一种用于多替拉韦-拉米夫定-替诺福韦复方制剂中有关物质的检测方法技术

本发明专利技术公开了一种用于多替拉韦

【技术实现步骤摘要】
一种用于多替拉韦
‑
拉米夫定
‑
替诺福韦复方制剂中有关物质的检测方法


[0001]本专利技术是涉及一种用于多替拉韦
‑
拉米夫定
‑
替诺福韦复方制剂中有关物质的检测方法，属于制剂质量检测

。

技术介绍

[0002]目前治疗艾滋病的抗病毒治疗方案主要是鸡尾酒疗法，一般是采用三种抗病毒药物联合治疗，通常是由两种核苷类似物联合一种非核苷类似物或一种蛋白酶抑制剂或一种整合酶抑制剂，其中的两种核苷类似物通常选择拉米夫定和替诺福韦这两种药物
。
多替拉韦
(Dolutegravir
，
DTG)
是葛兰素史克
/ViiV
研发的一款抗艾滋病药物，属于整合酶抑制剂
。
经临床工作者及相关数据证实，多替拉韦
、
拉米夫定及替诺福韦三方联用对
HIV
的治疗效果要优于单独使用单方制剂的任一种
。
为了便于患者的使用方便，现有技术中已有关于多替拉韦
‑
拉米夫定
‑
替诺福韦的三方复方制剂，如：申请号为
CN 202011186533.5
的中国专利申请中公开了一种多替拉韦
‑
替诺福韦
‑
拉米夫定复方双层片
。
但现有研究发现：多替拉韦
(DTG
，全称为：多替拉韦钠
)、
拉米夫定
(3TC)
和替诺福韦
(TDF
，全称为：富马酸替诺福韦二吡呋酯
)
在三方复方制剂的生产和贮存过程中易出现稳定性下降，容易产生降解杂质，会导致毒副作用增加，从而给三方复方制剂的使用带来了安全隐患
。
[0003]本申请人在研究多替拉韦
(DTG)
‑
拉米夫定
(3TC)
‑
替诺福韦
(TDF)
三方复方制剂的质量分析中发现，来自多替拉韦的有关物质目前有如下6种：
[0004][0005][0006]另外，由中国药典
2020
版第
776
页记载，来自拉米夫定片的有关物质目前已知的有如下8种：
[0007][0008][0009]且中国药典还规定上述杂质总量不得过
0.6
％
。
[0010]以及，由国际药典第十版
(The International Pharmacopoeia
‑
Tenth Edition)
中记载，来自替诺福韦
(TDF
，即：富马酸替诺福韦二吡呋酯
)
原料药的有关物质目前已知的有如下
14
种：
[0011][0012][0013]也就是说，由多替拉韦
、
拉米夫定和替诺福韦组成的三方复方制剂中会包含来自多替拉韦和拉米夫定及替诺福韦中的所有有关物质，目前已确定化学结构的有关物质已合计达到
28
种，且每种单杂均有严格的质控限度，因此要满足质控要求，必须具有一种可对每种杂质均能实现有效分离的检测分析方法
。
[0014]而本申请人在研究中发现：多替拉韦极性较弱，为了能够有效分离多替拉韦中的
有关物质，会使来自拉米夫定和替诺福韦中的有关物质被集中洗脱掉，以致无法实现来自拉米夫定和替诺福韦中的有关物质的有效分离和检测；并且，用于多替拉韦中有关物质的检测波长为
320nm
，而来自拉米夫定和替诺福韦的有关物质在此波长下均没有吸收
。
另外，申请人还发现：采用关于拉米夫定片中有关物质的现有检测方法
(
详阅中国药典
2020
版第
776
页
)
去检测由多替拉韦
、
拉米夫定及替诺福韦组成的三方复方制剂，不能实现三方复方制剂中的多替拉韦和替诺福韦中有关物质的有效分离检测；并且，采用关于替诺福韦原料药中有关物质的现有检测方法
(
详阅国际药典第十版
)
去检测由多替拉韦
、
拉米夫定及替诺福韦组成的三方复方制剂，不仅对来自替诺福韦中的多个降解杂质不能实现有效分离和检测，而且该方法中有机相比例较高，会造成拉米夫定中几个高极性
、
易洗脱的杂质没有色谱保留，致使杂质之间分离很困难，也不能实现三方复方制剂中的多替拉韦和拉米夫定中有关物质的有效分离检测
。
[0015]由上所述可见，采用现有的对多替拉韦
、
拉米夫定
、
替诺福韦任意单一药物中的有关物质的现有检测方法均不能实现对由多替拉韦
、
拉米夫定
、
替诺福韦构成的三方复方制剂中至少
28
种有关物质的有效分离和检测，因此，本领域急需研发一种能准确分离检测多替拉韦
‑
拉米夫定
‑
替诺福韦复方制剂中各种有关物质的分析方法
。

技术实现思路

[0016]针对现有技术存在的上述问题和需求，本专利技术的目的是提供一种用于多替拉韦
‑
拉米夫定
‑
替诺福韦复方制剂中有关物质的检测方法，以实现快速
、
简便
、
准确分离检测多替拉韦
‑
拉米夫定
‑
替诺福韦复方制剂中来自多替拉韦
、
拉米夫定和替诺福韦的所有有关物质，以满足对多替拉韦
‑
拉米夫定
‑
替诺福韦复方制剂的质控需求
。
[0017]为实现上述专利技术目的，本专利技术采用如下技术方案：
[0018]一种用于多替拉韦
‑
拉米夫定
‑
替诺福韦复方制剂中有关物质的检测方法，采用高效液相色谱法测定，包括供试品溶液
、
对照品溶液及系统适用性溶液的制备，其特征在于，
[0019](
一
)
用于分离检测来自拉米夫定和替诺福韦中有关物质的色谱测试条件
A
为：
[0020]色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的
Polaris C18
‑
A
色谱柱，
4.6
×
250mm
，5μ
m
；
[0021]柱温：
23
～
27℃
；
[0022]流动相
A
：
pH
值为
3.9
～
4.1
且浓度为
0.025mol/L
的磷酸盐缓冲溶液；
[0023]流动相
B
：甲醇；本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种用于多替拉韦
‑
拉米夫定
‑
替诺福韦复方制剂中有关物质的检测方法，采用高效液相色谱法测定，包括供试品溶液
、
对照品溶液及系统适用性溶液的制备，其特征在于，
(
一
)
用于分离检测来自拉米夫定和替诺福韦中有关物质的色谱测试条件
A
为：色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的
Polaris C18
‑
A
色谱柱，
4.6
×
250mm
，5μ
m
；柱温：
23
～
27℃
；流动相
A
：
pH
值为
3.9
～
4.1
且浓度为
0.025mol/L
的磷酸盐缓冲溶液；流动相
B
：甲醇；以流动相
A
：流动相
B
的体积比为
97:3
～
99:1
为初始比例进行梯度洗脱；流速：
0.7
～
0.9mL/min
；检测波长：
265nm
；进样量：
10
μ
L
；
(
二
)
用于分离检测来自多替拉韦中有关物质的色谱测试条件
B
为：色谱柱：以苯基键合硅胶为填充剂的
Waters XSelect CSH Fluoro Phenyl
色谱柱，
4.6
×
150mm
，5μ
m
；柱温：
40℃
；流动相
A
：
0.186g/L
的
EDTA
水溶液，用稀磷酸调至
pH
＝
2.0
；流动相
B
：甲醇与四氢呋喃按体积比为
95:5
形成的混合溶液；以流动相
A
：流动相
B
的体积比为
55:45
为初始比例进行梯度洗脱；流速：
1.1mL/min
；检测波长：
320nm
；进样量：
30
μ
L。2.
根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，用于分离检测来自拉米夫定和替诺福韦中有关物质的梯度洗脱的条件如下：韦中有关物质的梯度洗脱的条件如下：
3.
根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，用于分离检测来自多替拉韦中有关物
质的梯度洗脱的条件如下：时间
/
分钟流动相
A/
％流动相
B/
％备注0～
25545
等度洗脱2～
3255
→
5045
→
50
线性梯度洗脱
32
～
375050
等度洗脱
37
～
4250
→
3550
→
65
线性梯度洗脱
42
～
523565
等度洗脱
52
～
5335
→
5565
→
45
线性梯度洗脱
53
～
605545
等度...

【专利技术属性】
技术研发人员：安晓霞，丁丽丹，沈婧，于苗苗，
申请(专利权)人：上海迪赛诺医药集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：