大麻二酚在制备治疗和/或预防鹅膏菌中毒的药物中的应用制造技术

本发明专利技术涉及药物研发技术领域，尤其涉及大麻二酚在制备治疗和/或预防鹅膏菌中毒的药物中的应用。本发明专利技术为大麻二酚在制备治疗和/或预防鹅膏菌中毒的药物中的应用。本发明专利技术建立C57BL/6J小鼠和L

【技术实现步骤摘要】
大麻二酚在制备治疗和/或预防鹅膏菌中毒的药物中的应用


[0001]本专利技术涉及药物研发
，尤其涉及大麻二酚在制备治疗和/或预防鹅膏菌中毒的药物中的应用。

技术介绍

[0002]野生菌中毒是危害公众健康的突出公共卫生问题。据报道90％毒蕈中毒，是由含有鹅膏肽类毒素的鹅膏菌所致。鹅膏菌属鹅膏菌科，是一个广布世界的大型真菌属，含鹅膏肽类毒素的约有30种，α
‑
鹅膏毒肽是其中的主要致死毒素之一。
[0003]α
‑
鹅膏毒肽(α
‑
Amanitin，α
‑
AMA)是一种从鹅膏菌中分离出来的剧毒双环八肽，因其化学性质稳定，不会受高温的影响而破坏，并且能抵抗酶和酸的降解，增加食用者的中毒风险。α
‑
AMA主要的靶器官是肝脏，可直接抑制RNA聚合酶Ⅱ活性，阻碍mRNA转录与蛋白质合成，导致肝细胞坏死。但由于α
‑
AMA的毒理机制复杂，目前针对误食含有α
‑
AMA鹅膏菌而引发的中毒事件，特别是重症患者，尚无明显有效的治疗方法和特效解毒药。基于此，提出本专利技术。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供大麻二酚在制备治疗和/或预防鹅膏菌中毒的药物中的应用。
[0005]为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
[0006]本专利技术提供了大麻二酚在制备治疗和/或预防鹅膏菌中毒的药物中的应用。
[0007]本专利技术还提供了大麻二酚在制备治疗和/或预防α
‑
鹅膏毒肽中毒的药物中的应用。
[0008]本专利技术还提供了大麻二酚在制备提高细胞抗凋亡能力，降低细胞凋亡水平的药物中的应用。
[0009]作为优选，所述细胞凋亡是由鹅膏菌中毒或α
‑
鹅膏毒肽中毒引起的。
[0010]本专利技术还提供了大麻二酚在制备增强细胞抗氧化能力的药物中的应用。
[0011]作为优选，所述增强细胞抗氧化能力是通过上调Nrf2和抗氧化酶的活性实现的。
[0012]本专利技术还提供了大麻二酚在制备预防和/或治疗肝损伤的药物中的应用。
[0013]作为优选，所述肝损伤是由鹅膏菌中毒或α
‑
鹅膏毒肽中毒引起的。
[0014]本专利技术还提供了大麻二酚在制备增强肝组织抗氧化能力的药物中的应用。
[0015]作为优选，所述增强肝组织抗氧化能力是通过上调Nrf2和抗氧化酶的活性实现的。
[0016]本专利技术提供了大麻二酚在制备治疗和/或预防鹅膏菌中毒的药物中的应用。
[0017]本专利技术建立C57BL/6J小鼠和L
‑
02细胞α
‑
鹅膏毒肽中毒模型，选用大麻二酚作为干预药物，明确大麻二酚在α
‑
鹅膏毒肽诱导肝细胞凋亡和氧化应激中的作用。结果发现：α
‑
鹅膏毒肽暴露后会引起小鼠肝细胞凋亡和氧化应激，导致小鼠死亡，在体外实验中，α
‑
鹅膏毒
肽也导致L
‑
02细胞凋亡和氧化应激。大麻二酚可上调Nrf2和抗氧化酶的活性，改善小鼠肝细胞和L
‑
02细胞凋亡和氧化应激水平，增加小鼠存活率。本研究表明大麻二酚可通过缓解α
‑
鹅膏毒肽诱导的细胞凋亡和氧化应激发挥肝保护作用，其机制与上调Nrf2和抗氧化酶的活性有关，证明大麻二酚可作为鹅膏菌中毒的潜在治疗药物。
附图说明
[0018]图1为α
‑
AMA对L
‑
02细胞活性的影响(A图为10μMα
‑
AMA作用于L
‑
02细胞24h后光学显微镜(10
×
)下的细胞形态；B图为不同浓度的α
‑
AMA作用L
‑
02细胞24h后的细胞活性；C图为不同浓度的α
‑
AMA作用L
‑
02细胞24h后凋亡因子的表达情况；D图为1μMα
‑
AMA作用L
‑
02细胞不同时间时凋亡因子的表达情况)。
[0019]图2为CBD拮抗α
‑
AMA诱导的细胞凋亡(A为CBD对暴露于α
‑
AMA的L
‑
02细胞活性的影响；B为AnnexinV/PI双重染色检测L
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02细胞凋亡情况；C为TUNEL荧光染色检测L
‑
02细胞凋亡的情况；D为Westernblot检测凋亡因子的表达情况)。
[0020]图3为CBD对L
‑
02细胞的氧化应激的影响(A表示不同处理的L
‑
02细胞内ROS水平；B表示不同处理的L
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02细胞内SOD、CAT、GSH的水平及MDA的含量；C表示不同处理的L
‑
02细胞内Nrf2、HO
‑
1、NQO1的表达水平)。
[0021]图4为CBD对a
‑
AMA诱导的小鼠肝损伤的影响(A表示α
‑
AMA中毒小鼠生存率曲线；B表示不同浓度给药3dα
‑
AMA中毒小鼠的生存率曲线；C表示不同组别小鼠的肝功能指标)。
[0022]图5为CBD对α
‑
AMA中毒小鼠肝组织凋亡水平的影响(A表示不同组别小鼠肝脏组织中的细胞凋亡情况；B表示不同组别小鼠肝组织的凋亡水平)。
[0023]图6为CBD对α
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AMA中毒小鼠肝脏氧化应激的影响(A表示不同组别小鼠肝脏组织中的CAT、GSH、SOD以及MDA的活性；B表示不同组别小鼠肝脏组织中Nrf2、HO
‑
1、NQO1的表达水平)。
具体实施方式
[0024]下面结合实施例对本专利技术提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本专利技术保护范围的限定。
[0025]本专利技术实施例中所用的人肝细胞系(L
‑
02细胞)，购自于中国科学院细胞库(上海)。
[0026]本专利技术实施例中所用的α
‑
鹅膏毒肽(α
‑
AMA)，购自美国MCE公司(MedChemExpress)。
[0027]本专利技术所述的大麻二酚13956
‑
29
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1(CBD)，购自成都普斯生物科技股份有限公司(CHENGDU PUSH BIO
‑
TECHNOLOGY CO.,LTD)。
[0028]本专利技术实施例所述的C57BL/6J小鼠为8～12周龄的雄鼠，体重19～23g，购自昆明医科大学动物部。
[0029]本专利技术实施例所述的CCK
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8检测检测方法，为使用CCK
‑
8试剂盒进行检测，CCK
‑
8试剂盒购自爱必信生物科本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.大麻二酚在制备治疗和/或预防鹅膏菌中毒的药物中的应用。2.大麻二酚在制备治疗和/或预防α
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鹅膏毒肽中毒的药物中的应用。3.大麻二酚在制备提高细胞抗凋亡能力，降低细胞凋亡水平的药物中的应用。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述细胞凋亡是由鹅膏菌中毒或α
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鹅膏毒肽中毒引起的。5.大麻二酚在制备增强细胞抗氧化能力的药物中的应用。6.根据权利要求5所述的应用，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：曾晓锋，王浩伟，杨根梦，李娟，王尚文，张瑞林，程浩，王婵，苗霖，
申请(专利权)人：昆明医科大学，
类型：发明
国别省市：