【技术实现步骤摘要】
一种五脉绿绒蒿组织培养离体快速繁殖方法
[0001]本专利技术涉及组织培养及离体快速繁殖
,具体涉及一种五脉绿绒蒿组织培养离体快速繁殖方法
。
技术介绍
[0002]五脉绿绒蒿
(Meconopsis quintupinenia Rege1.)
是罂粟科
(Papaveraceae)
绿绒蒿属
(Meconopsis Vig.)
植物,藏名“欧氏完保”,又名野毛金莲
(《
青海常用中草药手册
》)
,为传统藏药,在民间有广泛应用,分布于西藏
、
陕西
、
甘肃
、
青海
、
四川等地,主要生长于海拔
2300
~
4600m
的高山草甸和阴坡灌丛中
。
全草入药,具有清热
、
治肝炎
、
胆囊炎
、
肺炎
、
肺结核
、
胃溃疡等功效
。
作为高山药用植物绿绒蒿的重要品种,五脉绿绒蒿在
30
多个藏药配方中均被用到,主要用于治疗肝炎
、
肺炎
、
头痛
、
水肿等症,镇痛效果尤佳
。
文献资料中有关五脉绿绒蒿的研究主要集中在资源
、
形态组织学
、
化学成分
、
药理活性
、
临 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.
一种五脉绿绒蒿组织培养离体快速繁殖方法,其特征在于,具体包括如下步骤:步骤1,外植体的选择和处理:以五脉绿绒蒿的茎尖为外植体,经流水冲洗
15
~
30
分钟,用无菌去离子水冲洗4~5次,再将冲洗后的外植体置于质量浓度为
0.2
%的氯化汞溶液中,浸泡灭菌4~5分钟,并用无菌去离子水冲洗4~6次,最后用无菌滤纸吸干水分即得消毒后的外植体茎尖;步骤2,外植体接种:将所述消毒后的外植体茎尖先接种在无激素培养基上,7~
15
天后接种至诱导芽分化培养基上,其中每
25ml
所述诱导芽分化培养基中接种2~3棵消毒后的外植体茎尖;在温度为
23℃
±
2℃、
光源为日光灯
、
光强为
30
~
60umol.m
‑2.s
‑1、
光照时间为
12h.d
‑1的条件下培养
25
~
30
天,使茎尖基部形成2~3个丛生芽;步骤3,继代增殖培养:将所述2~3个丛生芽接种到继代增殖培养基上,其中每
25ml
所述继代增殖培养基中接种1~2个所述丛生芽;在温度为
23℃
±
2℃、
光源为日光灯
、
光强为
30
~
60umol.m
‑2.s
‑1、
光照时间为
12h.d
‑1的条件下培养
25
~
35
天,形成五脉绿绒蒿丛生苗;步骤4,生根诱导:将五脉绿绒蒿丛生苗长至3~
4cm
时分株,将生长旺盛的苗从丛生苗中分剥下来,然后转入生根培养基中,,其中每
25ml
所述生根培养基中接种2~3棵所述五脉绿绒蒿丛生苗;在温度为
23℃
±
2℃、
光源为日光灯
、
光强为
30
~
60umol.m
‑2.s
‑1、
光照时间为
12h.d
‑1的条件下培养
20
~
30
天后,丛生苗基部出现白色
、
粗壮短根,并长出完整根系,即得完整再生小苗;步骤5,育苗基质消毒:将腐殖质与珍珠岩按2:1重量比混合而成的混合基质,所述混合基质在
115
~
121℃
温度下进行高温消毒,
15
~
20min
后即得消毒后的育苗基质;所述育苗基质的总孔隙度为
70
~
75
%,有机质含量为
20
%;步骤6,植株移栽:将所述完整再生小苗直接移栽到所述消毒后的育苗基质中,炼苗后即长成正常五脉绿绒蒿植株;所述一棵完整再生小苗种植在所述消毒后的育苗基质
10cm2的范围内
。2.
根据权利要求1所述的一种五脉绿绒蒿组织培养离体快速繁殖方法,其特征在于,所述步骤1中,五脉绿绒蒿的基源植物为罂粟科草本植物五脉绿绒蒿
Meconopsis quintupinenia Rege1.。3.
根据权利要求1所述的一种五脉绿绒蒿组织培养离体快速繁殖方法,其特征在于,所述步骤2中,无激素培养基指在
1000ml
的烧杯中,依次加入大量元素母液
100ml
,微量元素母液
10ml
,有机成分母液
10ml
,铁盐母液
5ml
,柠檬酸母液
4ml
,
Vc
母液
2ml
,蔗糖
30
克,后加双蒸馏水至
1000ml
刻度处,搅匀后,加入
1mM NaOH
溶液调整
pH
值至
5.8
,最后加入琼脂粉
5.0
克,在
100ml
三角瓶中每
25ml
分装为一瓶,经
121℃
高温消毒即得
。4.
根据权利要求1所述的一种五脉绿绒蒿组织培养离体快速繁殖方法,其特征在于,所述步骤2中,诱导芽分化培养基指在
1000ml
的烧杯中,依次加入大量元素母液
100ml
,微量元素母液
10ml
,有机成分母液
10ml
,铁盐母液
5ml
,柠檬酸母液
4ml...
【专利技术属性】
技术研发人员:徐文华,李彩霞,马世震,刚华本,宋文珠,宁蓉春,王娜,多杰措,
申请(专利权)人:中国科学院西北高原生物研究所,
类型:发明
国别省市:
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