一种血管类器官及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种血管类器官及其制备方法

【技术实现步骤摘要】
一种血管类器官及其制备方法、细胞治疗组合物及其在缺血疾病中的应用


[0001]本专利技术涉及生物
，更具体地，涉及一种血管类器官及其制备方法
、
细胞治疗组合物及其在缺血疾病中的应用
。

技术介绍

[0002]外周动脉疾病（
peripheral arterial disease
，
PAD
）发病率逐年升高，
60
岁以上人群中发病率为
19.8%
，
50
岁以上的糖尿病人群中其发病率高达
24.1%
；此外，约
10%
的
PAD
患者甚至进一步发展为严重的下肢缺血（
critical limb ischemia
，
CLI
），临床表现为静息痛（持续2周以上）
、
溃疡或者坏疽
。CLI
患者的生活质量指数与晚期癌症患者相似，且在最初诊断后5年内，其病死率超过
50%。
传统外科手术或血管腔内治疗是目前本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种血管类器官的制备方法，其特征在于，包括以下过程：将人多能干细胞置于干细胞维持培养基中进行培养
、
传代，得到增殖干细胞；将所述增殖干细胞置于第一分化培养基中进行第一阶段分化培养
、
传代，得到中胚层祖细胞；其中，所述第一分化培养基包括第一基础培养基和
GSK
‑3抑制剂；将所述中胚层祖细胞置于第二分化培养基中得到细胞溶液，将所述细胞溶液置于三维生物反应器中，使所述生物反应器保持旋转，进行第二阶段分化培养，得到含有内皮细胞和平滑肌细胞的血管类器官，其中，所述第二分化培养基包括第二基础培养基
、
成纤维细胞生长因子
、
血管内皮生长因子
、
人表皮生长因子和
ALK
抑制剂
。2.
根据权利要求1所述的血管类器官的制备方法，其特征在于，所述
GSK
‑3抑制剂在所述第一分化培养基中的浓度为4μ
M~8
μ
M
；所述成纤维细胞生长因子在所述第二分化培养基中的浓度为
40ng/mL~60ng/mL
；所述血管内皮生长因子在所述第二分化培养基中的浓度为
40ng/mL~60ng/mL
；所述人表皮生长因子在所述第二分化培养基中的浓度为
8ng/mL~12ng/mL
；所述
ALK
抑制剂在所述第二分化培养基中的浓度为8μ
M~12
μ
M。3.
根据权利要求1或2所述的血管类器官的制备方法，其特征在于，所述
GSK
‑3抑制剂包括
CHIR99021
；所述成纤维细胞生长因子包括
FGF2
；所述血管内皮生长因子包括
VEGFA
；所述人表皮生长因子包括
EGF
；所述
ALK
抑制剂包括
SB431542。4.
根据权利要求1所述的血管类器官的制备方法，其特征在于，所述旋转的转速为
60rpm~100rpm。5. 根据权利要求1所述的血管类器官的制备方法，其特征在于，所述干细胞维持培养基包括
89.5vol%
‑
99....

【专利技术属性】
技术研发人员：王凯，孔维静，王茜，潘子航，赵云，彭晓红，于洋，乔杰，
申请(专利权)人：北京大学，
类型：发明
国别省市：