一种沙门氏菌检测系统及方法技术方案

技术编号:39744090 阅读:7 留言:0更新日期:2023-12-17 23:43
本发明专利技术公开了一种沙门氏菌检测系统及方法,属于微生物检测领域

【技术实现步骤摘要】
一种沙门氏菌检测系统及方法


[0001]本专利技术属于微生物检测领域,具体涉及一种沙门氏菌检测系统及方法


技术介绍

[0002]公开该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解,而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术

[0003]目前,沙门氏菌检测基准方法都是以预增菌

增菌

分离和鉴定为基本程序,在各种培养基上略有区别

但这些基准方法都比较耗费时间

人力和物力,而其中大部分人力和时间都是应用于阴性样本,包括对大量的阴性样品投入的分离培养工作和对大量的疑似菌落投入的鉴定工作,虽然耗费大量人力物力和时间,却又无法省略

为了节约人力和时间,科研人员研发了很多快速检测方法,原理基本上都是以
PCR
和抗原抗体反应为基础,在一些领域发挥了重要作用,但是在某些方面仍不可替代分离培养方法,原因为:
1、PCR
和抗原抗体只能针对有限的目标基因或抗原,其在沙门氏菌
2000
多种血清型的覆盖度上与分离培养法无法比拟,即敏感性方面逊于分离培养法,因此无法撼动分离培养法作为沙门氏菌检测金标准的地位;
2、
某些重要项目上,取得活菌是确凿证据,
PCR
和抗原抗体不涉及活菌

[0004]专利
CN 102517375A
公开了一种利用毛细管培养法检测微生物的方法,建立了毛细管培养检测微生物的基本程序和方法

采用其公开的方案检测沙门氏菌时,存在如下问题:
(1)
使用
MSRV
作为培养基时,沙门氏菌生长阳性后,仅靠沙门氏菌自身生长的菌苔进行阳性判断,对于沙门氏菌量要求比较大,部分生长量比较少的样本,会出现假阴性结果,检测结果不够准确;
(2)
毛细管管径较细,培养阳性后,需要将毛细管掰断进行接种,操作难度较大;
(3)
毛细管管径较细,罐装培养基难度较大,不利于规模化生产;
(4)
毛细管,毛细管支持结构,毛细管帽,增菌液容器,增菌液容器盖,结构设计比较复杂,集成度较差,在使用时人工操作装配比较复杂,比较费时费力


技术实现思路

[0005]为了解决现有技术的不足,本专利技术的目的是提供一种沙门氏菌检测系统及方法,其可用于检测或筛选多种样本中的沙门氏菌,将预增菌和增菌过程合二为一,具有快速

高效

省时省力

特异性好

敏感性强等优点

[0006]为了实现上述目的,本专利技术的技术方案为:
[0007]本专利技术的第一个方面,提供一种沙门氏菌检测系统,包括细管和细管内装填的培养基;
[0008]所述细管包括接液口和主管,接液口与主管相连通,接液口的内径小于主管的内径;所述培养基装填在所述主管内;
[0009]所述培养基为含
0.005
%~
0.01

TTC

MSRV
培养基,质量百分数;
[0010]所述培养基中含有选择性杂菌抑制剂

[0011]TTC
,化学名为
2,3,5

三苯基氯化四氮唑,别名氯化三苯四氮唑,分子式为
C
19
H
15
ClN4,结构式如下:
[0012][0013]TTC
在微生物检验中起染色作用,其原理是
TTC
和活细胞线粒体内的琥珀酸脱氢酶反应,生成紫红色的还原产物,使菌落变紫红色,可用于菌落计数中以便于菌落计数

[0014]在本专利技术的一些实施例中,所述主管为内径
4mm

8mm
,长度
5cm

25cm
的直管

管径小,培养基填充量少,节约培养基,而且在培养过程中切面横向扩散影响小,管长在
5cm

25cm
,既能较好的选择性分离沙门氏菌,又能在较短时间内分离

[0015]在本专利技术的一些实施例中,所述接液口为细管型接液口,具体为内径
0.5mm

3mm
,长度
2mm

10mm
的直管

管径小,易于通过虹吸将待测样本吸入

[0016]在本专利技术的一些实施例中,所述接液口和主管通过扩散管连接;所述扩散管呈喇叭形,所述扩散管的内径从接液口端至主管端逐渐增大

所述扩散管的材质均为玻璃

透明塑料或透明合成树脂中的一种

[0017]在本专利技术的一些实施例中,所述毛细管的两端均设有密封帽;优选的,所述密封帽为气密性橡胶或气密性硅胶材质的帽或塞

[0018]在本专利技术的一些实施例中,所述接液口和主管的材质均为玻璃

透明塑料或透明合成树脂中的一种;材质要求硬质不透水,不透气
(
根据沙门氏菌好氧情况确定的,因其为一类革兰氏阴性兼性厌氧细菌,遂选定不透气
)
;优选使用透明材质,透明材质易于观察培养基装填效果,也便于终点判定

最优选耐高压硬质无毒透明材料

[0019]在本专利技术的一些实施例中,所述沙门氏菌检测系统还包括螺纹盖,所述螺纹盖设置于所述主管上,螺纹盖的位置高于主管内的培养基液面;主管贯穿螺纹盖的盖帽并与其一体化连接,螺纹盖的盖身朝向接液口端,盖身内壁设有螺纹;
[0020]优选的,所述螺纹盖的直径设置为可旋接任意管径的管

[0021]在本专利技术的一些实施例中,所述沙门氏菌检测系统还包括管,所述管用于装载液态待检样本的增菌液,所述管与螺纹帽旋接,所述主管和接液口垂直插入管内

[0022]其中,所述增菌液选自缓冲蛋白胨水
(BPW)、RVS
肉汤
、MRVS
肉汤等,其均为现有技术中已有的常规产品

[0023]在本专利技术的一些实施例中,所述选择性杂菌抑制剂选自胆盐

脱氧胆酸钠



碘化钾

煌绿

孔雀绿

亚硒酸盐

胱氨酸

质量浓度在1%以上的氯化钠溶液

吖啶黄

萘啶酮酸

月桂基硫酸盐

氯化锂

结晶紫

中性红...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种沙门氏菌检测系统,其特征在于,包括细管和细管内装填的培养基;所述细管包括接液口和主管,接液口与主管相连通,接液口的内径小于主管的内径;所述培养基装填在所述主管内;所述培养基为含
0.005
%~
0.01

TTC

MSRV
培养基,质量百分数;所述培养基中含有选择性杂菌抑制剂
。2.
根据权利要求1所述的沙门氏菌检测系统,其特征在于,所述主管为内径
4mm

8mm
,长度
5cm

25cm
的直管;所述接液口为内径
0.5mm

3mm
,长度
2mm

10mm
的直管;优选的,所述接液口和主管通过扩散管连接;所述扩散管呈喇叭形或垂直线型,所述喇叭型扩散管的内径从接液口端至主管端逐渐增大
。3.
根据权利要求1所述的沙门氏菌检测系统,其特征在于,所述细管的两端均设有密封帽;优选的,所述密封帽为气密性橡胶或气密性硅胶材质的帽或塞
。4.
根据权利要求1所述的沙门氏菌检测系统,其特征在于,所述接液口和主管的材质均为玻璃

透明塑料或透明合成树脂中的一种
。5.
根据权利要求1所述的沙门氏菌检测系统,其特征在于,所述沙门氏菌检测系统还包括螺纹盖,所述螺纹盖设置于所述主管上,螺纹盖的位置高于主管内的培养基液面;主管贯穿螺纹盖的盖帽并与其一体化连接,螺纹盖的盖身朝向接液口端,盖身内壁设有螺纹;优选的,所述螺纹盖的直径设置为可旋接任意管径的管
。6.
根据权利要求5所述的沙门氏菌检测系统,其特征在于,所述沙门氏菌检测系统还包括管,所述管用于装载液态待检样本的增菌液,所述管与螺纹帽旋接,所述主管和接液口垂直插入管内
。7.
根据权利要求1所述的沙门氏菌检测系统,其特征在于,所述选择性杂菌抑制剂选自胆盐

脱氧胆酸钠



碘化钾

煌绿

孔雀绿

亚硒酸盐

胱氨酸

质量浓度在1%以上的氯化钠溶液

吖啶黄

萘啶酮酸

月桂基硫酸盐

氯化锂

结晶紫

中性红

伊红

美兰

...

【专利技术属性】
技术研发人员:李娜刘辉陈永昌杜庆宝葛安山王教坤刘金秋
申请(专利权)人:青岛中创汇科生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

网友询问留言 已有0条评论
  • 还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。

1