一种测定石杉碱甲粗品中偶氮二异丁腈的方法技术

本发明专利技术涉及一种测定石杉碱甲粗品中偶氮二异丁腈的方法，所述方法步骤如下：步骤1，对照品溶液的配制：取偶氮二异丁氰对照品加甲醇溶解，流动相

【技术实现步骤摘要】
一种测定石杉碱甲粗品中偶氮二异丁腈的方法


[0001]本专利技术涉及一种药品的检测方法，特别涉及一种测定石杉碱甲粗品中偶氮二异丁腈的方法
。

技术介绍

[0002]石杉碱甲，又名：石杉碱钾
A
；石杉碱
A
；
‑
石杉碱甲
A,
卷柏石松验
,
哈伯因；石杉碱甲
(5R,9R,11E)
‑5‑
氨基
‑
11
‑
乙叉基
‑
5,6,9,10
‑
四氢
‑7‑
甲基
‑
5,9
‑
甲撑环辛并
(B)
吡啶
‑
2(1H)
酮
CAS
号
102518
‑
79
‑6，分子式
C15H18N2O
，分子量
242.32
，结构式
[0003][0004]石杉碱甲是一种可逆性胆碱酯酶抑制剂，对真性胆碱酯酶具有选择性抑制作用
。
生物活性高，有较高的脂溶性，分子小，易透过血脑屏障，进入中枢后较多地分布于大脑的额叶
、
颞叶
、
海马等与学习和记忆有密切联系的脑区，在低剂量下对乙酰胆碱酯酶
(AChE)
有强大的抑制作用，使分布区内神经突触间隙的乙酰胆碱
(ACh)
含量明显升高，从而增强神经元兴奋传导，强化学习与记忆脑区的兴奋作用，起到提高认知功能
、
增强记忆保持和促进记忆再现的作用
。
[0005]偶氮二异丁腈为石杉碱甲中间产品
LE
‑
10
→
LE
‑
11
过程中参与反应，结构式及反应过程如下：
[0006][0007][0008]LE
‑
11
经过3步反应得到
LE
‑
消旋体，再经过手性拆分后浓干得到石杉碱甲粗品，对石杉碱甲进行一步精制即得到石杉碱甲成品
。
[0009]在上述反应中，偶氮二异丁腈存在未完全反应有部分残留的风险，残留的偶氮二异丁腈会影响成品的质量，甚至可能影响药物的药效和毒性，进入人体后再血液
、
肝脏
、
脑等组织内可代谢为剧毒的氢腈酸，因此，有必要建立一种针对石杉碱甲粗品中偶氮二异丁
腈的检测方法
。

技术实现思路

[0010]本专利技术的目的在于提供一种石杉碱甲粗品中偶氮二异丁腈的检测方法
。
[0011]本专利技术所述方法步骤如下：
[0012]步骤1，对照品溶液的配制：取偶氮二异丁氰对照品加甲醇溶解，流动相
A
稀释后再用溶剂稀释；
[0013]步骤2，供试品溶液的配制：取石杉碱甲粗品加甲醇溶解，用流动相
A
稀释；
[0014]步骤3，加标供试品溶液配制：取石杉碱甲粗品加甲醇溶解，加入偶氮二异丁氰储备液，用流动相
A
稀释；
[0015]步骤4，测定：取对照品溶液，供试品溶液，加标供试品溶液注入
HPLC
色谱仪，得到色谱图，根据色谱图，计算供试品溶液中各组分的含量
。
[0016]其中，步骤1对照品溶液的配制：步骤如下：
[0017]取偶氮二异丁氰对照品
20
‑
40mg
，置
50
‑
200ml
量瓶中，加甲醇
20
‑
40ml
超声溶解，流动相
A
稀释到刻度，精密量取
0.5
‑
2ml
置
10
‑
100ml
量瓶中，用溶剂稀释至刻度，摇匀
。
[0018]其中溶剂为甲醇：流动相
A
＝
30
：
70。
[0019]其中，步骤2供试品溶液的配制：步骤如下：
[0020]取石杉碱甲粗品
0.2
‑
0.4g
，精密称定，置5‑
20ml
量瓶中，加甲醇2‑
4ml
溶解，用流动相
A
稀释到刻度，摇匀，过滤
。
[0021]其中，步骤3，加标供试品溶液配制：步骤如下：
[0022]取石杉碱甲粗品
0.2
‑
0.4g
，精密称定，置5‑
20ml
量瓶中，加甲醇2‑
4ml
溶解，加入偶氮二异丁氰储备液
0.5
‑
2ml
，用流动相
A
稀释至刻度，摇匀
。
[0023]其中，偶氮二异丁氰储备液配制方法如下：精密称取偶氮二异丁氰对照品
30mg
置
100ml
量瓶中，加溶剂溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取
5ml
置
25ml
量瓶中，用溶剂稀释至刻度
。
其中溶剂为甲醇：流动相
A
＝
30
：
70。
[0024]其中，测定过程中的色谱条件如下：
[0025]以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相
(Agilent Poroshell120 PFP
，
4.6
×
150mm
，
2.7
μ
m)
，以
0.02mol/L
磷酸二氢钾缓冲液
(
磷酸调节
pH
至
4.50)
为流动相
A
，乙腈为流动相
B
，检测波长
345nm
，流速
0.7ml/min
，柱温
30℃
，进样量
100
μ
l。
按下表进行梯度洗脱
。
[0026][0027]最优选的，本专利技术方法，步骤如下：
[0028]步骤1，对照品溶液的配制：取偶氮二异丁氰对照品约
30mg
，置
100ml
量瓶中，加甲醇
30ml
超声溶解，用流动相
A
稀释到刻度，精密量取
1ml
置
50ml
量瓶中，用溶剂稀释至刻度，摇匀
。
[0029]其中溶剂为甲醇：流动相
A
＝
30
：
70。
[0030]步骤2，供试品溶液的配制：取石杉碱甲粗品约
0.3g
，精密称定，置
10ml...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种测定石杉碱甲粗品中偶氮二异丁腈的方法，所述方法步骤如下：步骤1，对照品溶液的配制：取偶氮二异丁氰对照品加甲醇溶解，流动相
A
稀释后再用溶剂稀释；步骤2，供试品溶液的配制：取石杉碱甲粗品加甲醇溶解，用流动相
A
稀释；步骤3，加标供试品溶液配制：取石杉碱甲粗品加甲醇溶解，加入偶氮二异丁氰储备液，用流动相
A
稀释；步骤4，测定：取对照品溶液，供试品溶液，加标供试品溶液注入
HPLC
色谱仪，得到色谱图，根据色谱图，计算供试品溶液中各组分的含量
。2.
根据权利要求1所述的方法，其中，步骤1对照品溶液的配制：步骤如下：取偶氮二异丁氰对照品
20
‑
40mg
，置
50
‑
200ml
量瓶中，加甲醇
20
‑
40ml
超声溶解，流动相
A
稀释到刻度，精密量取
0.5
‑
2ml
置
10
‑
100ml
量瓶中，用溶剂稀释至刻度，摇匀；其中溶剂为甲醇：流动相
A
＝
30
：
70。3.
根据权利要求1所述的方法，其中，步骤2供试品溶液的配制：步骤如下：取石杉碱甲粗品
0.2
‑
0.4g
，精密称定，置5‑
20ml
量瓶中，加甲醇2‑
4ml
溶解，用流动相
A
稀释到刻度，摇匀，过滤
。4.
根据权利要求1所述的方法，其中，步骤3，加标供试品溶液配制：步骤如下：取石杉碱甲粗品
0.2
‑
0.4g
，精密称定，置5‑
20ml
量瓶中，加甲醇2‑
4ml
溶解，加入偶氮二异丁氰储备液
0.5
‑
2ml
，用流动相
A
稀释至刻度，摇匀
。5.
根据权利要求1所述的方法，其中，偶氮二异丁氰储备液配制方法如下：精密称取偶氮二异丁氰对照品
30mg
置
100ml
量瓶中，加溶剂溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取
5ml
置
25ml
量瓶中，用溶剂稀释至刻度；其中溶剂为甲醇：流动相
A
＝
30
：
70。6.
根据权利要求1所述的方法，其中，测定过程中的色谱条件如下：以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相
(Agilent Poroshell120 PFP
，
4.6
×
150mm
，
2.7
μ
m)
，以
0.02mol/L
磷酸二氢钾缓冲液
...

【专利技术属性】
技术研发人员：林金新，吴海旭，郑协，林红，方水霞，
申请(专利权)人：万邦德制药集团有限公司，
类型：发明
国别省市：