一种线纹海马的生长性状相关的微卫星标记及其应用制造技术

本发明专利技术提供一种线纹海马的生长性状相关的分子标记及其应用，所述的分子标记的核苷酸序列为SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2。本发明专利技术再一个方面提供所述的分子标记的一种用途，是在筛选具有生长优势的线纹海马个体中的应用。本发明专利技术通过对不同生长性状的线纹海马品种的扩增产物进行分析，获得了与线纹海马生长性状相连锁的微卫星标记，使用该微卫星标记可以筛选具有更好生长潜力的线纹海马个体，从而为线纹海马的遗传育种操作提供有效的分子标记。马的遗传育种操作提供有效的分子标记。马的遗传育种操作提供有效的分子标记。

【技术实现步骤摘要】
一种线纹海马的生长性状相关的微卫星标记及其应用


[0001]本专利技术提供一种线纹海马的生长性状相关的微卫星标记及其应用，属于水产养殖品种的遗传育种


技术介绍

[0002]海马又被称为“水马”，唐代陈藏器《本草拾遗》中首次出现“海马”一词，并沿用至今。海马是一味常用名贵动物类中药材，具有温肾壮阳、散结消肿的功效。药理研究表明海马类药材具有性激素样作用以及抗炎、抗氧化、抗肿瘤和提高机体免疫力等功能。近年来海洋随生态环境的变化、近海污染的加剧和人类的过度捕捞对海马的摄食、栖息环境及海马种群的繁衍均造成了严重的破坏。目前海马的野生种群已经濒危，人工增养殖已成为满足市场需求,保护海马资源的唯一选择。我国人工养殖的海马种类主要有三斑海马、大海马，少量的鲍氏海马、日本海马以及从美国引进的线纹海马，但养殖海马面临着繁殖效率低、幼苗成活率低、池塘网箱养殖成活率低、不同生长阶段对饵料的不同需求等问题。
[0003]线纹海马(Hippocampus erectus)隶属于海龙科、海龙属，主要分布于美洲海岸,是原产于美洲地区的海马品种，又名灰海马。最大体长可达27cm，寿命3～4年，2009年由我国学者从美国引进。相对国内传统养殖的三斑海马跟大海马更加适合人工养殖。人工环境下3个月可以长至12cm，6个月可以长至16cm，成活率可以达到90％以上，具有生长速度快、成活率高、抗病能力强等特点。
[0004]然而,线纹海马经过多代养殖驯化加之近亲繁殖，出现繁殖能力降低、性早熟、体型偏小、生长速度减缓、抗病力下降等现象。因此，对线纹海马进行良种选育迫在眉睫。
[0005]养殖实践中线纹海马的最佳养殖水温为24～25℃，在此温度范围外线纹海马的死亡率增加，生长速率也受到影响。而在山东海区的养殖的池塘水体，在6月中下旬海水温度会从24℃开始升温至25～27℃，7月温度维持在27～29℃，8月温度会升到29～31℃，直至9月中旬水温才会降至25度。
[0006]在目前的养殖过程中，夏天高温天气的控温成本是影响养殖户收入的主要因素之一。而且，夏天池塘养殖海马唯一受限是水温，即如能使养殖的线纹海马品系的最适生长水温(24～25℃)提高3度，其养殖的经济效益也会大大提高。因此，筛选能够在相对高温(高于25℃，但低于其耐受的最高温度)条件下也具有稳定生长性能的线纹海马的个体/品系就成为线纹海马遗传育种的研究热点。

技术实现思路

[0007]本专利技术的目的是提供一种线纹海马的生长性状相关的分子标记及其应用，即通过分析在高于线纹海马的最适生长温度(高于25℃，但低于其耐受的最高温度)的海水中养殖的正常生长群体和生长缓慢群体的微卫星引物扩增产物，来筛选与生长性状相连锁的分子标记，并使用筛选的分子标记来筛选亲本用于线纹海马的遗传育种。
[0008]本专利技术首先提供与线纹海马生长性状相连锁的分子标记，所述分子标记为微卫星
位点HE
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8和HE
‑
10，其中HE
‑
8的核苷酸序列如下：
[0009]GGACGAGGTCACGTTGATGCGACCCACGATCTCTATGAGCTGAGGAAGCCTTCAGAGGTAGCATAAAAAAAAGGAACGAATGAATTTGATGTCTGAATACACTTACACTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGTGCGTCTCACAGCTGGTTGACCACCCAAAGCAAGCTTTCCCATCCGGTGGTCCCTTCATGCTCTAGTTGGTGGTCGTAGAGAAGGAGCAAGGCACTCAGCATCTCCCTGCTGCCGATG(SEQ ID NO:1)；
[0010]其中HE
‑
10的核苷酸序列如下：
[0011]CGCCGGAAGATGTGTACAGATAAAGTTGATTTATATATATAT ATATATATATATATATATATATATATTTCTTTTTTCTCCTTCCTGGG TGAAAGCTGTG(SEQ ID NO:2)。
[0012]本专利技术再一个方面提供所述的分子标记的一种用途，是在筛选具有生长优势的线纹海马个体中的应用；
[0013]本专利技术还提供一种筛选线纹海马亲本的方法，所述的方法是检测上述分子标记的特异片段来筛选线纹海马亲本，其中微卫星位点HE
‑
8的特异性片段的长度为272bp，HE
‑
10的特异性片段的长度为96bp；
[0014]所述的方法，其一种方式是PCR扩增方法，其中检测HE
‑
8的引物对，其序列信息如下：
[0015]正向引物F:GGACGAGGTCACGTTGATGCGA(SEQ ID NO:3)、反向引物R:CATCGGCAGCAGGGAGAT(SEQ ID NO:4)，
[0016]检测HE
‑
10的引物对，其序列信息如下：
[0017]F:CGCCGGAAGATGTGTACAGAT(SEQ ID NO:5)、
[0018]R:CACAGCTTTCACCCAGGAA(SEQ ID NO:6)。
[0019]本专利技术通过对不同生长性状的线纹海马品种的扩增产物进行分析，获得了与线纹海马生长性状相连锁的微卫星标记，使用该微卫星标记可以筛选具有更好生长潜力的线纹海马个体，从而为线纹海马的遗传育种操作提供有效的分子标记。
附图说明
[0020]图1：线纹海马体长随生长日龄变化图，
[0021]图2：30日龄时正常生长组和非正常生长组特定生长率和肥满度图。
[0022]图3：基因组DNA电泳检测结果图；
[0023]图4：微卫星位点HE
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8的ABI分形图；
[0024]图5：微卫星位点HE
‑
10的ABI分形图。
具体实施方式
[0025]下面结合实施例和附图对本专利技术进行详细的描述。
[0026]实施例1：筛选获得在30℃条件下的正常生长群体和生长缓慢群体
[0027]在申请人前期工作中进行了线纹海马在30℃养殖条件下具有更高生长性能的个体的筛选，将筛选的个体作为亲本育苗，并将育种后的鱼苗再次在30℃进行培养，在培养4个月后根据生长性状分为正常生长群体和生长缓慢群体。具体的步骤如下：
[0028]1)2019年6月份在滨州海阔水产有限公司选择成熟的、生长速度较快的大规格个体线纹海马作为亲鱼，按照一定的雌雄亲鱼比例养殖于容积为300L的塑料水槽中。实验设
雄雌数量比为1:2、2:3、1:1、3:2、2:1等5种配对方式，每种配对方式亲鱼的密度不一。1:2配对方式设1
♀
+2
♂
、4
♀
+8
♂
、8
♀
+16
♂
等3个实验组；2:3配对方式设2<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种与线纹海马生长性状相连锁的分子标记，其特征在于，所述的分子标记的核苷酸序列为SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2。2.权利要求1所述分子标记在筛选具有生长优势的线纹海马个体中的应用。3.一种筛选线纹海马亲本的方法，其特征在于，所述的方法是检测权利要求1所述的分子标记的特异片段来筛选线纹海马亲本。4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述的方法是使用DNA分析仪进行自动荧光检测来进行特异片段的分型。5.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述的特异片段，其中核苷酸序列为SEQ ID NO:1的分子标记的特异性片段的长度为272bp，核苷酸序列为SEQ ID NO:2的分子标记的特异性片段的长度为96bp。6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述的核苷酸序列为SEQ ...

【专利技术属性】
技术研发人员：于晓清，叶海斌，樊英，李莉，许拉，刁菁，王淑娴，王晓璐，王友红，盖春蕾，付金亮，
申请(专利权)人：滨州海阔水产有限公司，
类型：发明
国别省市：