一种免疫增强剂的制备及应用制造技术

一种免疫增强剂的制备及应用

【技术实现步骤摘要】
一种免疫增强剂的制备及应用


[0001]本专利技术属于食用菌发酵
，具体涉及一种从牛樟芝发酵液中提取的免疫增强剂
。

技术介绍

[0002]过去的几十年中，以抗生素为代表的具有抗菌
、
促生长功效的添加剂被大量用于畜禽养殖，以达到缩短生长周期
、
降低发病率的目的
。
但在实际应用中，抗药细菌出现的速度逐渐超出了新型抗生素的研制速度，并且通过动物
‑
食物链条影响了人类的健康，耐药性如今已成为全社会最为关注的公共卫生问题
。
随着越来越多的国家开始禁止在畜禽养殖中使用抗生素，疫病的防控又成为养殖业高质量发展的瓶颈
。
近年来，研究人员一直在寻找合适的替抗产品，以实现在不使用抗生素的条件下提高动物的生长性能和免疫性能
。
益生菌
、
有机酸
、
活性肽
、
蛋白酶
、
药用真菌等都是研究热点，其中药用真菌以其独特的功效成为新型饲料添加剂和免疫增强剂的潜在研究目标
。
相关研究表明，多种真菌活性成分或制剂能够有效促进动物的免疫性能，降低发病率
、
提高成活率
。
[0003]牛樟芝（
Antrodiacamphorata
）是我国台湾省特有的珍稀药用真菌，隶属于担子菌门薄孔菌属
。
牛樟芝菌中含有多种生理活性物质，主要包括樟芝多糖
、
三萜类物质
、
泛醌类衍生物
、
马来酸与琥珀酸等，具有保肝
、
抗炎
、
抗氧化
、
降血压
、
抑制肿瘤
、
调节免疫等多种功效，如此优良的营养价值和保健作用，使得樟芝菌的开发前景十分广阔
。
当前对于牛樟芝活性物质的研究主要集中在多糖
、
萜类物质
、
马来酸与琥珀酸及其衍生物和泛醌类化合物
。
泛醌类化合物自
2007
年被发现以来，共鉴定出7种物质，分别为安卓奎诺尔（
Antroquinonol
）
、Antroquinonol
‑
B、4
‑
acetyl
‑
Antroquinonol
‑
B、Antroquinonol
‑
D、Antroquinonol LT1、Antroquinonol LT2
和
Antroquinonol LT3。
[0004]研究发现，
Antroquinonol
具有抗癌
、
抗炎
、
抗氧化应激的作用，但对于其是否具有免疫增强作用尚不清楚
。
相反，在其抗炎生理功能中，展现的是免疫抑制功能
。
此外，在牛樟芝所有的功能成分中，就免疫增强作用而言，多糖中的
β
‑
1,3
‑
D
‑
葡聚糖
、
萜类物质中的三萜类是主要成分，但应用也局限于体外细胞和小鼠
。
所以，以家禽为研究对象进行
Antroquinonol
免疫增强作用的研究至今尚属空白，且已有研究并不支持相关工作的开展
。

技术实现思路

[0005]针对目前家禽养殖业缺乏安全
、
高效
、
绿色免疫增强剂和
Antroquinonol
功效研究的缺失及应用范围有限的问题，本专利技术提供一种免疫增强剂，以牛樟芝深层发酵的发酵液为原料，主要成分为安卓奎诺尔（
Antroquinonol
），对家禽的免疫系统和免疫反应均具有显著的增强作用
。
[0006]为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案
。
[0007]一种牛樟芝液体发酵方法，包括以下步骤：（1）将菌种接种在固体种子培养基上培养；
（2）将步骤（1）获得的菌种在液体种子培养基中扩繁培养；（3）将步骤（2）获得的菌种接种于发酵培养基在发酵罐内通气搅拌培养并流加油乳培养基，发酵至终点获得牛樟芝发酵液
。
[0008]所述液体种子培养基或发酵培养基由以下成分组成：蛋白胨
0.5
‑
3 wt%
，葡萄糖
0.5
‑
4 wt%
，麦芽糖
0.5
‑
2 wt%
，土豆淀粉1‑
3 wt%
，
KH2PO40.1
‑
0.5 wt%
，
MgSO4·
7H2O 0.05
‑
0.2 wt%
，维生素
B1 50 mg/L
‑
100 mg/L
，大豆油
0.1
‑
0.5 wt%
，
pH 6
‑
7。
[0009]所述油乳培养基由以下成分组成：大豆油
30
‑
90 L
，枸橼酸
30
‑
50 g
，丙三醇
0.5
‑
1 L
，吐温
‑
80 50
‑
100 mL
，预胶化淀粉5‑
10 g
，黄原胶
10
‑
20 g。
[0010]所述发酵培养基和油乳培养基的体积比为
100:
（6‑
10
）
。
[0011]优选地，油乳培养基在发酵第
24
小时起每隔
12
小时加入一次，分2‑5次加入
。
[0012]所述固体种子培养基由以下成分组成：
200 g
马铃薯煮出滤汁
1 L
，葡萄糖
10
‑
12 g/L
，麦芽糖8‑
10 g/L
，
KH2PO43 g/L
，
Mg2SO4·
7H2O 1.5 g/L
，维生素
B1 50
‑
100 mg/L
，琼脂
15
‑
20 g/L
；
pH 6.5。
[0013]步骤（1）
‑
（3）中，培养的温度为
25℃
‑
35℃。
较高的温度虽然菌种生长速度较快，但是容易有杂菌污染或菌种劣变，优选的培养温度为
25℃
‑
30℃
，更加优选为
25℃
‑
27℃本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种牛樟芝液体发酵方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将菌种接种在固体种子培养基上培养；（2）将步骤（1）获得的菌种在液体种子培养基中扩繁培养；（3）将步骤（2）获得的菌种接种于发酵培养基在发酵罐内通气搅拌培养并流加油乳培养基，发酵至终点获得牛樟芝发酵液；所述发酵培养基由以下成分组成：蛋白胨
0.5
‑
3 wt%
，葡萄糖
0.5
‑
4 wt%
，麦芽糖
0.5
‑
2 wt%
，土豆淀粉1‑
3 wt%
，
KH2PO
4 0.1
‑
0.5 wt%
，
MgSO4·
7H2O 0.05
‑
0.2 wt%
，维生素
B1 50 mg/L
‑
100 mg/L
，大豆油
0.1
‑
0.5 wt%
，
pH 6
‑7；所述油乳培养基由以下成分组成：大豆油
30
‑
90 L
，枸橼酸
30
‑
50 g
，丙三醇
0.5
‑
1 L
，吐温
‑
80 50
‑
100 mL
，预胶化淀粉5‑
10 g
，黄原胶
10
‑
20 g。2.
根据权利要求1所述的牛樟芝液体发酵方法，其特征在于，所述发酵培养基和油乳培养基的体积比为
100:
（6‑
10
）
。3.
根据权利要求1所述的牛樟芝液体发酵方法，其特征在于，油乳培养基在发酵第
24
小时起每隔
12
小时加入一次，分2‑5次加入
。4.
根据权利要求1所述的牛樟芝液体发酵方法，其特征在于，步骤（1）中，将牛樟芝培养于并联的试剂瓶中通气培养；且，步骤（2）中，当固体种子培养基上牛樟芝菌落长至约
2/3
以上器皿直径时，将液体种子培养基加入到长有牛樟芝的固体种子培养基中进行液体发酵培养
。5.
根据权利要求1所述的牛樟芝液体发酵方法，其特征在于，所述固体种子培养基由以下成分组成：
200 g
马铃薯煮出滤汁
1 L
，葡萄糖
10
‑
12 g/L
，麦芽糖8‑
10 g/L
，
KH2PO
4 3 g/L
，
Mg2SO4·
7H2O 1.5 g/L
，维生素
B1 50
‑
100 mg/L
，琼脂
15
‑
20 g/L
；
pH 6.5
；所述液体种子培养基由以下成分组成：蛋白胨
0.5
‑
3 wt%
，葡萄糖
0.5
‑
4 wt%
，麦芽糖
0.5
‑
2 wt%
，土豆淀粉1‑
3 wt%
，
KH2PO
4 0.1
‑
0.5 wt%
，
MgSO4·
7H2O 0.05
‑
0.2 wt%
，维生素
B1 50 mg/L
‑
100 mg/L
，大豆油
0.1
‑
0.5 wt%
，
pH 6
‑7；步骤（1）
‑
（3）中，培养的温度为
25℃
‑
35℃
；优选的培养温度为
25℃
‑
30℃
；更加优选为
25℃
‑
27℃
；步骤（2）中，扩繁次数为2‑4次；步骤（2）或（3）中，接种量为
1%
‑
15%
；优选的接种量为
5%
‑
15%
；步骤（2）或（3）中，通气量为
0.1
‑
0.5 vvm
，搅拌速度为
100
‑
300 r/min。6.

【专利技术属性】
技术研发人员：张琳，王晓晗，丁志勇，丁虹凯，丁雅苓，杨硕，张孟熹，刘志强，任国柱，关红艳，
申请(专利权)人：山东省农业科学院畜牧兽医研究所秦皇岛百阳生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：