一种靶向纳米载体及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及一种靶向纳米载体及其制备方法和应用，属于生物医学技术领域

【技术实现步骤摘要】
一种靶向纳米载体及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及生物医学
，特别是涉及一种靶向纳米载体及其制备方法和应用
。

技术介绍

[0002]肝细胞癌
(HCC)
是世界范围内最常见的高死亡率癌症之一
。
近年来，
HCC
在世界范围内的发病率持续上升，引起越来越多的关注
。
早期肝癌的有效治疗是手术，手术治疗后5年生存率为
89
％～
93
％
。
然而，只有少数
HCC
患者
(
约
20
％
)
能够在早期被诊断出来，大多数
HCC
患者
(>70
％
)
都处于晚期，不能手术切除，只能通过其他方法治疗，包括肝移植
、
经导管动脉化疗栓塞
(TACE)
和全身化疗
。
但其他治疗方法存在局限性，使得肝癌的治疗效果不理想
。
因此，迫切需要探索肝癌的创新治疗方法，弥补临床治疗的不足
。
[0003]随着对长链非编码
rna(long
‑
chain noncoding rna,lncRNAs)
研究的深入，
lncRNAs
被发现在肿瘤发生
、
发展
、
转移和凋亡中发挥着重要作用
。
研究
lncRNAs
在肝癌发生发展中的作用，也可能为未来肝癌的诊断和治疗提供新的突破
。
目前，
lncRNAs
已成为肿瘤生物学领域的重要研究热点，但
lncRNAs
与肿瘤的关系研究尚处于起步阶段
。CRNDE
在大多数恶性肿瘤中表达明显上调
。CRNDE
可通过影响染色质的表观遗传调控
、
一些重要蛋白的表达
、
肿瘤特异性信号通路和细胞代谢，参与相关肿瘤的生物学过程，进而促进肿瘤细胞的增殖
、
迁移和侵袭，抑制细胞凋亡，最终促进肿瘤的发生发展
。
[0004]目前，
lncRNAs
分子技术已进入人体实验阶段，是治疗多种基因突变肿瘤最有前途的方法之一
。
然而，
lncRNAs
的临床应用仍然面临着很大的挑战，如其在血清中的不稳定性
、
在细胞外环境中容易被核酸酶降解
、
带负电荷的
lncRNAs
与带负电荷的细胞膜的静电排斥等，这些都会严重影响
lncRNAs
的运输和吸收
。
由于这些特点，游离
lncRNAs
难以直接靶向特异性细胞，因此对
lncRNAs
进行化学修饰或将
lncRNAs
装载到保护性载体材料中以提高
lncRNAs
的稳定性成为当前的研究热点之一
。
叶酸
(Folic acid,FA)
作为一种被广泛研究的靶向基元，是一种不像许多蛋白质那样引起过敏反应的天然成分
。
此外，
FA
受体在肾
、
肺和乳腺癌组织中过表达，而在正常组织中表达水平较低
。
因此，
FA
功能纳米颗粒可以通过
FA
受体介导的内吞作用特异性增强肿瘤细胞对该复合药物制剂的摄取
。
同时，
FA
修饰的复合聚合物纳米颗粒将成为肿瘤靶向药物递送的潜在载体
。
[0005]近年来，光热疗法
(photothermal therapy,PTT)
成为一种发展迅速的新型癌症治疗方法
。
与传统的肿瘤消融方法相比，
PTT
具有更高的局部效果，可用于手术难度较大的区域
。
黑磷
(BP)
是一种新型无机材料，是白磷和红磷的同素异形体，主要应用于锂离子电池
、
存储器件等领域
。
近年来，人们发现通过类似石墨烯的机械剥离方法可以获得
BP
的二维片层结构，并表现出独特的光学性质
。BP
最早用于生物医学领域的光热治疗
。
在近红外激光照射
(808nm)
下，
BP
可产生高热，可用于实现高效
、
安全的肿瘤光热治疗
。
与传统无机纳米材料相比，
BP
在生理条件下可氧化降解为安全无毒的磷酸盐
、
亚磷酸酯等小分子
。

技术实现思路

[0006]基于此，有必要针对上述问题，提供一种靶向纳米载体，可实现肝癌的靶向，改善肝癌治疗效果
。
[0007]本专利技术的技术方案如下：一种靶向纳米载体，所述纳米载体包括黑磷纳米片及包覆在所述黑磷纳米片表面的改性
PAMAM
，所述改性
PAMAM
中含有双硒键，并修饰有
FA
分子
。
[0008]该纳米载体以黑磷为核心骨架，通过修饰改性聚合物
PMMA
，可使载体具有丰富的正电荷，其对增加带负电荷功能基因如基因
shCRNDE
的负载能；而且双硒键具有
GSH
响应性，黑磷被具有
GSH
响应的改性聚合物
PAMAM
包覆，可防止降解，提高纳米载体的稳定性；同时，将
FA
修饰为靶向肝癌细胞上
FA
受体的引导分子，促进了纳米材料在肿瘤细胞的富集，可实现对肝癌肿瘤细胞的高效联合治疗
。
[0009]在其中一个实施例中，所述靶向纳米载体的粒径为
200nm
，
Zeta
电位
18mV
，在负载基因后，有较好的杀死肝癌细胞的效果
。
[0010]本专利技术的另一方面还提供了上述靶向纳米载体的制备方法，包括如下步骤：
(1)
制备黑磷纳米片
BPNPs
：将黑磷分散于纯水中，搅拌，用流动氩气对溶液进行脱气，然后，在冰浴条件下对混合溶液进行超声处理，获得的棕色分散体，然后对所述棕色分散体离心，收集上清液并将收集到的上清液进一步离心，得到黑磷纳米片
BPNPs。
[0011](2)
制备
PAMAM
‑
SeSe
‑
FA
，包括：
[0012]2.1
合成
NH2‑
PEG
‑
SeSe
‑
NH本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种靶向纳米载体，其特征在于，包括黑磷纳米片及包覆在所述黑磷纳米片表面的改性
PAMAM
，所述改性
PAMAM
中含有双硒键，并修饰有
FA
分子
。2.
根据权利要求2所述的靶向纳米载体，其特征在于，所述纳米载体的粒径为
200nm
，
Zeta
电位
18mV。3.
根据权利要求1或2所述的靶向纳米载体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)
制备黑磷纳米片
BPNPs
：将黑磷分散于纯水中，搅拌，用流动氩气进行脱气，然后在冰浴条件下对溶液进行超声处理，获得的棕色分散体，然后对所述棕色分散体离心，收集上清液并将收集到的上清液进一步离心，得到黑磷纳米片
BPNPs
；
(2)
制备
PAMAM
‑
SeSe
‑
FA
，包括：
2.1
合成
NH2‑
PEG
‑
SeSe
‑
NH2：取硒代胱胺盐酸盐溶于水中，将
EDC
和
NHS
加入到硒代胱胺盐酸盐溶液中搅拌反应；然后逐滴加入到
NH2‑
PEG
‑
COOH
溶液中，室温搅拌反应
、
透析
、
冻干得到
NH2‑
PEG
‑
SeSe
‑
NH2；
2.2
取
FA
溶于
DMSO
中，将
EDC
和
NHS
加入
FA
溶液中，室温搅拌，再将其逐滴加入到
PAMAM
溶液中，室温搅拌反应，透析，冻干得到
PAMAM
‑
FA
；
2.3
取
PAMAM
‑
FA
溶液于水中，将
EDC
和
NHS
加入
PAMAM
‑
FA
溶液中，室温搅拌，再将其逐滴加入到
NH2‑
PEG
‑
SeSe
‑
NH2水溶液中，室温搅拌反应，透析，冻干得到
PAMAM
‑
SeSe
‑
FA
；
(3)
制备
BP@PAMAM
‑
SeSe
‑
FA
：配置
BPNPs
水溶液，然后加入
PAMAM
‑
SeSe
‑
FA
混合，超声
、
搅拌反应得到
BP@PAMAM
‑
SeSe
‑
FA
纳米载体，即所述的靶向纳米载体
。4.
根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述步骤
(1)
，黑磷与纯水的质量比为

【专利技术属性】
技术研发人员：郭瑞，文荣，黄尚辉，冯龙宝，
申请(专利权)人：广州贝奥吉因生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：