一种利用燕麦成熟胚诱导愈伤组织的方法技术

本发明专利技术提供一种利用燕麦成熟胚诱导愈伤组织的方法，涉及植物组织培养技术领域，包括如下步骤：

【技术实现步骤摘要】
一种利用燕麦成熟胚诱导愈伤组织的方法


[0001]本专利技术涉及植物组织培养
，具体涉及一种利用燕麦成熟胚诱导愈伤组织的方法
。

技术介绍

[0002]燕麦不仅是一种重要的粮食作物，也是一种经济作物，燕麦富含植物蛋白质
、
维生素
、
矿物质和纤维素等营养物质，具有降低胆固醇
、
预防心血管疾病
、
调节血糖和增强免疫功能等多种保健功效；燕麦培养主要有组织培养和土地栽培，在燕麦组织培养的过程中，需要进行燕麦愈伤组织的诱导，但是实际上，在诱导燕麦愈伤组织过程中，经常会出现燕麦种子发芽情况严重，愈伤组织诱导率较低的问题，严重影响了燕麦组织培养的产量，因此亟待一种利用燕麦成熟胚诱导愈伤组织的方法，以解决上述技术问题
。

技术实现思路

[0003]为了解决在燕麦诱导愈伤组织过程中，燕麦种子发芽情况严重，愈伤组织诱导率较低的问题，本专利技术提供一种利用燕麦成熟胚诱导愈伤组织的方法，采用不同的外植体切割手法剥离燕麦成熟胚，进行愈伤组织的诱导，提高愈伤组织诱导效率，包括如下步骤：
S1、
选取燕麦成熟种子，剥去外皮；
S2、
将步骤
S1
中剥去外皮的种子进行一次消毒；
S3、
将完成一次消毒的种子培养发芽，萌发
20
‑
36h
；
S4、
挑选露白或有胚芽和胚根伸出的种子，进行二次消毒；
S5、
对种子胚进行切割创伤；
S6、
将经过切割创伤处理的剥离成熟胚，盾片朝上接种于诱导愈伤培养基中，置于
22
‑
28℃
培养箱中暗培养
。
[0004]而且，所述步骤
S2
中一次消毒的方法为：
75%
酒精消毒
0.5
‑
1.5min
，无菌蒸馏水冲洗2‑4次，
10% NaCl 消毒
10
‑
20min
，再次用无菌蒸馏水冲洗2‑4次
。
[0005]而且，所述步骤
S3
中，培养发芽的方法为：将完成一次消毒的种子摆放于放有两层无菌滤纸的培养皿中，加入
5mL
无菌蒸馏水，室温
、
弱光环境下培养发芽，萌发
20
‑
36h。
[0006]而且，所述步骤
S4
中，二次消毒的方法为：无菌蒸馏水冲洗2‑4次，然后用
0.1% HgCl2消毒2‑
4min
，再用无菌蒸馏水冲洗2‑4次，最后用无菌滤纸吸干水分
。
[0007]而且，所述步骤
S5
中，切割创伤的方法为切胚法，挑选有胚芽和胚根伸出的燕麦种子，切除胚芽和胚根，将胚部纵切两半后剥离胚
。
[0008]而且，所述步骤
S6
中，诱导愈伤培养基配方为：
MS+4
‑
6mg/L 2,4
‑
D+1
‑
3mg/L NAA+350
‑
450mg/L CH+450
‑
550mg/L Pro。
[0009]而且，所述步骤
S6
中，诱导愈伤培养基配方为：
MS+5mg/L 2,4
‑
D+2mg/L NAA+400mg/L CH+500mg/L Pro。
[0010]与现有技术相比，本专利技术的有益效果如下：
本专利技术提供一种利用燕麦成熟胚诱导愈伤组织的方法，采用切胚法对种子胚进行切割创伤，再进行愈伤组织的诱导，提高了愈伤组织的诱导效率；切割后，燕麦种子发芽率仅为
4%
，而出愈率最高可达到
63%
，而且愈伤组织生长情况良好
。
附图说明
[0011]图1为本专利技术实施例3的愈伤组织生长情况；图2为本专利技术对比例1的愈伤组织生长情况；图3为本专利技术对比例2的愈伤组织生长情况
。
具体实施方式
[0012]实施例1一种利用燕麦成熟胚诱导愈伤组织的方法，包括如下步骤：
S1、
选取燕麦成熟种子，剥去外皮；
S2、
将步骤
S1
中剥去外皮的种子进行一次消毒；
S3、
将完成一次消毒的种子培养发芽，萌发
20h
；
S4、
挑选露白或有胚芽和胚根伸出的种子，进行二次消毒；
S5、
对种子胚进行切割创伤；
S6、
将经过切割创伤处理的剥离成熟胚，盾片朝上接种于诱导愈伤培养基中，置于
22℃
培养箱中暗培养
。
[0013]进一步地，所述步骤
S2
中，一次消毒的方法为：
75%
酒精消毒
0.5min
，无菌蒸馏水冲洗2次，
10% NaCl 消毒
10min
，再次用无菌蒸馏水冲洗2次
。
[0014]进一步地，所述步骤
S3
中，培养发芽的方法为：将完成一次消毒的种子摆放于放有两层无菌滤纸的培养皿中，加入
5mL
无菌蒸馏水，室温
、
弱光环境下培养发芽，萌发
20h。
[0015]进一步地，所述步骤
S4
中，二次消毒的方法为：无菌蒸馏水冲洗2次，然后用
0.1% HgCl2消毒
2min
，再用无菌蒸馏水冲洗2次，最后用无菌滤纸吸干水分
。
[0016]进一步地，所述步骤
S5
中，切割创伤的方法为切胚法，挑选有胚芽和胚根伸出的燕麦种子，切除胚芽和胚根，将胚部纵切两半后剥离胚
。
[0017]进一步地，所述步骤
S6
中，诱导愈伤培养基配方为：
MS+4mg/L 2,4
‑
D+1mg/L NAA+350mg/L CH+450mg/L Pro。
[0018]实施例2一种利用燕麦成熟胚诱导愈伤组织的方法，包括如下步骤：
S1、
选取燕麦成熟种子，剥去外皮；
S2、
将步骤
S1
中剥去外皮的种子进行一次消毒；
S3、
将完成一次消毒的种子培养发芽，萌发
36h
；
S4、
挑选露白或有胚芽和胚根伸出的种子，进行二次消毒；
S5、
对种子胚进行切割创伤；
S6、
将经过切割创伤处理的剥离成熟胚，盾片朝上接种于诱导愈伤培养基中，置于
28℃
培养箱中暗培养
。
[0019]进一步地，所述步骤
S2
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种利用燕麦成熟胚诱导愈伤组织的方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1、
选取燕麦成熟种子，剥去外皮；
S2、
将步骤
S1
中剥去外皮的种子进行一次消毒；
S3、
将完成一次消毒的种子培养发芽，萌发
20
‑
36h
；所述培养发芽的方法为：将完成一次消毒的种子摆放于放有两层无菌滤纸的培养皿中，加入
5mL
无菌蒸馏水，室温
、
弱光环境下培养发芽，萌发
20
‑
36h
；
S4、
挑选露白或有胚芽和胚根伸出的种子，进行二次消毒；
S5、
对种子胚进行切割创伤；所述切割创伤的方法为切胚法，挑选有胚芽和胚根伸出的燕麦种子，切除胚芽和胚根，将胚部纵切两半后剥离胚；
S6、
将经过切割创伤处理的剥离成熟胚，盾片朝上接种于诱导愈伤培养基中，置于
22
‑
28℃
培养箱中暗培养；所述诱导愈伤培养基配方为：
MS+4
‑
6mg/L 2,4
‑
D+1
‑
3...

【专利技术属性】
技术研发人员：于立霞，贾振宇，王召明，刘长涛，张跃华，田振东，米翔宇，白杨，付子瑜，邓一新，
申请(专利权)人：蒙草生态环境集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：