一种尿液保存试剂制造技术

本发明专利技术属于生物样本保存技术领域，更具体地，涉及一种尿液保存试剂

【技术实现步骤摘要】
一种尿液保存试剂、保存方法及应用


[0001]本专利技术属于生物样本保存
，更具体地，涉及一种尿液保存试剂
、
保存方法及应用
。

技术介绍

[0002]尿液是具有重要意义的排泄物，利用尿液中的脱落细胞检测基因组遗传信息和表观遗传信息的变化用来检测尿路上皮癌成为更加便捷和便于普及的检测方式
。
基于此体外检测技术的发展，使得用于居家检测的尿路上皮癌检测试剂盒得以制备及应用，供检测者居家即实现便捷取样
。
而在实际的应用过程中，尿液样本从取样到检测可能需要运输保存达数天，尿液样本在常温下长时间存放会有细菌生长，而冷链运输和保存会大大提高成本
。
而且，本身有肾或膀胱的疾病或感染的患者，其尿液中病原体或细菌的含量也会增多
。
细菌等微生物的
DNA
是影响人源
DNA
提取的干扰项，影响检测的灵敏度和特异性，从而影响到尿液某些检测项目的结果
。
尿液中微生物的种类繁多，既包括革兰氏阴性菌，又包括革兰氏阳性菌
。
此外，尿液中
DNA
核酸酶的活性比血液中高得多，非常容易引起尿液中
cfDNA
的降解
。
这些问题给尿液样本的保存带来了很大的困难
。
[0003]因此，能够在常温下长效抑菌而又不影响脱落细胞
DNA
提取的尿液保存试剂，对于以尿液为样本的泌尿系统疾病的分子诊断技术的应用有重要意义
。
目前现有的尿液保存试剂大多只能稳定保存尿液样本7天，保存时间较短，无法满足长期稳定保存尿液样本的需求，进而影响以尿液为样本的泌尿系统疾病的分子诊断
。

技术实现思路

[0004]针对现有技术的缺陷，本专利技术的目的在于提供一种尿液保存试剂
、
保存方法及应用，以解决现有尿液保存试剂生物安全性低
、
能够稳定保存尿液样本的时间较短，以及对尿液样本中游离核酸的稳定保存有待进一步提高等的技术问题
。
[0005]为实现上述目的，本专利技术提供了一种尿液保存试剂，其包含
0.01wt
％～
3wt
％抑菌剂
、2wt
％～
10wt
％醛基猝灭剂
、5mmol/L
～
50mmol/L
酶抑制剂
、0.1wt
％～
5wt
％渗透剂
、20mmol/L
～
30mmol/L pH
缓冲剂和超纯水；
[0006]所述抑菌剂包括
ε
‑
聚赖氨酸和其它抑菌剂；所述其他抑菌剂选自重氮烷基脲
、
柠檬酸钠
、
咪唑烷基脲
、
多聚甲醛
、
福尔马林
、
乙内酰脲和三硝基甲烷中的一种或多种
。
[0007]优选地，所述抑菌剂包括
ε
‑
聚赖氨酸
、
重氮烷基脲和柠檬酸钠
。
[0008]进一步优选地，所述
ε
‑
聚赖氨酸在所述尿液保存试剂中的质量百分数为
0.04wt
％～
0.1wt
％；所述重氮烷基脲在所述尿液保存试剂中的质量百分数为
0.5wt
％～
1wt
％；所述柠檬酸钠在所述尿液保存试剂中的质量百分数为
0.1wt
％～
0.5wt
％
。
[0009]优选地，所述醛基猝灭剂为甘氨酸；所述甘氨酸在所述尿液保存试剂中的质量百分数为
5wt
％～
10wt
％
。
[0010]优选地，所述酶抑制剂选自乙二胺四乙酸
、
羟乙基乙二胺三乙酸
、
二硫苏糖醇
、
柠
檬酸
、
草酸盐
、
金精三羧酸
、
酒石酸
、
葡糖二酸
、
或它们中的任何一种的盐
。
优选地，所述渗透剂选自甘露糖醇
、
山梨糖醇
、
葡萄糖
、
氯化钠
、
氯化钾
、
溴化钠
、
丙酸钠
、
丙酸钾
、
丙酸铵
、
草酸盐和醋酸盐中的一种或多种
。
[0011]优选地，所述
pH
缓冲剂选自
Tris
‑
HCl、
磷酸盐
、
乙酸盐
、
硼酸盐和碳酸盐中的一种或多种，所述尿液保存试剂的
pH
选自
7.0
～
8.0。
[0012]进一步优选地，所述尿液保存试剂包括抑菌剂
、5wt
％～
10wt
％甘氨酸
、10mmol/L
～
40mmol/L
乙二胺四乙酸
、0.5wt
％～
2wt
％甘露糖醇
、20mmol/L
～
30mmol/L Tris
‑
HCl
和超纯水，
pH
为
7.0
～
8.0
；所述抑菌剂包括
0.04wt
％
ε
‑
聚赖氨酸
、1wt
％重氮烷基脲和
0.3wt
％柠檬酸钠
。
[0013]本专利技术还提供了一种尿液样本保存方法，包括如下步骤：
[0014]将所述尿液保存试剂与尿液样本按照
1:(6
‑
10)
的体积比混匀，保存；所述保存的温度为
‑
20℃
～
35℃。
[0015]本专利技术还提供了一种尿路上皮癌检测产品，其包括所述尿液保存试剂
。
[0016]优选地，所述尿路上皮癌检测产品还包括
DNA
甲基化转化试剂
、PCR
反应试剂
、
阳性对照品
、
阴性对照品
、
内参基因的检测引物对和检测探针中的一种或多种
。
[0017]优选地，所述
PCR
反应试剂包括用于检测目标区域甲基化水平的引物对和检测探针，所述目标区域选自
Chr10:101140073
‑
101140523、Chr6:27495288
‑
27495605
和
Chr10:17229155...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种尿液保存试剂，其特征在于，包含
0.01wt
％～
3wt
％抑菌剂
、2wt
％～
10wt
％醛基猝灭剂
、5mmol/L
～
50mmol/L
酶抑制剂
、0.1wt
％～
5wt
％渗透剂
、20mmol/L
～
30mmol/L pH
缓冲剂和超纯水；所述抑菌剂包括
ε
‑
聚赖氨酸和其它抑菌剂；所述其他抑菌剂选自重氮烷基脲
、
柠檬酸钠
、
咪唑烷基脲
、
多聚甲醛
、
福尔马林
、
乙内酰脲和三硝基甲烷中的一种或多种
。2.
根据权利要求1所述的尿液保存试剂，其特征在于，所述抑菌剂包括
ε
‑
聚赖氨酸
、
重氮烷基脲和柠檬酸钠；所述
ε
‑
聚赖氨酸在所述尿液保存试剂中的质量百分数为
0.04wt
％～
0.1wt
％；所述重氮烷基脲在所述尿液保存试剂中的质量百分数为
0.5wt
％～
1wt
％；所述柠檬酸钠在所述尿液保存试剂中的质量百分数为
0.1wt
％～
0.5wt
％
。3.
根据权利要求1所述的尿液保存试剂，其特征在于，所述醛基猝灭剂为甘氨酸；所述甘氨酸在所述尿液保存试剂中的质量百分数为
5wt
％～
10wt
％
。4.
根据权利要求1所述的尿液保存试剂，其特征在于，所述酶抑制剂选自乙二胺四乙酸
、
羟乙基乙二胺三乙酸
、
二硫苏糖醇
、
柠檬酸
、
草酸盐
、
金精三羧酸
、
酒石酸
、
葡糖二酸
、
或它们中的任何一种的盐；所述渗透剂选自甘露糖醇
、
山梨糖醇
、
葡萄糖
、
氯化钠
、
氯化钾
、
溴化钠
、
丙酸钠
、
丙酸钾
、
丙酸铵
、
草酸盐和醋酸盐中的一种或多种
。5.
根据权利要求1所述的尿液保存试剂，其特征在于，所述
pH
缓冲剂选自
Tris
‑
HCl、
磷酸盐

【专利技术属性】
技术研发人员：樊健，李学松，郭洪，蔡迪，董兰兰，张良禄，
申请(专利权)人：武汉艾米森生命科技有限公司，
类型：发明
国别省市：