达能够激活休眠神经干细胞并表现出极显著并持久的神经再生能力，发现
在老年衰老小鼠脑及脑卒中小鼠的神经再生，从而实现了缓解老年鼠的脑衰老并对脑卒中有显著的损伤修复作用
。
(三)
技术实现思路

[0006]本专利技术目的是提供一种
DEK
蛋白在制备激活休眠神经干细胞药物中的应用，特别是通过内源及外源
DEK
蛋白激活成体休眠神经干细胞，促进成体
、
老年及脑卒中小鼠脑的神经再生，对减缓老年脑的衰老及脑卒中损伤修复具有显著的作用
。
[0007]本专利技术采用的技术方案是：
[0008]第一方面，本专利技术提供一种
DEK
蛋白在制备激活休眠神经干细胞药物中的应用
。
[0009]进一步，所述
DEK
蛋白具有
SEQ ID NO.1
所示保守核酸序列
。
[0010]进一步，所述
DEK
蛋白具有
SEQ ID NO.2
所示氨基酸序列
95
％以上相似性
。
[0011]更进一步，所述
DEK
蛋白对应
SEQ ID NO.1
，具有
SEQ ID NO.2
所示保守氨基酸序列
(380 个氨基酸
)
，编码基因序列为
SEQ ID NO.1
所示
(DNA
全长为
1143bp)。
[0012]本专利技术所述
DEK
蛋白在制备激活休眠神经干细胞药物中的应用是在休眠神经干细胞中过表达内源
DEK
蛋白或将外源
DEK
蛋白投递到休眠神经干细胞中，达到激活休眠神经干细胞的目的
。
[0013]第二方面，本专利技术提供一种所述
DEK
蛋白在制备预防或治疗脑神经损伤药物中的应用，所述脑神经损伤包括脑卒中，阿尔兹海默症，帕金森病等
。
所述药物是将
DEK
蛋白通过体外表达纯化以外泌体搭载制备而成，或以基因工程病毒搭载
DEK
制备而成
。
所述的应用是将
DEK
蛋白通过体外表达纯化以外本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种
DEK
蛋白在制备激活休眠神经干细胞药物中的应用
。2.
如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述
DEK
蛋白具有
SEQ ID NO.1
所示保守核酸序列
。3.
如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述
DEK
蛋白具有
SEQ ID NO.2
所示氨基酸序列
95
％以上相似性
。4.
如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述
DEK
蛋白具有
SEQ ID NO.2
所示氨基酸序列
。5.
如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述应用是在休眠神经干细胞中过表达内源
DEK
...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨卫军，蔡孙立，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：