一种牛奶中制造技术

本发明专利技术公开了一种牛奶中

【技术实现步骤摘要】
一种牛奶中DHA的检测方法


[0001]本专利技术属于乳制品检测
，具体是一种牛奶中
DHA
的检测方法
。

技术介绍

[0002]气相色谱（
GC
）是一种分离
、
分析仪器，经过多年的技术发展，现在已经被广泛的运用在化工
、
医药
、
农业
、
科研等行业中，气相色谱主要是利用物质的沸点
、
极性及吸附性质的差异来实现混合物的分离：待测样品进入汽化室高温转化为气态后被载气（通常为惰性气体）带入色谱柱
。
样品进入色谱柱后，化合物因自身分子量
、
极性疏水性等物理化学特性，和色谱柱中的填充材料相互作用发生分离，依次通过检测器，根据出锋时间和峰面积计算相应脂肪酸浓度
。
[0003]相关技术中
DHA
乳制品
DHA
含量通常低于
30mg/100g
，而不同牛奶不含
DHA
或其含量低于检测下限，相关技术中
DHA
检测方法，精密度较差，且无法区分原生
DHA
和配方
DHA
牛奶
。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种牛奶中
DHA
的检测方法，以解决上述
技术介绍
中提出的问题和缺陷的至少一个方面
。
[0005]具体如下，本专利技术公开了一种牛奶中
DHA
的检测方法，包括以下步骤：
S1、
将待测样品酶解处理后，制得酶解液；
S2、
将所述酶解液
、
焦性没食子酸
、
内标品和酸液混合，制得第一混合物；
S3、
将所述第一混合物采用有机溶剂提取后，收集有机相，浓缩，制得第二混合物；
S4、
将所述第二混合物和碱的醇溶液混合后皂化，制得第三混合物；
S5、
将所述第三混合物和三氟化硼甲醇溶液混合后甲酯化，制得第四混合物；
S6、
将所述第四混合物
、
氯化钠溶液
、
正己烷和硫酸钠混合后，制得气相色谱进样品；
S7、
将所述气相色谱进样品进行气相色谱检测；所述气相色谱检测的温度梯度如下：温度为
90℃~100℃
，时间为
13min~15min
；温度从
90℃~100℃
升高至
170℃~180℃
，升温时间为
7min~8min
；温度为
170℃~180℃
，时间为
6min~7min
；温度从
170℃~180℃
升高至
190℃~200℃
，升温时间为
18min~20min
；温度为
190℃~200℃
，时间为
18min~20min
；温度从
190℃~200℃
升高至
220℃~230℃
，升温时间为
7min~8min
；温度为
220℃~230℃
，时间为
10min~11min。
[0006]根据本专利技术检测方法技术方案中的一种技术方案，至少具备如下有益效果：本专利技术根据所测物质的特性，重新设定检测方法并进行了创新和优化，以提高原生
DHA
牛奶的检测精密度
。
[0007]牛奶中的
DHA
为甘油三脂型，
DHA
等多不饱和脂肪酸更大概率链接在
sn
‑2位，可根据这一特性，在检测方法前处理过程中，加入酶解步骤，以提高牛奶中
DHA
的提取率
。
[0008]甘油三酯为主要天然存在形式，其中
DHA
能结合在甘油三酯的不同位点上，依次被命名为
Sn
‑
1、Sn
‑
2、Sn
‑3；鱼油中有
44.79 % ~ 72.99 %
的
DHA
位于2号位，藻油则是
31.66 % ~ 42.09 %
，而人乳则是
52.63~65.15%
，牛乳与人乳接近，且较为稳定，根据这一特性可将牛乳中的甘油三酯
DHA
通过酶解作用形成游离
DHA
，从而增加检测的灵敏性和准确性
。
[0009]牛奶中的脂质经充分酶解酸解，分解为游离脂肪酸，乙醚
‑
石油醚提取，氢氧化钾甲醇皂化，三氟化硼甲醇甲酯化生成脂肪酸甲酯
。
在样品加入内标品，以提高分析的准确性
。
[0010]根据本专利技术的一些实施方式，所述酶解处理选用脂肪酶
。
[0011]根据本专利技术的一些实施方式，所述内标品为
C
11
或
C
13
中的至少一种
。
[0012]根据本专利技术的一些实施方式，所述内标品为十一碳酸甲酯
。
[0013]根据本专利技术的一些实施方式，所述酶解的温度为
30℃~40℃。
[0014]根据本专利技术的一些实施方式，所述酶解的时间为
15min~20min。
[0015]根据本专利技术的一些实施方式，步骤
S1
中所述待测样品和脂肪酶的质量比为
15~25:1。
[0016]根据本专利技术的一些实施方式，所述待测样品和所述焦性没食子酸酸的质量比为
15~25:1。
[0017]根据本专利技术的一些实施方式，所述待测样品和所述酸液的质量体积比为
15g~25g
：
100mL。
[0018]根据本专利技术的一些实施方式，所述酸液为盐酸
。
[0019]根据本专利技术的一些实施方式，所述盐酸的质量分数为
36%~38%。
[0020]根据本专利技术的一些实施方式，所述待测样品和所述内标品的质量体积比为
1.5g~2.5g
：
1mL。
[0021]根据本专利技术的一些实施方式，所述有机溶剂包括乙醇
、
乙醚和石油醚中的至少一种
。
[0022]根据本专利技术的一些实施方式，所述石油醚的馏程为
30℃~60℃。
[0023]根据本专利技术的一些实施方式，所述有机溶剂提取，包括以下步骤：
S01、
将所述内标液
、
乙醇水溶液和乙醚混合后，混匀，制得第一混合物；
S02、
将第一混合物和石油醚混合，收集第一上清液和第一下层液；
S03、
将第一下层液和石油醚混合，收集第二上清液和第二下层液；
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种牛奶中
DHA
的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、
将待测样品酶解处理后，制得酶解液；
S2、
将所述酶解液
、
焦性没食子酸
、
内标品和酸液混合，制得第一混合物；
S3、
将所述第一混合物采用有机溶剂提取后，收集有机相，浓缩，制得第二混合物；
S4、
将所述第二混合物和碱的醇溶液混合后皂化，制得第三混合物；
S5、
将所述第三混合物和三氟化硼甲醇溶液混合后甲酯化，制得第四混合物；
S6、
将所述第四混合物
、
氯化钠溶液
、
正己烷和硫酸钠混合后，制得气相色谱进样品；
S7、
将所述气相色谱进样品进行气相色谱检测；所述气相色谱检测的温度梯度如下：温度为
90℃~100℃
，时间为
13min~15min
；温度从
90℃~100℃
升高至
170℃~180℃
，升温时间为
7min~8min
；温度为
170℃~180℃
，时间为
6min~7min
；温度从
170℃~180℃
升高至
190℃~200℃
，升温时间为
18min~20min
；温度为
190℃~200℃
，时间为
18min~20min
；温度从
190℃~200℃
升高至
220℃~230℃
，升温时间为
7min~8min
；温度为
220℃~230℃
，时间为
10min~11min。2.
根据权利要求1所述的牛奶中
DHA
的检测方法，其特征在于，所述酶解处理选用脂肪酶
。3.
根据权利要求1所述的牛奶中
DHA
的检测方法，其特征在于，所述内标品为
C11
或
C13。4.
根据权利要求1所述的牛奶中
DHA
的检测方法，其特征在于，所述气相色谱检测的进样口温度为
200℃~220℃。5.
根据权利要求1所述的牛奶中
DHA
的检测方法，其特征在于，所述气相色谱检测的检测器温度为
240℃~250℃。6.
...

【专利技术属性】
技术研发人员：张运强，柳高峰，周书伟，周探科，师家伟，
申请(专利权)人：湖南加农正和生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：