【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于具有提高的感染性的AAV病毒颗粒的AAV产生系统
[0001]序列表的引用
[0002]创建于2021年2月1日并且大小为475千字节(486,939字节)的以命名为“2021
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§
1.52(e)(5)通过引用并入本文。
[0003]本专利技术涉及用于制备腺相关病毒(AAV)病毒颗粒的方法。本专利技术还涉及本文描述的AAV病毒颗粒以及与其相关的组合物、方法、用途和试剂盒。
技术介绍
[0004]腺相关病毒(AAV)是据信需要辅助腺病毒进行复制的小型非致病性卫星病毒。AAV在结构上与腺病毒类似，但具有较小的二十面体核衣壳。AAV是具有在末端有至少一个反向末端重复序列(ITR)的单链DNA基因组的无包膜病毒。例如，AAV2血清型可以具有在末端有两个145个核苷酸长的ITR的、大约...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于制备重组腺相关病毒(rAAV)的方法，所述方法包括以下步骤：在具有有效量的过渡金属的培养基中培养能够产生rAAV衣壳的宿主细胞；其中有效量的所述过渡金属增加VP1、VP2或VP3蛋白到所述rAAV衣壳中的掺入。2.一种用于制备重组腺相关病毒(rAAV)的方法，所述方法包括以下步骤：在具有纳摩尔浓度的过渡金属的培养基中培养宿主细胞，所述宿主细胞能够产生rAAV衣壳。3.一种用于制备重组腺相关病毒(rAAV)的方法，所述方法包括以下步骤：在具有微摩尔浓度的过渡金属的培养基中培养宿主细胞，所述宿主细胞能够产生rAAV衣壳。4.一种用于制备重组腺相关病毒(rAAV)的方法，所述方法包括以下步骤：在具有有效量的过渡金属的培养基中培养能够产生rAAV衣壳的宿主细胞；其中有效量的所述过渡金属增加VP1和VP3蛋白到所述rAAV衣壳中的掺入；其中所述rAAV衣壳具有大于在相同条件下但缺乏所述有效量的所述过渡金属的情况下产生的rAAV衣壳的VP1和VP3蛋白浓度的VP1和VP3蛋白浓度。5.一种用于制备重组腺相关病毒(rAAV)的方法，所述方法包括以下步骤：在具有有效量的过渡金属的培养基中培养能够产生rAAV衣壳的宿主细胞；其中有效量的所述过渡金属增加VP1蛋白到所述rAAV衣壳中的掺入。6.一种用于制备重组腺相关病毒(rAAV)的方法，所述方法包括以下步骤：在具有有效量的半胱氨酸蛋白酶抑制剂的培养基中培养宿主细胞，所述宿主细胞能够产生rAAV衣壳；其中所述有效量的半胱氨酸蛋白酶抑制剂增加VP1、VP2或VP3蛋白到所述rAAV衣壳中的掺入。7.一种rAAV衣壳，其通过根据权利要求1至6中任一项所述的方法制备，其中所述rAAV衣壳具有大于在相同条件下但缺乏所述有效量的所述过渡金属的情况下产生的rAAV衣壳的VP1、VP2或VP3蛋白浓度的VP1、VP2或VP3蛋白浓度。8.一种rAAV衣壳，其通过根据权利要求1至6中任一项所述的方法制备，其中所述rAAV衣壳表现出增强的感染性。9.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述宿主细胞是非哺乳动物宿主细胞。10.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述宿主细胞是昆虫细胞。11.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述过渡金属选自以下中的一者或多者：铜、钪、钛、钒、铬、锰、铁、钴、镍、铜、锌、钇、锆、铌、钼、锝、钌、铑、钯、银、镉、铪、钽、钨、铼、锇、铱、铂、金、汞、铼、锇、铱、铂、金、汞、以及12.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述过渡金属是过渡金属盐。13.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述过渡金属选自以下中的一者或多者：硫酸铜、硝酸铜、硒化铜、氢氧化铜、氧化铜、磷酸铜、硅酸铜、硼酸铜、碳酸铜、氯化铝、氯化镁、硒化锂、碳酸钠、氯化锂、磷酸氢钠、偏硅酸钠、氢氧化锶、磷酸三钠、氟化钾、硫酸镁、氯化钙、硫酸钠、硫酸铝、四硼酸钠、硫酸镁、溴化镁、硫酸铝铷、氢氧化钡、硫酸铝钾、硝酸镁、磷酸氢钠、硫酸镍、硫酸锌、硫酸铍、硝酸锂、氯化锶、硝酸锌、焦磷酸钠、溴化钙、硝酸
铜、硝酸铝、四硼酸钠、氟化银、碘化钙、溴化锂、碘化锂、溴化锶、硝酸钙、碘化锶、溴化钠和硝酸锶、乳酸钠铝、乙酸钠、脱氢乙酸钠、丁氧基乙氧基乙酸钠、辛酸钠、柠檬酸钠、乳酸钠、二羟基甘氨酸钠、葡萄糖酸钠、谷氨酸钠、羟基甲烷磺酸钠以及草酸钠。14.根据权利要求1、4和5中任一项所述的方法，其中所述有效量的范围为约1nM至约1mM。15.根据权利要求1、4和5中任一项所述的方法，其...
【专利技术属性】
技术研发人员：维沙尔，
申请(专利权)人：生物马林药物股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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