一种赤芝子实体多糖及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种赤芝子实体多糖及其制备方法和应用，本发明专利技术的制备方法以赤芝子实体为原料，通过水提及碱提、分级醇沉、脱蛋白、离子交换柱层析、分子筛柱层析等步骤制备得到。本发明专利技术提取出了新的赤芝子实体多糖GL2

【技术实现步骤摘要】
一种赤芝子实体多糖及其制备方法和应用


[0001]本专利技术属于医药
，具体涉及一种赤芝子实体多糖及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]神经退行性疾病(Neurodegenerative disease)，是一种由于神经退行性变，涉及多个免疫细胞的神经元的结构与功能逐渐丧失，导致神经元结构和/或功能恶化的疾病。如阿尔兹海默病、帕金森综合征和亨廷顿氏症等都是常见的神经退行性疾病。
[0003]神经退行性疾病影响全球约5000万人，根据统计报告显示，世界老龄化人口(60岁及以上)将从2019年的7.03亿(9％)上升到2050年的15亿(16％)，这意味着未来几年神经退行性疾病的患病率将会增加。
[0004]在人体内，小胶质细胞在神经元发育、神经调节，突触传递中发挥重要作用。激活小胶质细胞和星形胶质细胞等细胞的炎症反应会增加神经退行性疾病风险，小胶质细胞的过度活化会导致促炎细胞因子的过度产生，如肿瘤坏死因子TNF
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α、白细胞介素IL
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1β和被认为是神经退行性疾病标志的一氧化氮NO，促使神经炎症的发生，从而导致神经退行性病变。因此抑制小胶质细胞过度活化所介导的神经炎症是治疗神经退行性疾病的重要策略。
[0005]目前，阿尔兹海默病和帕金森综合征等神经退行性疾病将成为仅次于心血管疾病的全球性第二大死因。虽然目前许多医疗措施可以缓解神经退行性疾病症状，许多新兴技术在治疗神经退行性疾病的研究中取得许多成就，但市面上的治疗药物疗效有限，只能延缓病情恶化。目前治疗策略存在治疗效果有限，治疗周期长，药物毒副作用较大等不良作用，这都促使研究者寻找更加高效低毒的活性物质，开发更有效的治疗方案。如今，从天然产物中提取活性成分防治神经退行性疾病越来越受到研究者的关注，其中天然植物中提取高效低毒的多糖有望成为防治神经退行性疾病的重要物质。
[0006]赤芝子实体为多孔菌科真菌赤芝Ganoderma lucidum(Leyss.ex Fr.)Karst.的干燥子实体，主要产于华东地区，山东、安徽、浙江、江苏、江西、福建等地。性甘味平，归心、肺、肝、肾经，有补气、安神、止咳、平喘的作用。用于心神不宁，失眠心悸，肺虚咳喘，虚劳气短，不思饮食等症的治疗。在相关技术中发现赤芝子实体含有多糖、三萜、生物碱、甾醇、脂肪酸等化学成分，现代药理活性研究主要集中在抗肿瘤、抗衰老、抗氧化等方面，对赤芝子实体多糖在防治神经退行性疾病和精神疾病方面的研究少见报道。

技术实现思路

[0007]本专利技术旨在至少解决上述现有技术中存在的技术问题之一。为了提高多糖的得率、简化多糖提取、分离和纯化步骤，本专利技术提出一种赤芝子实体多糖及其制备方法和应用，其中采用水提醇沉和碱提醇沉法提取多糖，并采用以不同浓度NaCl溶液为洗脱液的离子交换柱层析和以水为洗脱液的分子筛柱层析的方法进行分离纯化，制备出一种首次制备出赤芝子实体多糖GL2
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2，其为赤芝精多糖；本专利技术得到的赤芝子实体多糖GL2
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2的主链是由甘露糖、葡萄糖、半乳糖组成，具有显著的抗神经炎活性，并且本专利技术还筛选出了含
量高、活性强的赤芝子实体多糖部位，同样具有显著的抗神经炎活性。
[0008]本专利技术的第一个方面，提供了一种赤芝子实体多糖GL2
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2，所述赤芝子实体多糖GL2
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2是由甘露糖、葡萄糖、半乳糖和岩藻糖组成的杂多糖；其中，所述赤芝子实体多糖GL2
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2的主链是由甘露糖、葡萄糖、半乳糖组成，所述赤芝子实体多糖GL2
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2的结构式为：
[0009][0010]R2的结构式为：
[0011][0012]其中，所述结构式中的a、b、c和d的范围为1～1000。
[0013]本专利技术的第二个方面，提供了本专利技术第一个方面所述的赤芝子实体多糖GL2
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2的制备方法，包括以下步骤：取赤芝子实体，水提后进行分级醇沉、脱蛋白、离子交换柱层析、分子筛柱层析分离，洗脱后即得赤芝子实体多糖GL2
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2。
[0014]在本专利技术的一些实施方式中，所述赤芝子实体为赤芝的干燥子实体。
[0015]在本专利技术的一些实施方式中，所述赤芝子实体的切块大小为3～5cm。
[0016]在本专利技术的一些实施方式中，所述水提包括以下步骤：用5～15倍赤芝子实体体积的水在60～100℃条件下对赤芝子实体提取9～18h，重复提取3次。
[0017]在本专利技术的一些实施方式中，所述分级醇沉步骤为：加入乙醇进行醇沉，使溶液中乙醇的体积浓度为A％、B％，静置后分离上清液和沉淀物；其中，所述醇沉时溶液中乙醇的体积浓度A％、B％的大小关系为10≤A＜B＜100。
[0018]在本专利技术的一些实施方式中，所述醇沉时溶液中乙醇体积浓度A％、B％的大小分
别为10≤A＜60，60≤B＜80。
[0019]在本专利技术的一些实施方式中，所述静置的时间为10～28小时。
[0020]在本专利技术的一些实施方式中，所述脱蛋白的方法为Sevag法，所述脱蛋白后还包括透析、浓缩、冻干步骤；所述透析中所使用的透析袋的截留分子量为500Da～1500Da。
[0021]在本专利技术的一些实施方式中，所述透析袋的截留分子量为1000Da。
[0022]在本专利技术的一些实施方式中，所述离子交换柱层析中所使用的是离子交换纤维素柱或离子交换凝胶柱。
[0023]在本专利技术的一些实施方式中，所述离子交换柱层析中使用水或NaCl溶液进行洗脱；所述NaCl溶液的浓度为0.01M～0.05M。
[0024]在本专利技术的一些实施方式中，所述离子交换柱层析后还包括以下步骤：使用苯酚
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硫酸法绘制洗脱曲线，根据洗脱曲线收集糖部分，浓缩、冷冻干燥后，用水溶解离心获得上清液；所述上清液用于后续分子筛柱层析。
[0025]在本专利技术的一些实施方式中，所述分子筛柱选用Sephadex G或Sephacryl S系列分子筛色谱柱。
[0026]在本专利技术的一些实施方式中，所述分子筛柱层析中使用水进行洗脱。
[0027]在本专利技术的一些实施方式中，所述分子筛柱层析后还包括以下步骤：使用苯酚
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硫酸法绘制洗脱曲线，根据洗脱曲线收集糖部分，浓缩、冷冻干燥。
[0028]在本专利技术的一些实施方式中，所述浓缩的条件为：在40～70℃下进行减压浓缩
[0029]本专利技术的第三个方面，提供了本专利技术第一个方面所述的赤芝子实体多糖GL2
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2在制备预防或治疗神经退行性疾病或其并发症的药物、保健品或功能食品中的应用。
[0030]在本专利技术的一些实施方式中，所述神经退行性疾病为由神经炎症导致的神经退行性疾病。
[0031]在本专利技术中，所述赤芝子实体多糖GL2
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2能够抑制小胶质细胞分泌促炎本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种赤芝子实体多糖GL2
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2，其特征在于，所述赤芝子实体多糖GL2
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2是由甘露糖、葡萄糖、半乳糖和岩藻糖组成的杂多糖；其中，所述赤芝子实体多糖GL2
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2的主链是由甘露糖、葡萄糖、半乳糖组成，所述赤芝子实体多糖GL2
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2的结构式为：其中，R1的结构式为：RI：R2的结构式为：R2：其中，所述结构式中的a、b、c和d的范围为1～1000。2.权利要求1所述的赤芝子实体多糖GL2
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2的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：取赤芝子实体，水提后进行分级醇沉、脱蛋白、离子交换柱层析、分子筛柱层析分离，洗脱后即得赤芝子实体多糖GL2
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2。3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述分级醇沉步骤为：加入乙醇进行醇沉，使溶液中乙醇的体积浓度为A％、B％，静置后分离上清液和沉淀物；其中，所述醇沉时溶液中乙醇的体积浓度A％、B％的大小关系为10≤A＜B＜100。...

【专利技术属性】
技术研发人员：严春艳，余茜，曹超，廖月婵，
申请(专利权)人：广东药科大学，
类型：发明
国别省市：