一种基于铜激活-上转换-钼酸铋传感体系检测肉制品中四环素的方法技术

本发明专利技术属于抗生素检测领域，具体涉及一种基于铜激活

【技术实现步骤摘要】
一种基于铜激活
‑
上转换
‑
钼酸铋传感体系检测肉制品中四环素的方法


[0001]本专利技术属于抗生素检测领域，具体涉及一种基于铜激活
‑
上转换
‑
钼酸铋传感体系检测肉制品中四环素的方法
。

技术介绍

[0002]在现代农业中，广谱抗生素四环素被广泛用于动物治疗，因为四环素能有效抑制病原菌生长治疗动物疾病
。
然而，由于有些养殖人员在畜牧业中过度使用四环素，导致其残留在许多动物源性食品中
。
四环素可通过食物链在人体内生物积累，引起牙齿变黄
、
肝毒性
、
胃肠道紊乱和过敏反应，还会促进细菌产生耐药性，从而影响药物的疗效
。
[0003]鉴于其潜在的危害，中国国家标准
GB 31650
‑
2019
规定，猪肉
、
牛肉
、
鱼肉中四环素含量不得超过
200
μ
g/kg。
传统的四环素检测方法有高效液相色谱法
、
毛细管电泳法
、
酶联免疫吸附法
、
液相色谱
‑
质谱法等，尽管这些技术对四环素有较高的准确性和灵敏度，但仍存在一些局限性，如昂贵
、
耗时
、
需要先进的实验室设备和训练有素的工作人员，在降低检测成本，简化检测流程方面仍然需要改进
。
专利技术内容
[0004]针对现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种基于铜激活
‑
上转换
‑
钼酸铋传感体系检测肉制品中四环素的方法，克服现有检测技术中操作复杂，检测成本高等问题
。
[0005]为实现上述目的，本专利技术提供了如下方案：
[0006]本专利技术首先提供一种基于铜激活
‑
上转换
‑
钼酸铋传感体系检测肉制品中四环素的方法，包括以下步骤：
[0007]步骤一：上转换荧光纳米材料的制备；
[0008]将氯化钇六水合物
、
氯化镱六水合物
、
氯化铒六水合物溶于甲醇，加入油酸
、1
‑
十八烯，通入氮气，在氮气气氛下进行第一次加热搅拌反应，反应结束后，冷却至一定温度，得到溶液记为混合溶液
A
；
[0009]再将氟化铵
、
氢氧化钠溶于甲醇，然后与混合溶液
A
混合，进行第二次加热搅拌反应，通入氮气，并在氮气气氛下进行第三次加热搅拌反应，反应后冷却至室温，得到的溶液记为混合液
B
；取混合液
B
用乙醇和环己烷的混合液进行清洗，最后经离心
、
干燥，得到上转换荧光纳米材料；
[0010]步骤二：将罗丹明
B
溶于乙醇中，然后在室温下滴加水合肼，搅拌均匀得到的溶液记为混合物
C
，在空气浴中进行第一次加热回流
(
溶液由深紫色变为淡橙色
)
后得到的溶液记为混合物
D
；将混合物
D
进行旋转蒸发除去溶剂，得到固体产物，在固体产物中加入盐酸，得到红色溶液，调节红色溶液的
pH
后，经离心
、
干燥，得到罗丹明
B
肼；
[0011]步骤三：将罗丹明
B
肼溶于乙醇中，再加入二羟基苯甲醛和醋酸，得到混合溶液在氮气气氛下进行第二次加热回流，得到回流溶液；然后将回流溶液进行冷却浓缩，置于室温
下静置一段时间后得到粉红色结晶，经离心
、
干燥，得到罗丹明衍生物；
[0012]步骤四：
[0013](1)
称取五水合硝酸铋加入稀硝酸中，常温条件下进行第一次搅拌；搅拌后加入四水合钼酸铵，进行第二次搅拌，然后用氨水调节混合溶液的
pH
，再将混合溶液转移至水热反应釜中，进行水热反应，反应后自然冷却至一定温度后通过离心获得沉淀，所得沉淀用乙醇和去离子水依次洗涤，经干燥后得到钼酸铋；
[0014](2)
称取五水合硝酸铋加入到去离子水中，常温条件下，进行第一次搅拌；然后再加入五水合硫代硫酸钠进行第二次搅拌，得到混合溶液转移至水热反应釜中，进行水热反应，自然冷却至室温后通过离心获得沉淀，所得沉淀用乙醇和去离子水依次洗涤，经干燥后得到硫化铋；
[0015]步骤五：取步骤四中得到的钼酸铋和硫化铋按一定比例加入去离子水中，超声处理后所得的混合溶液转移至水热反应釜中进行水热反应；自然冷却至室温后通过离心获得沉淀，所得沉淀用乙醇和去离子水依次洗涤，再经干燥后得到钼酸铋
‑
硫化铋复合物；
[0016]步骤六：将步骤一制备的上转换荧光纳米材料与步骤三制备的罗丹明衍生物分别溶于甲醇中，得到上转换荧光纳米甲醇溶液和罗丹明衍生物甲醇溶液，二者按一定比例混合，得到混合溶液即为铜激活
‑
上转换
‑
钼酸铋传感体系；
[0017]步骤七：配制不同浓度的四环素标准液；
[0018]首先将步骤五所得的钼酸铋
‑
硫化铋复合物加入水中搅拌均匀，得到钼酸铋
‑
硫化铋复合溶液；将四环素标准液与硫酸铜溶液按一定比例混合，振摇一段时间，然后再加入钼酸铋
‑
硫化铋复合溶液用氙灯照射一段时间
(
分解铜
‑
四环素络合物及四环素
)
，离心去除沉淀，得到被测液；
[0019]取步骤六所得的铜激活
‑
上转换
‑
钼酸铋传感体系与被测液混合，得到混合溶液并检测混合溶液的荧光强度信号特征值，根据含不同浓度四环素的被测液所对应的荧光强度信号特征值，以有四环素标准液浓度的对数值为横坐标，荧光强度信号特征值为纵坐标绘制出四环素浓度相关标准曲线；
[0020]步骤八：肉制品中四环素的检测；
[0021](1)
样品液的制备；
[0022](2)
将样品液与硫酸铜溶液按一定比例混合，振摇一段时间，加入钼酸铋
‑
硫化铋复合溶液，用氙灯照射一段时间，离心去除沉淀，得到被测液；取被测液与铜激活
‑
上转换
‑
钼酸铋传感体系按一定比例混合得到混合液，测定混合液的荧光强度信号特征值，根据步骤五所得的四环素检测标准曲线，计算出肉制品样本中四环素的含量
。
[0023]进一步，步骤一中，所述甲醇
、
氯化钇六水合物
、
氯化镱六水合物
、
氯化铒六水合物
、
油酸和1‑
十八烯的用量比为6～
10mL:236本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种基于铜激活
‑
上转换
‑
钼酸铋传感体系检测肉制品中四环素的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一：上转换荧光纳米材料的制备；将氯化钇六水合物
、
氯化镱六水合物
、
氯化铒六水合物溶于甲醇，加入油酸
、1
‑
十八烯，通入氮气，在氮气气氛下进行第一次加热搅拌反应，反应结束后，冷却至一定温度，得到溶液记为混合溶液
A
；再将氟化铵
、
氢氧化钠溶于甲醇，然后与混合溶液
A
混合，进行第二次加热搅拌反应，通入氮气，并在氮气气氛下进行第三次加热搅拌反应，反应后冷却至室温，得到的溶液记为混合液
B
；取混合液
B
用乙醇和环己烷的混合液进行清洗，最后经离心
、
干燥，得到上转换荧光纳米材料；步骤二：将罗丹明
B
溶于乙醇中，然后在室温下滴加水合肼，搅拌均匀得到的溶液记为混合物
C
，在空气浴中进行第一次加热回流后得到的溶液记为混合物
D
；将混合物
D
进行旋转蒸发除去溶剂，得到固体产物，在固体产物中加入盐酸，得到红色溶液，调节红色溶液的
pH
后，经离心
、
干燥，得到罗丹明
B
肼；步骤三：将罗丹明
B
肼溶于乙醇中，再加入二羟基苯甲醛和醋酸，得到混合溶液在氮气气氛下进行第二次加热回流，得到回流溶液；然后将回流溶液进行冷却浓缩，置于室温下静置一段时间后得到粉红色结晶，经离心
、
干燥，得到罗丹明衍生物；步骤四：
(1)
称取五水合硝酸铋加入稀硝酸中，常温条件下进行第一次搅拌；搅拌后加入四水合钼酸铵，进行第二次搅拌，然后用氨水调节混合溶液的
pH
，再将混合溶液转移至水热反应釜中，进行水热反应，反应后自然冷却至一定温度后通过离心获得沉淀，所得沉淀用乙醇和去离子水依次洗涤，经干燥后得到钼酸铋；
(2)
称取五水合硝酸铋加入到去离子水中，常温条件下，进行第一次搅拌；然后再加入五水合硫代硫酸钠进行第二次搅拌，得到混合溶液转移至水热反应釜中，进行水热反应，自然冷却至室温后通过离心获得沉淀，所得沉淀用乙醇和去离子水依次洗涤，经干燥后得到硫化铋；步骤五：取步骤四中得到的钼酸铋和硫化铋按一定比例加入去离子水中，超声处理后所得的混合溶液转移至水热反应釜中进行水热反应；自然冷却至室温后通过离心获得沉淀，所得沉淀用乙醇和去离子水依次洗涤，再经干燥后得到钼酸铋
‑
硫化铋复合物；步骤六：将步骤一制备的上转换荧光纳米材料与步骤三制备的罗丹明衍生物分别溶于甲醇中，得到上转换荧光纳米甲醇溶液和罗丹明衍生物甲醇溶液，二者按一定比例混合，得到混合溶液即为铜激活
‑
上转换
‑
钼酸铋传感体系；步骤七：配制不同浓度的四环素标准液，首先将步骤五所得的钼酸铋
‑
硫化铋复合物加入水中搅拌均匀，得到钼酸铋
‑
硫化铋复合溶液；将四环素标准液与硫酸铜溶液按一定比例混合，振摇一段时间，然后再加入钼酸铋
‑
硫化铋复合溶液用氙灯照射一段时间，离心去除沉淀，得到被测液；取步骤六所得的铜激活
‑
上转换
‑
钼酸铋传感体系与被测液混合，得到混合溶液并检测混合溶液的荧光强度信号特征值，根据含不同浓度四环素的被测液所对应的荧光强度信号特征值，以有四环素标准液浓度的对数值为横坐标，荧光强度信号特征值为纵坐标绘制出
四环素浓度相关标准曲线；步骤八：肉制品中四环素的检测；
(1)
样品液的制备；
(2)
将样品液与硫酸铜溶液按一定比例混合，振摇一段时间，加入钼酸铋
‑
硫化铋复合溶液，用氙灯照射一段时间，离心去除沉淀，得到被测液；取被测液与铜激活
‑
上转换
‑
钼酸铋传感体系按一定比例混合得到混合液，测定混合液的荧光强度信号特征值，根据步骤五所得的四环素检测标准曲线，计算出肉制品样本中四环素的含量
。2.
根据权利要求1所述的一种基于铜激活
‑
上转换
‑
钼酸铋传感体系检测肉制品中四环素的方法，其特征在于，步骤一中，所述甲醇
、
氯化钇六水合物
、
氯化镱六水合物
、
氯化铒六水合物
、
油酸和1‑
十八烯的用量比为6～
10mL:236.6mg:77.5mg:7.6mg
：
6mL:15mL
；所述混合溶液
A
中的油酸与甲醇
、
氟化铵和氢氧化钠的用量比为
6mL:10mL:0.1482g:0.1g
；所述第一次加热搅拌反应的温度为
160
～
170℃
，搅拌时间
25
～
40min
，搅拌速率为
300
～
500
转
/
分钟；所述第二次加热搅拌的温度为
50
～
70℃
，时间为
70
～
100min
；所述第三次加热搅拌反应的温度为
290
～
300℃
，搅拌反应的时间为
60
～
90min
；所述第二次加热搅拌和第三次加热搅拌的搅拌速率为
300
～
500
转
/
分钟；所述混合液
B
与乙醇和环己烷混合液的体积比为
1:1
，环己烷和乙醇的体积比为
1:1
；所述离心的速率为
8000
转
/
分钟，时间为6～
8min
；所述干燥的温度为
40
～
60℃
，时间为8～
20h。3.
根据权利要求1所述的一种基于铜激活
‑
上转换
‑
钼酸铋传感体系检测肉制品中四环素的方法，其特征在于，步骤二中，所述罗丹明
B
：乙醇：水合肼：盐酸的比例是
1.2g
：
30mL
：
3mL
：
50mL
；所述第一次加热回流的时间是
100
～
150min
，温度是
70
～
80℃
；所述盐酸的浓度为
1mol/L
；所述调节红色溶液的
pH
使用的溶液为氢氧化钠，浓度为
1mol/L
，调节
pH
为9～
10
；所述离心的速率为
8000
转
/
分钟，时间为6～
10min
；所述干燥的温度为
45
～
60℃
，时间
12
～
15h。4.
根据权利要求1所述的一种基于铜激活
‑
上转换
‑
钼酸铋传感体系检测肉制品中四环素的方法，其特征在于，...

【专利技术属性】
技术研发人员：李欢欢，贝琦逸，唐喆，陈全胜，武瑜，欧阳琴，
申请(专利权)人：江苏大学，
类型：发明
国别省市：