一种兰科植物种子保存方法技术

本发明专利技术提供了一种兰科植物种子保存方法，属于种质资源保存技术领域

【技术实现步骤摘要】
一种兰科植物种子保存方法


[0001]本专利技术属于种质资源保存
，尤其涉及一种兰科植物种子保存方法
。

技术介绍

[0002]种子无菌快繁播种技术是目前兰科植物种苗繁育的主要途径
。
兰科植物每个果荚内有几万至近百万粒种子，播撒于人工提供的无菌培养基上可快速繁育出大批量的兰科植物种苗
。
[0003]然而，在实际生产过程中，兰科植物种质保存时，通常是将蒴果直接存放于冰箱中，蒴果表皮容易开裂
、
发霉或腐烂且保存时间一般不超过2个月，致使种子播撒于培养基后容易被污染，不利于无菌播种操作
。
若播种前对种子进行消毒处理，则极易因清洗时间较长或消毒试剂浓度掌控不合理等因素影响种子的萌发率
。
此外，对于实际生产过程中的种子保存方法，种子只能一次性使用，种子利用率较低
。
因此，有必要研究出一种可简便播种的兰科植物种子无菌长期保存方法
。

技术实现思路

[0004]有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种兰科植物种子保存方法，保存时间长，且种子的萌发率
、
利用率高，播种方便
。
[0005]为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供了以下技术方案：
[0006]一种兰科植物种子保存方法，包括以下步骤：
[0007]采集兰科植物蒴果，表面消毒后取出种子，干燥至种子含水量
7%~30%RH
，密封包装后
‑
80℃~16℃
保存；所述干燥包括：将种子置于无菌瓶的三折滤纸内，耐高温组培封口膜封口；将装有种子的无菌瓶置于湿度
7%~30%RH、
温度
16~20℃
干燥箱或盛有
5.2g/L
氯化锂溶液的封闭容器内干燥
5~8
天
。
[0008]优选的是，所述蒴果为发育接近成熟且未开裂的兰科植物蒴果
。
[0009]优选的是，所述表面消毒包括：去除蒴果上残余的花及污物，洗洁精清洗干净，置于
75%
乙醇溶液浸泡
1~3min
，再用酒精灯灼烧
2~3
次
。
[0010]优选的是，用解剖刀将蒴果顶端切开，用镊子夹取蒴果，抖动取出种子
。
[0011]优选的是，所述干燥完成后，将种子转移至离心管，装入保鲜袋抽真空，密封包装保存
。
[0012]更优选的是，保存期间，用镊子取出种子直接播种，剩余种子重复密封保存
。
[0013]优选的是，所有操作在超净工作台无菌环境下进行；所有器材进行消毒灭菌处理
。
[0014]优选的是，所述兰科植物包括鼓槌石斛
、
火焰兰和卓花石斛
。
[0015]相对于现有技术，本专利技术具有如下有益效果：
[0016]本专利技术提供了一种兰科植物种子保存方法，使兰科植物种子播种时操作方便快捷，又能提高种子萌发率和利用率，适合兰科植物种子的长期保存，从而提高兰科植物育苗技术，有效缩短兰科植物育苗过程
。
具体实施方式
[0017]本专利技术提供了一种兰科植物种子保存方法，包括以下步骤：
[0018]采集兰科植物蒴果
。
本专利技术优选兰科植物包括鼓槌石斛
、
火焰兰和卓花石斛；优选蒴果为发育接近成熟且未开裂的兰科植物蒴果
。
本专利技术兰科植物包括鼓槌石斛
、
火焰兰和卓花石斛
。
[0019]蒴果表面消毒
。
本专利技术优选表面消毒包括：去除蒴果上残余的花及污物，洗洁精清洗干净，置于
75%
乙醇溶液浸泡
1~3min
，进一步优选
2min
，再用酒精灯灼烧
2~3
次
。
[0020]取出兰科植物种子
。
本专利技术优选用解剖刀将蒴果顶端切开，用镊子夹取蒴果，抖动取出种子
。
[0021]干燥
。
将抖出的兰科植物种子置于无菌瓶的三折滤纸内，耐高温组培封口膜封口；将装有种子的无菌瓶置于湿度
7%~30%RH、
温度
16~20℃
干燥箱，进一步优选湿度
10%、
温度
18℃
干燥箱，或盛有
5.2g/L
氯化锂溶液的封闭容器内干燥
5~8
天，干燥至种子含水量为
7%~30%RH。
[0022]密封包装
。
本专利技术优选干燥完成后，将种子转移至离心管，装入保鲜袋抽真空，密封包装保存；进一步优选通过不锈钢漏斗转移，不锈钢漏斗在酒精灯火焰上部均匀燃烧进行高温灭菌，打开经高温灭菌的离心管并装好漏斗，把种子转移进离心管
。
[0023]保存
。
选择放在
‑
80℃~16℃
的常温或低温环境下长期保存，优选在管身和密封袋上做好信息标记
。
进一步优选，保存期间，把装有种子的密封保鲜袋用
75%
的酒精进行表面消毒，打开离心管盖子，用镊子夹取需要的种子，均匀地播撒于培养基表面，关闭离心管，继续装进保鲜袋，抽真空并密封，放回原来的储藏环境长期保存
。
更优选
16℃
保存的种子可以直接使用，
‑
20℃
和
‑
80℃
保存的种子应预先做好解冻处理，把
‑
20℃
保存的种子先放在
4℃
冰箱中解冻
1~2
个小时，
‑
80℃
环境中取出并置于
‑
20℃
的冰袋的保温箱内中解冻
1~2
个小时后使用
。
[0024]本专利技术所有操作在超净工作台无菌环境下进行；所有器材进行消毒灭菌处理
。
[0025]下面结合实施例对本专利技术提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本专利技术保护范围的限定
。
[0026]实施例1[0027]一种兰科植物
——
鼓槌石斛种子无菌保存方法，包括以下步骤：
[0028]（1）
2020
年4月
15
日对鼓槌石斛进行异花授粉，
2021
年3月4日采收发育接近成熟且未开裂的蒴果7个，去除蒴果残余的花和附着在表面的污物，用洗洁精清洗干净表面的脏物，把蒴果置于
75%
的乙醇中浸泡
2min
，点燃酒精灯，灼烧蒴果2‑3次，在超净工作台上的无菌操作条件下，用解剖刀将蒴果顶端切开，用镊子夹取蒴果，把种子全部抖进无菌瓶的三折滤纸内并混匀，然后用耐高温组培封口膜盖住瓶口，套上胶圈<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种兰科植物种子保存方法，其特征在于，包括以下步骤：采集兰科植物蒴果，表面消毒后取出种子，干燥至种子含水量
7%~30%RH
，密封包装后
‑
80℃~16℃
保存；所述干燥包括：将种子置于无菌瓶的三折滤纸内，耐高温组培封口膜封口；将装有种子的无菌瓶置于湿度
7%~30%RH、
温度
16~20℃
干燥箱或盛有
5.2g/L
氯化锂溶液的封闭容器内干燥
5~8
天
。2.
根据权利要求1所述的兰科植物种子保存方法，其特征在于，所述蒴果为发育接近成熟且未开裂的兰科植物蒴果
。3.
根据权利要求1所述的兰科植物种子保存方法，其特征在于，所述表面消毒包括：去除蒴果上残余的花及污物，洗洁精清洗干净，置于
75%
乙醇溶液浸泡<...

【专利技术属性】
技术研发人员：孔德敏，王美娜，陈建兵，王玉，唐凤霞，李利强，
申请(专利权)人：深圳市兰科植物保护研究中心，
类型：发明
国别省市：