间充质干细胞储存液制造技术

本发明专利技术属于干细胞储存技术领域，具体涉及一种间充质干细胞储存液

【技术实现步骤摘要】
间充质干细胞储存液


[0001]本专利技术属于干细胞储存
，具体涉及一种间充质干细胞储存液
。

技术介绍

[0002]间充质干细胞（
mesenchymal stem cells,MSC
）是干细胞家族的重要成员，属于成体干细胞
。
来源于发育早期的中胚层和外胚层
。MSC
最初在
1968
年由
Friedenstein
骨髓中发现，因其具有多向分化潜能
、
造血支持和促进干细胞植入
、
免疫调控和自我复制等特点而日益受到人们的关注
。
如间充质干细胞在体内或体外特定的诱导条件下，可分化为脂肪
、
骨
、
软骨
、
肌肉
、
肌腱
、
韧带
、
神经
、
肝
、
心肌
、
内皮等多种组织细胞，连续传代培养和冷冻保存后仍具有多向分化潜能，可作为理想的种子细胞用于衰老和病变引起的组织器官损伤修复
。
[0003]由于间充质干细胞脱离培养条件后在常温下很快死亡变质，非培养状态下冻存于液氮罐中保存，但解冻后不能直接注射人体或动物，间充质干细胞对储存条件的要求限制了间充质干细胞的远距离供应
。
[0004]将间充质干细胞储存在有效的储存液中，并保持在合适温度，可实现间充质干细胞的长时间和长距离的储存，最大程度地保护间充质干细胞的健康状态
。
因此，开发能有效保护间充质干细胞功能和活性的储存液至关重要
。

技术实现思路

[0005]为了实现上述目的，本专利技术提供了一种间充质干细胞储存液，可维持间充质干细胞活性，保证其成活率，适应长时间长距离的储存运输
。
[0006]本专利技术通过以下技术方案实现：本专利技术所述的间充质干细胞储存液，是由葡萄糖
、
海藻糖
、
氯化钠
、
丙二醇
、
碳酸氢钠
、
白蛋白
、
肝素
、
刺芒柄花素和黄芪皂苷组成的水溶液
。
[0007]所述间充质干细胞储存液中各成分的浓度为：葡萄糖
50
‑
65g/L、
海藻糖
10
‑
15g/L、
氯化钠
9g/L、
丙二醇3‑
8%
（
V/V
）
、
碳酸氢钠5‑
20g/L、
白蛋白
20
‑
70g/L、
肝素
0.08
‑
0.12g/L、
刺芒柄花素
0.05
‑
0.15g/L、
黄芪皂苷
0.1
‑
0.2g/L。
[0008]优选的，所述间充质干细胞储存液中各成分的浓度为：葡萄糖
60g/L、
海藻糖
12g/L、
本专利技术所述间充质干细胞储存液的制备和使用：（1）制备间充质干细胞储存液：将葡萄糖
60g/L、
海藻糖
12g/L、
氯化钠
9g/L、
丙二醇
5%
（
V/V
）
、
碳酸氢钠
15g/L、
白蛋白
45g/L、
肝素
0.12g/L、
刺芒柄花素
0.15g/L、
黄芪皂苷
0.2g/L
加入水中溶解，得到间充质干细胞储存液；（2）制备间充质干细胞制剂：将人间充质干细胞放到离心管中离心，弃上清，用生理盐水洗涤2遍，将步骤（1）制备的储存液添加到离心管中，重悬细胞，使细胞在溶液中的浓度达到
1.0
×
10^6
个细胞
/mL
，分装到
15
个冻存血袋中，每袋
10mL
，即
1.0
×
10^7
个细胞，制成间充质干细胞制剂；（3）储存：将步骤（3）制备的间充质干细胞制剂储存于
6℃
冰箱中储存
。
[0016]对比例1所述间充质干细胞储存液的制备和使用，参考实施例1，唯一不同的是，未添加刺芒柄花素
。
[0017]对比例2所述间充质干细胞储存液的制备和使用，参考实施例1，唯一不同的是，未添加黄芪皂苷
。
[0018]对实施例1‑3和对比例1‑2间充质干细胞储存液制得的间充质干细胞制剂进行细胞活性检测，分别于保存的第3天
、
第7天
、
第
15
天，分别取5袋间充质干细胞制剂，进行细胞计数检测，检测结果如表1，同时对小鼠进行经脉注射，小鼠均未有异常反应
。
[0019]表
1 间充质干细胞制剂中活细胞数组别第3天第7天第
15
天实施例
10.98
×
10^7
个
0.95
×
10^7
个
0.89
×
10^7
个实施例
20.96
×
10^7
个
0.92
×
10^7
个
0.85
×
10^7
个实施例
30.97
×
10^7
个
0.92
×
10^7
个
0.86
×
10^7
个对比例
10.93
×
10^7
个
0.89
×
10^7
个
0.76
×
10^7
个对比例
20.94
×
10^7
个
0.88
×
10^7
个
0.78
×
10^7
个
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种间充质干细胞储存液，其特征在于：是由葡萄糖
、
海藻糖
、
氯化钠
、
丙二醇
、
碳酸氢钠
、
白蛋白
、
肝素
、
刺芒柄花素和黄芪皂苷组成的水溶液
。2.
根据权利要求1所述的间充质干细胞储存液，其特征在于：各成分的浓度为：葡萄糖
50
‑
65g/L、
海藻糖
10
‑
15g/L、
氯化钠
9g/L、
丙二醇3‑
8%
（
V/V
）
、
碳酸氢钠5‑
20g/L、
白蛋白
20
‑
70g/L、
肝素
0.08
‑
0.12g/L、
...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈平，郑琦，王晓芳，李洁，
申请(专利权)人：山东诺亚创生生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：