无芒山羊草制造技术

本发明专利技术属于作物分子生物学与遗传育种领域，具体涉及无芒山羊草

【技术实现步骤摘要】
无芒山羊草6T染色体特异分子标记及其应用


[0001]专利技术属于作物分子生物学与遗传育种领域，具体涉及无芒山羊草
6T
染色体特异分子标记及其应用
。

技术介绍

[0002]山羊草属
(Aegilops)
是小麦的野生亲缘关系，由
11
个二倍体
、10
个四倍体和2个六倍体物种组成
(Gill&Friebe,2002)。
山羊草属具有极其多样的基因组资源，包括
D、S、U、C、N
和
M(Kimber&Sears,1987,Hammer,1980,Kihara,1954)
，与黑麦属
、
大麦属和冰草属相比，山羊草属是与小麦亲缘关系最密切的属
(Schneider et al.,2008)
，这使得将其具有农业价值的基因转移到普通小麦上成为可能
(Bowden,1959)。
无芒山羊草
(
即
Amblyopyrum muticum,2n
＝
2x
＝
14)
是一个独特的物种，不仅由于其青春期小穗形式的现象
(
能够漂浮在水上
)(Miranda et al.,2007)
，还由于其独特的
T
基因组和2种类型的细胞质
(Ohta&Saruhashi,1999)
，使该物种成为小麦改良的宝贵基因
。
据报道，无芒山羊草包含大量控制农艺性状的基因，如抗病性
、
害虫抗性和高蛋白含量
(Gill et al.,1983,Damania&Pecetti,1990,Dimov&Zaharieva,1993)
，是小麦遗传改良优异的基因资源
。
[0003]山羊草物种已被用于开发小麦
‑
山羊草杂交种，其中已报道了抗白粉病基因
Pm12、Pm13、Pm32、Pm19
和
Pm35
的转移和鉴定
(Jia et al.,1996,Ceoloni et al.,1992,Lutz et al.,1995,Hsam et al.,2003,Miranda et al.,2007)。
然而，小麦和无芒山羊草的远缘杂交比较少，仅发现小麦无芒山羊草部分双两倍体和染色体附加系对白粉病具有抗性
(Liu et al.,2015)。
然而，仍然没有小麦和无芒山羊草的易位系被开发
。
[0004]在无芒山羊草染色体分子研究方面，相关研究较少
。
仅见
Liu
等
(2015)
利用
EST
‑
STS
和
EST
‑
SSR
标记对无芒山羊草的
7T
附加系进行研究，鉴定了
13
对可用来在小麦染色体背景下追踪无芒山羊草
7T
染色体的特异性分子标记
。
然而，至今未有研究报道无芒山羊草
6T
染色体特异分子标记的建立情况
。
我们的前期研究发现，中国春
‑
无芒山羊草双二倍体
TA8024
对小麦白粉病免疫，
TA8024
和绵阳
11
的
BC1F3代中的
6T
附加系和
6TS.7AL
易位系对小麦白粉病免疫，而其他染色体的易位和附加系等材料均高感白粉病，这表明，无芒山羊草
6T
染色体含有抗白粉病基因，因而，开发无芒山羊草
6T
染色体特异分子标记，对筛选鉴定杂交分离群体材料以及选育抗病小麦品系
/
品种均具有重要意义
。

技术实现思路

[0005]为了解决以上现有技术中没有无芒山羊草
6T
染色体特异
PCR
标记的问题，本专利技术提供了一种能够快捷
、
有效
、
简便地鉴定待测样本中是否含有无芒山羊草
6T
染色体的特异分子标记
。
因此，本专利技术的目的是建立无芒山羊草
6T
染色体特异分子标记，为小麦背景中无芒山羊草
6T
染色质的检测提供了新方法
。
[0006]本专利技术提供了一种无芒山羊草
6T
染色体特异分子标记，为下列四对引物中的一对以上的组合，其碱基序列如下：
[0007]CINAU2570:
[0008]F
：5’‑
AGGTGGTGATTTCAGAGGCA
‑3’
，编号为
SEQ ID NO.1
；
[0009]R
：5’‑
CCGTGAAAAGCTAGACTCTGC
‑3’
，编号为
SEQ ID NO.2
；
[0010]CINAU2683
：
[0011]F
：5’‑
AGATCTCTTTAGGGATGCGCT
‑3’
，编号为
SEQ ID NO.3
；
[0012]R
：5’‑
CCAACCTGTAAGCTGCGC
‑3’
，编号为
SEQ ID NO.4
；
[0013]CINAU1553
：
[0014]F
：5’‑
CCTACCTCGTCCACCACAAG
‑3’
，编号为
SEQ ID NO.5
；
[0015]R
：5’‑
GCCGGATCTTCTTCATCACG
‑3’
，编号为
SEQ ID NO.6
；
[0016]TNAC1731
：
[0017]F
：5’‑
TGTTGCTTTCAGAGCGAATTT
‑3’
，编号为
SEQ ID NO.7
；
[0018]R
：5’‑
TTGCTCCACCGAGATCACTAC
‑3’
，编号为
SEQ ID NO.8
；
[0019]本专利技术中所述的无芒山羊草
6T
染色体特异分子标记的应用，具体为使用无芒山羊草
6T
染色体特异分子标记对待测材料基因组总
DNA
进行
PCR
扩增，对小麦背景中是否含有无芒山羊草
6T
染色体进行检测或辅助检测，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种无芒山羊草
6T
染色体特异分子标记为下列四对引物中的一对以上的组合，其碱基序列如下：
CINAU2570:F
：5’‑
AGGTGGTGATTTCAGAGGCA
‑3’
，编号为
SEQ ID NO.1
；
R
：5’‑
CCGTGAAAAGCTAGACTCTGC
‑3’
，编号为
SEQ ID NO.2
；
CINAU2683
：
F
：5’‑
AGATCTCTTTAGGGATGCGCT
‑3’
，编号为
SEQ ID NO.3
；
R
：5’‑
CCAACCTGTAAGCTGCGC
‑3’
，编号为
SEQ ID NO.4
；
CINAU1553
：
F
：5’‑
CCTACCTCGTCCACCACAAG
‑3’
，编号为
SEQ ID NO.5
；
R
：5’‑
GCCGGATCTTCTTCATCACG
‑3’
，编号为
SEQ ID NO.6
；
TNAC1731
：
F
：5’‑
TGTTGCTTTCAGAGCGAATTT
‑3’
，编号为
SEQ ID NO.7
；
R
：5’‑
TTGCTCCACCGAGATCACTAC
‑3’
，编号为
SEQ ID NO.8。2.
权利要求1所述的一种无芒山羊草
6T
染色体特异分子标记的应用，其特征在于，使用无芒山羊草
6T
染色体特异分子标记进行
PCR
扩增，对小麦背景中是否含有无芒山羊草
6T
染色体进行检测或辅助检测；
PCR
产物经聚丙烯酰胺电泳，引物
CINAU2570、CINAU2683
和
CINAU1553
扩增出长度为
350bp
的特异
DNA
条带，含有山羊草
6T
染色体；用限制性内切酶
TaqI
对引物
TNAC1731
扩增的
PCR
产物进行酶切后电泳，具有长度约为
750bp
的多态性条带，含有山羊草
6T
染色体
。3.
根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的检测或辅助检测的步骤如下：
(1)
以待测的可能含有无芒山羊草
6T
染色体的小麦背景系的基因组总
...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐文竞，刘成，韩冉，汪晓璐，王开，祁广，曾小雪，庄亚妹，
申请(专利权)人：山东省农业科学院作物研究所，
类型：发明
国别省市：