一种负载制造技术

本发明专利技术涉及生物医药技术领域，公开了一种负载

【技术实现步骤摘要】
一种负载A
‑
PRF可注射温敏水凝胶的制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及生物医药
，尤其涉及一种负载
A
‑
PRF
可注射温敏水凝胶的制备方法和应用
。

技术介绍

[0002]糖尿病足是指糖尿病患者因糖尿病所致的下肢远端神经病变和
/
或血管病变导致的皮肤及其深层组织破坏，常合并感染，严重者累及肌肉和骨组织，糖尿病足是糖尿病最严重的慢性并发症之一，具有高发病率
、
高致死率的特点，糖尿病足慢性创面治疗难度大
、
周期长
、
费用高，为患者
、
家庭和社会带来沉重负担
。
[0003]目前糖尿病足局部创面处理多是清创后采用纱布或一些功能性敷料覆盖，治疗中存在治愈率低
、
治疗时间长
、
花费大的问题，对于糖尿病足慢性创面来说，愈合是一个缓慢的过程，因此需要一种作用持久的生物材料缓慢地发挥作用而促进创面的愈合，富白细胞
‑
血小板纤维蛋白（
Leucocyte and Platelet Rich Fibrin
，
L
‑
PRF
）是第二代血小板凝胶制品，在一定程度上可以促进糖尿病足溃疡愈合，但治疗效果有待提高，因此，急需一种治疗效果好，且安全性高的药物
。
[0004]现有专利（公告号：
CN114209806B
）改良型富血小板纤维蛋白在制备治疗糖尿病足溃疡的药物中的应用，采用改良型富血小板纤维蛋白具有疏松的网状纤维蛋白结构，可以富含更多血小板及白细胞，能够更加持续地释放多种生长因子及细胞因子，更有利于组织再生和创伤修复，利用本专利技术所述的改良型富血小板纤维蛋白制备的药物能够缩短糖尿病足溃疡的愈合时间
、
提高愈合率，具有良好的治疗效果，也具有较高的安全性
。
[0005]针对于上述问题，现有专利给出了解决方案，但是在实际使用的过程中，
A
‑
PRF
膜中
A
‑
PRF
的可制备量并不巨大，有不规则难愈性创面需要治疗的病人难以将制备的
A
‑
PRF
膜充分填充
、
贴合不规则创面，存在一定的局限性，影响患者的组织再生和创伤修复，需要对此进行改进
。
[0006]为此，提出一种负载
A
‑
PRF
可注射温敏水凝胶的制备方法和应用
。

技术实现思路

[0007]本专利技术所要解决的技术问题在于，提供一种将冻干
A
‑
PRF
与温敏型水凝胶（壳聚糖
‑
β
‑
甘油磷酸钠）相结合，在促进创面血管化的同时填充
、
贴合不规则创面的可注射温敏型水凝胶的制备方法和应用
。
[0008]为了实现上述目的，本专利技术采用了如下技术方案：一种负载
A
‑
PRF
可注射温敏水凝胶的制备方法，包括如下步骤：
S1
：抽取健康
SD
大鼠腹主动脉血液并对其进行离心分离，分离后得到中间凝胶层为
A
‑
PRF
，而后将制得的
A
‑
PRF
冻干
、
研磨得到
A
‑
PRF
粉末备用；
S2
：壳聚糖粉末溶解在
0.1M
冰乙酸中
24h
制备
2%
的壳聚糖溶液，将
β
‑
甘油磷酸钠溶解在去离子水（
56%w / v
）中得到
β
‑
甘油磷酸钠溶液，然后将
β
‑
甘油磷酸钠溶液与壳聚糖溶
液进行冷却；
S3
：将
β
‑
甘油磷酸钠溶液在冰浴中轻轻搅拌并逐滴滴加到壳聚糖溶液中，之后将其放于冰上相融
30min
得到可注射的温敏型水凝胶，并于冰上向壳聚糖温敏水凝胶中加入
A
‑
PRF
，搅拌
10min
得到负载
A
‑
PRF
可注射温敏水凝胶
。
[0009]优选的，在所述
S1
中，大鼠腹主动脉血液抽取后并在
1min
内放入离心机中以
1500r/min
的转速离心
14min。
[0010]优选的，在所述
S1
中，
A
‑
PRF
于
‑
80℃
冰箱冷冻
24h
后，冻干机冻干
12h
，使用研磨棒和研磨皿研磨成粉末
。
[0011]优选的在所述
S2
中，
β
‑
甘油磷酸钠溶液与壳聚糖溶液分别储存在
4℃
冰箱冷却
。
[0012]优选的在所述
S3
中，
β
‑
甘油磷酸钠溶液与壳聚糖溶液的相融时间为
30min。
[0013]优选的在所述
S2
～
S3
中，可注射的温敏型水凝胶质量浓度为1～5％的中分子量壳聚糖溶液与质量浓度为
50
～
60
％的
β
‑
甘油磷酸钠水溶液的混合溶液，其中中分子量壳聚糖溶液和
β
‑
甘油磷酸钠水溶液的体积比为
0.5
～4：6～
9.5
，其中中分子量壳聚糖的分子量为
300000
～
500000Da。
[0014]优选的，在所述
S3
中，
A
‑
PRF
冻干粉末与可注射的温敏型水凝胶的搅拌混合时间为
10min。
[0015]优选的，在所述
S1
～
S3
中，
A
‑
PRF
的使用浓度为
1%—20%
，壳聚糖的使用浓度
1%—3%
，
β
‑
甘油磷酸钠的使用浓度为
56%
，壳聚糖：
β
‑
甘油磷酸钠的比例为
3:1
‑
9:1。
[0016]一种负载
A
‑
PRF
可注射温敏水凝胶的应用，所述负载
A
‑
PRF
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种负载
A
‑
PRF
可注射温敏水凝胶的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1
：抽取健康
SD
大鼠腹主动脉血液并对其进行离心分离，分离后得到中间凝胶层为
A
‑
PRF
，而后将制得的
A
‑
PRF
冻干
、
研磨得到
A
‑
PRF
粉末备用；
S2
：壳聚糖粉末溶解在
0.1M
冰乙酸中
24h
制备
2%
的壳聚糖溶液，将
β
‑
甘油磷酸钠溶解在去离子水（
56%w/v
）中得到
β
‑
甘油磷酸钠溶液，然后将
β
‑
甘油磷酸钠溶液与壳聚糖溶液进行冷却；
S3
：将
β
‑
甘油磷酸钠溶液在冰浴中轻轻搅拌并逐滴滴加到壳聚糖溶液中，之后将其放于冰上相融
30min
得到可注射的温敏型水凝胶，并于冰上向壳聚糖温敏水凝胶中加入
A
‑
PRF
，搅拌
10min
得到负载
A
‑
PRF
可注射温敏水凝胶
。2.
根据权利要求1所述的一种负载
A
‑
PRF
可注射温敏水凝胶的制备方法，其特征在于，在所述
S1
中，大鼠腹主动脉血液抽取后并在
1min
内放入离心机中以
1500r/min
的转速离心
14min。3.
根据权利要求1所述的一种负载
A
‑
PRF
可注射温敏水凝胶的制备方法，其特征在于，在所述
S1
中，
A
‑
PRF
于
ꢀ‑
80℃
冰箱冷冻
24h
后，冻干机冻干
12h
，使用研磨棒和研磨皿研磨成粉末
。4.
根据权利要求1所述的一种负载
A
‑
PRF
可注射温敏水凝胶的制备方法，其特征在于，在所述

【专利技术属性】
技术研发人员：柴家科，荀浩怡，苏小薇，迟云飞，胡方超，吴育寿，刘翔宇，刘甜，韩绍芳，段红杰，曲毅睿，郑金光，魏斌，程跃，
申请(专利权)人：中国人民解放军总医院第四医学中心，
类型：发明
国别省市：