一种鉴定春兰品种的方法技术

本发明专利技术提供一种春兰品种分子鉴定方法，是基于简单重复序列基因组分析的春兰品种分子鉴定方法，通过优化春兰简单重复序列（ＳＳＲ）分析的技术体系，明晰春兰品种的遗传关系。本发明专利技术直接检测品种的ＤＮＡ序列差异，既具有遗传稳定性，又具有信息多样性，可以明确区分和判别春兰的不同品种，实现准确、快速鉴定品种，从而为品种鉴定、种苗市场管理、品种保护及良种繁育等提供可靠技术。本发明专利技术优化春兰基因组ＤＮＡ的ＳＳＲ技术体系，使春兰品种分子鉴定速度快、时间短、多态性多，能够在交易前解决兰苗真实性检验等问题，避免造成生产者或购买者的损失。本方法运用１个及以上有效引物可以区分和鉴定所有春兰品种，实现春兰品种的ＤＮＡ指纹鉴定。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种鉴定春兰品种的方法，通过以下步骤实现：　　（１）提取已知１１２个春兰品种基因组ＤＮＡ；　　（２）对所提取的春兰品种基因组ＤＮＡ分别进行聚合酶链式反应，得到简单重复序列产物；　　（３）以６％变性聚丙烯酰胺凝胶为介质对简单重复序列产物进行电泳分离，总上样量为５μＬ，其中４μＬ为扩增产物，另加１μＬ　Ｌｏａｄｉｎｇ　Ｂｕｆｆｅｒ，在６０Ｗ下恒功率电泳至ｍａｒｋｅｒ跑至胶板２／３处；　　（４）电泳结束后，经Ｂａｓｓａｍ银染方法在数码相机下照相，分别得到简单重复序列标准图谱；　　（５）选择清晰简单重复序列图谱，采用“０－１”系统记录谱带，将有带的赋值为１，无带的赋值为０，读取春兰每个品种材料在不同引物扩增的产物的电泳谱带的数据，建立数据库；　　（６）基于Ｄｉｃｅ系数按非加权配对算术平均法进行聚类分析，得到系统聚类树；（７）将所需鉴定的春兰品种按上述步骤（１）－（５），得到所需要鉴定春兰品种的序列图谱，将此序列图谱与标准图谱进行比较判定，得到分析鉴定结果。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：李方，黄焱，夏宜平，陈昆松，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：86[中国|杭州]