一种新型冠状病毒抗体检测试纸条制造技术

本发明专利技术提供了一种新型冠状病毒抗体免疫胶体金快速检测试纸条，用于检测受检样品中是否含有新型冠状病毒的抗体

【技术实现步骤摘要】
一种新型冠状病毒抗体检测试纸条


[0001]本专利技术属于生物医学检测
，更具体地说，它涉及一种新型冠状病毒
N
蛋白抗体快速检测试纸条
。

技术介绍

[0002]新型冠状病毒
(2019
‑
nCoV)
是已知能感染人的第7种冠状病毒，
2019
‑
nCoV
传播途径是呼吸道的传播和接触传播
。
感染者会出现程度不同的症状，最轻微的是无任何外在症状，这类携带病毒者被称为无症状感染者；有的感染者只是发烧或轻微咳嗽，有的感染者则会发展为肺炎，严重的感染者甚至死亡
。
新冠病毒的核衣壳蛋白
(N
蛋白
)
是
SARS
‑
CoV
‑2感染后表达量最大的蛋白，在病毒的装配过程中位于病毒颗粒的核心部分，以与基因组
RNA
结合的形式存在，并在病毒
RNA
的转录和复制过程中与
RNA
相互作用
。
但
N
蛋白相较于其他的如
S、M
蛋白更保守，
N
蛋白不仅能够诱导体液免疫应答，也能诱导细胞免疫应答
。
[0003]新型冠状病毒目前有三种检测手段，分别为：核酸检测
、
抗体检测
、
抗原检测
。
核酸检测是确定新冠病毒感染的金标准检测手段，这种检测方法的缺点是核酸检测需要实验室
、
仪器设备
、
试剂耗材和专业技术人员，耗时较长
。
显然，尚需要一种快速
、
简便
、
不依赖专用的仪器和设备，不需要专门的实验室和专业人员培训的检测方法
。
新冠病毒感染大量产生的
N
蛋白在感染者体内较容易刺激机体产生可被检测的抗体量，因此，本专利技术提供了一种用于新冠病毒
N
蛋白抗体快速检测的试纸条，该试纸条采用
N
蛋白胶体金标记技术对受检者体内是否产生
N
蛋白抗体进行检测，检测时长仅需5‑
10
分钟，使用者可自行检测，从而可节约大量的医疗资源，降低个体在医院感染的风险，有助于对大规模人群进行检测排查
。
此外，在使用者注射传统疫苗后，
N
蛋白抗体的检测可用于对疫苗保护效果的评估，为对新冠疫情防控措施的采取和决策提供依据
。
相比之下，采用针对新冠病毒相关抗原的抗体标记技术组装的新冠病毒抗原快速检测试纸条，需要进行抗原制备
、
免疫动物
、
杂交瘤技术筛选单克隆抗体及相关抗体的制备等繁杂的过程，研发周期长
。
本专利技术仅需要制备
N
蛋白抗原，绕过了耗时的单克隆抗体的筛选过程
。
本专利技术提供的一种用于新冠病毒
N
蛋白抗体快速检测试纸条有效地节省了研发时间，可快速应对疫情
。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是提供一种新冠病毒抗体快速检测试纸条
。
[0005]本专利技术采用双抗原夹心法，通过抗原抗体的特异性反应的原理，使用同一种抗原对目标抗体进行检测
。
该试纸条无需使用相关仪器，适用于不同场景的现场检测，且检测时间短
、
检测灵敏度高，进而实现现场高准确度快检
。
[0006]本专利技术保护的新冠病毒抗体快速检测试纸条，该试纸条包括
PVC
胶板以及依次相互搭接粘贴在
PVC 胶板上的样品垫
、
结合垫
1、
结合垫
2、
反应垫和吸水垫
。
所述结合垫1中包被胶体金标记的
N
蛋白抗原，所述结合垫2中包被胶体金标记的兔抗体，所述反应垫上设置了检测线和质控线，所述检测线上包被有
N 蛋白抗原，所述质控线上包被羊抗兔
IgG
二抗
。
[0007]本专利技术通过双抗原夹心法检测新冠病毒
N
蛋白抗体，若受试者血清中含有新冠病毒
N
蛋白抗体时，会与结合垫1上胶体金标记的
N
蛋白结合，侧向层析到达检测线
T
位置，再与检测带上的
N
蛋白结合，导致胶体金纳米颗粒聚集于检测线
T
而显色，若受试者血清中没有新冠病毒
N
蛋白抗体时，不会与结合垫 1
上胶体金标记的
N
蛋白结合，则胶体金无法聚集于检测线
T
，因此检测线
T
不显色
。
结合垫2含有胶体金标记的兔抗体，可随侧向层析抵达质控线
C。
质控线
C
上包被有羊抗兔抗体，可捕捉结合垫2上的兔抗体使胶体金纳米颗粒聚集，因此质控线显色
。
本专利技术提供的试纸条可在
15min
反应结束，检测者通过观察试纸条检测线
T
与质控线
C
显色情况判断检测结果
。
若
C
显色，
T
不显色为阴性；
C
显色，
T
显色为阳性； C
不显色，无论
T
显色与否，结果均判定无效
。
[0008]优选的，所述包被抗体固相硝酸纤维素
NC
膜内包被的检测线
T
和质控线
C
，其中，所述检测线由重组
N
蛋白包被于硝酸纤维素
NC
膜上作为检测线，最佳包被
N
蛋白量为
0.1mg/mL
的
N
蛋白，按
2.0
μ
L/cm 涂覆于检测线；所述质控线用羊抗兔
IgG
二抗包被于硝酸纤维素
NC
膜作为质控线，最佳包被量为
1.0 mg/mL
，按
2.0
μ
L/cm
涂覆于质控线
。
[0009]优选地，结合垫1中包含有胶体金标记
N
蛋白，标记条件为：
pH 7.5
，每毫升胶体金
7.2
μ
g。
结合垫 2
中包含有胶体金标记兔抗体，标记条件为：
pH 6.0
，每毫升胶体金
9.6
μ
g
兔抗体
。
胶体金重悬液为5％蔗糖，
0.05
％
Tween 20
，
0.10
％
PVP。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种新型冠状病毒抗体免疫胶体金检测试纸条，其特征在于，在塑料底板
(1)
一端起相互交叠顺序粘贴样品垫
(2)
，结合垫
1(3)
，结合垫
2(4)
，反应垫
(5)
和吸水垫
(6)
，硝酸纤维素
NC
膜
(5)
上包被有检测线
T(7)
和质控线
C(8)。2.
如权利要求1所述的一种新型冠状病毒抗体免疫胶体金检测试纸条，其特征在于所述的结合垫1含有胶体金标记的新型冠病毒
N
蛋白
。3.
如权利要求1所述的一种新型冠状病毒抗体免疫胶体金检测试纸条，其特征在于所述的结合垫2含有胶体金标记的兔抗体
。4.
如权利要求1所述的一种新型冠状病毒抗体免疫胶体金检测试纸条，其特征在...

【专利技术属性】
技术研发人员：王东升，刘博，支德娟，王琴琴，朱海，
申请(专利权)人：兰州大学，
类型：发明
国别省市：